生物化學(xué) DNA的復(fù)制修復(fù)和重組 2

DNA的復(fù)制，修復(fù)和重組

DNA

Replication，Repair，and

Recombination1日程表：12月12日：DNA的復(fù)制與修復(fù)-2

生化討論-1（動態(tài)生化部分）12月19日：轉(zhuǎn)錄與基因表達調(diào)控12月22日：蛋白質(zhì)的生物合成-112月26日：蛋白質(zhì)的生物合成-2

01月02日：生化討論-2（分子生物學(xué)部分）01月05日：生化討論-3（靜態(tài)生化部分）01月09日：復(fù)習答疑01月10日：上午考試目錄Section1.

引言Section2.本章背景Section3.基于DNA的DNA復(fù)制Section

4.

DNA的損傷及修復(fù)Section

5.

基于RNA的DNA的復(fù)制Section

6.

DNA的重組Section

7.突變及單核苷酸多態(tài)性Section

8.DNA相關(guān)的生物技術(shù)23Section

5.基于RNA的DNA的復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄的發(fā)現(xiàn)：實驗現(xiàn)象：A.1964年，Temin等首次發(fā)現(xiàn)：DNA合成抑制劑可以遏制鳥類肉瘤病毒ASV等RNA腫瘤病毒所造成的感染。B.

ASV子代病毒顆粒的產(chǎn)生被放線菌素D所抑制PS:放線菌素D嵌入DNA雙螺旋的小溝中，與DNA形成復(fù)合體，阻礙RNA多聚酶的功能，抑制RNA的合成。表明在RNA腫瘤病毒的RNA復(fù)制過程中需要合成DNA。說明轉(zhuǎn)錄對于RNA腫瘤病毒增殖可能是必須的。

4假想：DNA是RNA腫瘤病毒在復(fù)制和致癌過程中的中間物這一過程大致為：RNA腫瘤病毒－DNA原病毒－RNA腫瘤病毒。逆轉(zhuǎn)錄（reversetranscription）：

是指在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下以RNA為模板合成DNA的過程。所有的RNA腫瘤病毒都是逆轉(zhuǎn)錄病毒，并不是所有的逆轉(zhuǎn)錄病毒都致癌。HIV5逆轉(zhuǎn)錄酶（reversetranscriptase）定義：RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶。具有三種酶活性，即RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶、DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶和RNaseH的活性。合成DNA的方向：逆轉(zhuǎn)錄酶合成DNA的方向為5’－3’合成DNA的引物：1.不能從頭合成DNA。引物為逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝時從宿主細胞獲得的tRNA分子。2.一些鳥類逆轉(zhuǎn)錄病毒以宿主tRNATrp為引物，而鼠類逆轉(zhuǎn)錄病毒則以宿主細胞tRNAPro為引物。3.

RNaseH活性：是指逆轉(zhuǎn)錄酶可以從5’－3’和3’－5’兩個方向水解DNA-RNA雜合分子中的RNA。6Section

6.

DNA的重組DNA重組（DNArecombination）指DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生的遺傳信息的重新共價組合過程。包括同源重組、特異位點重組和轉(zhuǎn)座重組等類型，廣泛存在于各類生物。7Section

7.突變及單核苷酸多態(tài)性點突變，缺失和插入，重排單核苷酸多態(tài)性：主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。藥物基因組學(xué)定義為在基因組學(xué)的基礎(chǔ)上，通過將基因表達或單核苷酸的多態(tài)性與藥物的療效或毒性聯(lián)系起來，研究藥物如何由于遺傳變異而產(chǎn)生不同的作用8Section

8.

DNA相關(guān)的生物技術(shù)聚合酶鏈式反應(yīng)PCR9DNA電泳GelElectrophoresis10限制性內(nèi)切酶分析restrictionfragmentanalysis11SouthernBlottingofDNAFragments12DideoxyChainTerminationMethodforSequencingDNA1314RT-PCRAnalysiso