第八章薄層色譜法葉樺珍福建衛(wèi)生97課件

第八章

薄層色譜法葉樺珍福建衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院教學(xué)目標(biāo)掌握薄層色譜法的特點(diǎn)、基本原理、操作方法熟悉結(jié)果分析方法了解薄層色譜法在藥物分析方面的應(yīng)用第二節(jié)

基本原理

一、分離分析過(guò)程

二、定性參數(shù)

比移值（retardationfactor，Rf）是指組分移動(dòng)的距離與展開(kāi)劑移動(dòng)距離的比值,其數(shù)值等于基線至斑點(diǎn)中心的距離和基線至展開(kāi)劑前沿的距離比值。

例：計(jì)算右圖中中A、B、B'三個(gè)斑點(diǎn)的Rf

解：根據(jù)：A、B、B'三個(gè)斑點(diǎn)的Rf分別為

（一）?固定相的種類

吸附劑、化學(xué)鍵合相、離子交換劑、色譜凝膠等

三、固定相（二）固定相的選擇

應(yīng)根據(jù)試樣的性質(zhì)選擇吸附劑的種類與活性。如試樣為弱酸性，宜選擇硅膠、酸性氧化鋁或中性氧化鋁作為吸附劑。若試樣中的各組分無(wú)色且無(wú)熒光，可選擇添加了無(wú)機(jī)熒光劑的硅膠。一般而言，對(duì)極性小的試樣，可選擇吸附活性較強(qiáng)的吸附劑以保證對(duì)試樣有足夠的吸附力；對(duì)極性大的試樣，宜選擇活性較弱的吸附劑以免試樣被牢牢吸附，造成Rf（比移值）過(guò)小。（一）展開(kāi)劑的種類?1.單一展開(kāi)劑對(duì)于成分簡(jiǎn)單的混合物，可用單一展開(kāi)劑。2.多元展開(kāi)劑對(duì)于組分結(jié)構(gòu)差異較小或極性接近的試樣，通常采用多元溶劑（可從二元至六元）作展開(kāi)劑以提高分離效果。四、展開(kāi)劑（二）展開(kāi)劑的選擇方法選擇的依據(jù)是“相似相溶”原理，即極性大的組分選用極性大的展開(kāi)劑分離，極性小的組分選用極性小的展開(kāi)劑分離。第二節(jié)

操作方法

薄層色譜法的一般操作流程為：

制板→加樣→展開(kāi)→斑點(diǎn)定位→結(jié)果分析

一、薄層板制備和處理1.制板前準(zhǔn)備

制板前先選擇適當(dāng)?shù)闹С治?，要求表面光潔、平整無(wú)油污，且具有一定的機(jī)械強(qiáng)度，能經(jīng)受一定的高溫，對(duì)所用溶劑和顯色劑呈化學(xué)惰性。通常采用玻璃板，也可以用塑料板或鋁基板。常用有5cm×20cm，10cm×10cm，10cm×20cm，20cm×20cm等幾種規(guī)格。2.制板過(guò)程

制板時(shí)除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水置于研缽中，按同一方向研磨混合均勻并去除氣泡，倒入已放置好支持物的專用的涂布器中進(jìn)行涂布。涂布完畢取下薄層板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干后，在110℃烘30分鐘以去除吸附劑所吸附的水分，冷置室溫后隨即使用或置于干燥箱或干燥器中保存?zhèn)溆谩６?、加樣材料?zhǔn)備毛細(xì)管試樣標(biāo)準(zhǔn)品畫(huà)原點(diǎn)線（點(diǎn)樣基線距底邊1.5~2.0cm）毛細(xì)管點(diǎn)樣迅速吹干

材料準(zhǔn)備（層析缸或展開(kāi)槽）傾入展開(kāi)劑，開(kāi)始展開(kāi)將展開(kāi)劑倒入層板缸薄層板放在無(wú)展開(kāi)劑一邊，飽和