天冬酰胺酶用于急性淋巴細(xì)胞性白血病的治療

天冬酰胺酶用于急性淋巴細(xì)胞性

白血病的治療組員：傅祥李堅(jiān)張子謙蘇志有一、研究背景二、臨床藥物Asparec?三、總結(jié)與展望研究背景一、急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）兒童期最常見的癌癥形式，

美國(guó)每年約診斷有2900名20歲以下的患者最可治愈的癌癥之一，治療兒童的緩解率超過95％一種起源于B系或T系淋巴祖細(xì)胞的腫瘤性疾病二、天冬氨酸酶一類重要的蛋白水解酶，參與機(jī)體的新陳代謝及生物調(diào)控作用活性中心由兩個(gè)催化性天冬氨酸殘基組成天冬酰胺酶將L-天冬酰胺分解，

癌細(xì)胞突變無(wú)法合成天冬酰胺，

但又需要大量的氨基酸進(jìn)行代謝與增值，

從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。研究背景1、大腸桿菌來源的天冬酰胺酶EC-ASNase及其PEG修飾產(chǎn)物PEG-EC-ASNase，先作為臨床一線用藥。2、天然歐文氏菌來源的天冬酰胺酶ASNase（n-crisantaspase）3、Sepctrila?德國(guó)的MedacGmbH公司研發(fā)的重組天冬酰胺酶2016年1月獲EMA（歐洲藥品管理局）批準(zhǔn)上市治療對(duì)象：出生到18歲的嬰兒和兒童問題：臨床數(shù)據(jù)表明使用這兩種藥物的患者

至少有17%會(huì)發(fā)生超敏反應(yīng)研究背景三、治療藥物急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）治療的二線藥物，在大腸桿菌來源的酶出現(xiàn)過敏反應(yīng)時(shí)使用臨床藥物Asparec?Asparec?AlizeEUSApharma和爵士合作開發(fā)新型聚乙二醇化重組歐文氏菌L-天冬酰胺酶

（PEG-r-crisantaspase）目前正在進(jìn)行臨床三期試驗(yàn)臨床藥物Asparec?制備過程編碼枯草芽孢桿菌ENX信號(hào)肽歐文氏菌ASNase的序列接入導(dǎo)入大腸桿菌BL21菌株中得到表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的工程化菌

表達(dá)重組蛋白（r-crisantaspase）發(fā)酵至合適的細(xì)胞塊后IPTG誘導(dǎo)提取純化r-crisantaspasePEG修飾PEG-r-crisantaspase藥理學(xué)研究5U/Kg的PEG-r-crisantaspase相當(dāng)于250U/Kg的n-crisantaspase（50倍）治療效果：免疫原性研究結(jié)論：聚乙二醇化能有效降低了天冬氨酸酶的免疫原性體外細(xì)胞毒性不同敏感細(xì)胞系：PEG修飾的天冬氨酸酶表現(xiàn)出更高的活性PEG-r-crisantaspase體外水解Asn和Gln實(shí)驗(yàn)☆☆Gln的水解能力：歐文氏菌來源的ASNase顯著強(qiáng)于EC-ASNase結(jié)論：Gln消耗可增強(qiáng)ASNase對(duì)癌細(xì)胞的毒性作用解釋了細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)PEG修飾的天冬氨酸酶活性更高

PEG-r-crisantaspase對(duì)白血病小鼠的抗白血病作用結(jié)論：

PEG-r-crisantaspase能增加分解Asn，

控制白細(xì)胞的發(fā)展，提高小鼠存活時(shí)間總結(jié)展望ASNase是治療ALL中不可或缺的藥物1、天然歐文氏菌來源的ASNase（n-crisantaspase）2、Sepctrila?2016年1月獲EMA（歐洲藥品管理局）批準(zhǔn)上市ALL治療的二線藥物存在問題臨床藥物PEG-r-crisantaspase1、保留了65％的原始r-crisantaspase活性1、免疫原性問題易產(chǎn)生超敏反應(yīng)2、天冬酰胺酶ASNase的沉默失活2、通過體外體內(nèi)實(shí)驗(yàn)都證明了其良好的治療作用3、幾乎無(wú)免疫原性，不易產(chǎn)生超敏反應(yīng)參考文獻(xiàn)[1]ChienWW,AllasS,RachinelN,etal.Pharmacology,immunogenicity,andefficacyofanovelpegylatedrecombinantErwiniachrysanthemi-derivedL-asparaginase[J].Investigationalnewdrugs,2014,32(5):795-805.[2]FigueiredoL,ColePD,DrachtmanRA.AsparaginaseErwiniachrysanthemiasacomponentofamulti-agentchemotherapeuticregimenforthetreatmentofpatientswithacutelymphoblasticleukemiawhohavedevelopedhypersensitivitytoE.coli-derivedasparaginase[J].Expertreviewofhematology,2016,9(3):227-234.[3]vanderSluisIM,VroomanLM,PietersR,etal.Consensusexpertrecommendationsforidentificationandmanagementofasparaginasehypersensitivityandsilentinactivation[J].haematologica,2016,101(3):279-285.[4]LopesAM,Oliveira-NascimentoL,RibeiroA,etal.Therapeuticl-asparaginase:upstream,downstreamandbeyond[J].Criticalreviewsinbiotechnology,2017,37(1):82-99.

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