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文檔簡介

實驗五

酵母菌形態(tài)和細胞結(jié)構(gòu)的觀察

顯微鏡下測量微生物細胞的大小及計數(shù)

實驗目的觀察酵母菌的形態(tài)、細胞結(jié)構(gòu)及掌握區(qū)分酵母菌死活細胞的染色方法學習并掌握利用顯微測微尺測量微生物大小的方法學習并掌握利用血球計數(shù)板測定微生物細胞數(shù)的原理和方法酵母菌單細胞的真核微生物,常生長于含糖基質(zhì)菌落大而厚,圓形,表面光滑濕潤,粘性,常見白色、土黃色、紅色無性繁殖方式有芽殖和裂殖兩種,以芽殖為主若生長迅速,芽細胞連續(xù)出芽而形成串生的細胞,稱之為假菌絲有性生殖產(chǎn)生子囊孢子實驗菌種啤酒酵母(Saccharomyces

cerevisiae)熱帶假絲酵母(Candidatropicalis)熱帶假絲酵母(Candidatropicalis)觀察酵母假菌絲的形態(tài)

劃線接種于PDA薄培養(yǎng)基表面,28℃培養(yǎng)1—2天,再將無菌蓋玻片輕壓劃線處,繼續(xù)培養(yǎng)1—2天,高倍鏡下直接觀察培養(yǎng)皿背面實驗內(nèi)容啤酒酵母(Saccharomyces

cerevisiae)實驗內(nèi)容1、細胞形態(tài)的觀察美蘭(亞甲基蘭)氧化型藍色,還原型無色活細胞——代謝旺盛,還原能力強——無色老細胞——淺藍色死細胞——深藍色要求:觀察菌落特征、營養(yǎng)細胞、芽殖

S.Cerevisiae

子囊孢子(示范)實驗內(nèi)容2、顯微鏡下測量細胞大小圖2用鏡臺測微尺校正目鏡測微尺圖1安裝目鏡測微尺要求:測量10個細胞,取平均值表示方法:長×寬

例如:2~2.5×0.5~1.5μm

注意:細胞的選取2、顯微鏡下測量細胞大小3、血球計數(shù)板計數(shù)實驗內(nèi)容圖3血球計數(shù)板的構(gòu)造平面圖(中間平臺分為兩半,各有一個計數(shù)室)側(cè)面圖(中間平臺與蓋玻片之間有高度為0.1mm的間隙)實驗內(nèi)容制備菌懸液(無菌操作)5ml無菌水3、血球計數(shù)板計數(shù)血球計數(shù)板平均每小格有一個細胞時,待測樣品濃度

4×106/ml

(適用:單細胞類群)血球計數(shù)板計數(shù)要求:選取對角線9個中方格計數(shù)

取平均值

計算菌液濃度(個/ml)實驗報告:繪圖:

熱帶假絲酵母的假菌絲;啤酒酵母營養(yǎng)細胞

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