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文檔簡介
ProceduresfortheoperationofmicroagglutinationagainstHaemophilusparasuis中國獸醫(yī)協(xié)會發(fā)布I1副豬格拉菌抗體微量凝集試驗(yàn)操作規(guī)程本文件適用于副豬格拉菌的抗體水平檢測、疫病診NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范4縮略語HPS：副豬格拉菌（HaemophilusparasuPBS：磷酸緩沖鹽溶液（phosphatebelancedsolution）SPF：無特定病原體動物（SpecificPath2靜脈無菌采血。采集后的血液室溫靜置不少于2h，待自然凝固后解，分別劃線接種于胰蛋白胨大豆瓊脂TSA培養(yǎng)基（含5%無菌牛血清和0.01%N），數(shù)，用滅菌生理鹽水適量稀釋，使各菌株的活菌量約為3.0×l09CFU/mL。37.4.3菌液滅活按體積比向菌液與等體積的弗氏完全佐劑混合充分乳化，制成弗氏完全佐劑滅活疫苗。另1份滅活菌液與等體積的弗為副豬格拉菌血清5型標(biāo)準(zhǔn)菌株免疫組，第三組為副豬格拉菌血清13型標(biāo)準(zhǔn)菌株免疫組。免疫方法為：首先用弗氏完全佐劑滅活疫苗進(jìn)行免疫，免疫5只SPF兔，每只兔多點(diǎn)注射免疫（兩后腿足部、背部皮41個(gè)檢測反應(yīng)的加入量(μL）陽性血清或陰性血清各50μL，充分混勻后依次作2倍系微量振蕩器混勻，加封蓋膜，置37℃孵育24h。1-2+3455溶液配置A.1平衡鹽溶液A.2培養(yǎng)基稱取磷酸二氫鉀0.
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