TBJZMXH 508-2024 桔梗組培與林下栽培技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB05BJZMXH北京林木種苗產(chǎn)業(yè)協(xié)會團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/BJZMXH508—2024桔梗組培與林下栽培技術(shù)規(guī)程TechnicalregulationfortissuecultureandunderstorycultivationofPlatycodongrandiflorus2024-12-01發(fā)布 2024-12-31實(shí)施北京林木種苗產(chǎn)業(yè)協(xié)會??發(fā)布T/BJZMXH508T/BJZMXH508—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1組織培養(yǎng) 1準(zhǔn)備工作 1培養(yǎng)基制作 2外植體的選擇及消毒 2初代培養(yǎng) 3繼代培養(yǎng) 3生根培養(yǎng) 3種苗培養(yǎng) 3林下種植及管理 4林地環(huán)境 4整地施肥 4林下種植與養(yǎng)護(hù) 4除草 4排水 4病蟲害防治 4采收 4采收期 4采收方法 5技術(shù)檔案管理 5附錄A（資料性） 桔梗組培各階段培養(yǎng)基與激素用量配方表 6前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由北京林木種苗產(chǎn)業(yè)協(xié)會提出并歸口。本文件由北京林木種苗產(chǎn)業(yè)協(xié)會組織實(shí)施。本文件主要起草人：王文超、劉曉杰、索鵬、唐玉紅、高航、劉向麗、王桂英、溫江濤、孫秀一、李金鳳、劉小妹、辛培培、孟慧穎、王亮、李金蘋、劉士慶。T/BJZMXH508T/BJZMXH508—2024PAGEPAGE1桔梗組培與林下栽培技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了桔梗組織培養(yǎng)、林下種植及管理、采收及技術(shù)檔案管理等內(nèi)容。本文件適用于桔梗的組織培養(yǎng)與林下栽培。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB3905 環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB/T6001 育苗技術(shù)規(guī)程GB/T8321（所有部分） 農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)NY/T1868 肥料合理使用準(zhǔn)則有機(jī)肥料NY/T2306 花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。外植體explant用于組織培養(yǎng)的組織、器官、細(xì)胞及原生質(zhì)體。增殖proliferation外植體或繼代組培苗產(chǎn)生新的具有特定結(jié)構(gòu)和功能的組織或器官的現(xiàn)象。繼代培養(yǎng)subculture培養(yǎng)過程中將培養(yǎng)材料周期性分株、分割、剪截等轉(zhuǎn)接于新鮮培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖擴(kuò)繁的過程。生根培養(yǎng)rootingculture在組培瓶內(nèi)誘導(dǎo)無根芽苗產(chǎn)生根形成完整植株的培養(yǎng)過程。組織培養(yǎng)準(zhǔn)備工作消毒滅菌洗滌室每天擦拭桌面，清掃地面。每周用消毒液拖地一次。培養(yǎng)室擺放材料前及每次轉(zhuǎn)接材料時用75%酒精擦拭培養(yǎng)架。每周用消毒液拖地一次，每月對環(huán)境整體消毒一次。接種間接種間應(yīng)保持干爽整潔，每周用紫外線燈照射3h～4h。超凈工作臺接種前，應(yīng)用紫外線燈照射超凈工作臺20min～30min后用75%酒精、滅菌紗布噴灑擦拭臺面。每半年清洗超凈工作臺初效過濾網(wǎng)一次。培養(yǎng)容器和接種器械培養(yǎng)容器培養(yǎng)容器可選擇耐高溫、高壓、高透光的容器。瓶蓋應(yīng)帶濾菌透氣膜。接種器械使用前，應(yīng)對接種器械在300℃高溫條件下滅菌，放涼后備用。培養(yǎng)基應(yīng)在高溫高壓蒸汽滅菌鍋中以壓強(qiáng)0.11MPa、溫度121℃滅菌20min～30min。污染材料處理培養(yǎng)過程中被真菌和細(xì)菌污染的培養(yǎng)瓶，應(yīng)高壓滅菌后再對培養(yǎng)瓶進(jìn)行清洗。培養(yǎng)基制作培養(yǎng)基配方基本培養(yǎng)基應(yīng)采用MS母液和激素配制培養(yǎng)基母液和激素母液配制及保存方法按照NY/T2306執(zhí)行。培養(yǎng)基制作流程培養(yǎng)基制作流程如下：準(zhǔn)備好母液、蒸餾水、蔗糖、瓊脂、激素；將蒸餾水、母液、蔗糖（30g/L15g/L）、瓊脂（4.5g/L～5.5g/L）PH5.8～6.0，并加熱到沸騰；應(yīng)對配置好的溶液進(jìn)行分裝、封口、滅菌；25培養(yǎng)基保存將配置好的培養(yǎng)基放置到室溫25℃以下、干凈避光的藥品柜中保存，保存期限不應(yīng)超過7d。外植體的選擇及消毒外植體選擇宜在4～5月份，連續(xù)3d以上的晴天，采集生長旺盛、無病蟲害的當(dāng)年生嫩枝段做外植體。外植體消毒預(yù)處理2cm～3cm長莖段，剪去葉片，用洗滌靈溶液浸泡、振蕩10min～20min后，用自來水沖洗0.5h～1h。消毒處理在超凈工作臺上將預(yù)處理后的外植體放在組培瓶中，用75%酒精沒過外植體浸泡30s后倒去酒精，并用無菌水沖洗外植體3遍。將外植體轉(zhuǎn)移至新的無菌組培瓶中，再用0.1%的升汞溶液浸泡8min～10min，不斷輕搖，滅菌結(jié)束后倒出滅菌液，并用無菌水沖洗5遍，將外植體放無菌濾紙上吸干水分備用。初代培養(yǎng)在超凈工作臺上將已消毒的外植莖段兩端各剪去24～5個莖段，均勻分布，接種后將培養(yǎng)瓶口在酒精燈火焰上灼燒1s～2s，迅速蓋好瓶蓋。在培養(yǎng)瓶上標(biāo)明25℃±270～8012h/d，光照強(qiáng)度2000lx。繼代培養(yǎng)在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)30d出芽后，用已滅菌的接種剪，將芽高1.5cm以上的芽苗剪下，剪成1.5cm1020d～30d25270%～80%，光照時間12h/d，光照強(qiáng)度2000lx，繼代培養(yǎng)的第一周可暗培養(yǎng)。生根培養(yǎng)壯苗培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)基中生長的單獨(dú)芽苗剪成2cm長的莖段，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每瓶接種5段。此后依據(jù)種苗擴(kuò)繁數(shù)量要求，每隔30d轉(zhuǎn)接一次。培養(yǎng)室溫度應(yīng)控制在25℃±2℃，相對濕度70%～80%。光照時間12h/d，光照強(qiáng)度2000lx～2500lx。生根培養(yǎng)將經(jīng)過壯苗培養(yǎng)的組培苗剪成2cm長的莖段，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)20d。培養(yǎng)室溫度應(yīng)控制在25℃±2℃，相對濕度70%～80%。光照時間12h/d，光照強(qiáng)度2500lx。種苗培養(yǎng)煉苗待苗高長至4cm～5cm，根長2cm時可進(jìn)行煉苗移栽。移栽前，瓶苗應(yīng)放在有散射光的環(huán)境里封口培養(yǎng)1周。穴盤苗培養(yǎng)穴盤選擇宜選擇尺寸為54cm×28cm的72孔穴育苗盤?；|(zhì)準(zhǔn)備（草炭土按1:10.5g/L的多菌靈溶液殺毒滅菌后備用。洗苗將培養(yǎng)瓶里的組培苗輕輕取出放入清水中清洗掉表面培養(yǎng)基后分級碼放。移栽將分級后的組培苗快速移栽到育苗盤，澆透水后用500～800倍的50%多菌靈噴霧殺菌，宜放入塑料薄膜拱棚內(nèi)保濕。養(yǎng)護(hù)環(huán)境控制移栽后，前3d應(yīng)保持環(huán)境濕度100%，溫度23～283000～4000lx；第4d～10d，23～28水肥管理第10d后去掉拱棚薄膜，每天上午、下午各噴水一次，每隔7d葉面噴施微量元素水溶肥一次。容器苗培養(yǎng)準(zhǔn)備工作宜選擇5cm×5cm×7cm塑料穴盤或5cm×7cm的美植袋，將蛭石與泥炭土（草炭土）按體積比1:1混合均勻后裝盤（或袋）澆透水備用。容器苗培養(yǎng)當(dāng)苗高長至5cm～7cm時轉(zhuǎn)入容器中培養(yǎng)。在基質(zhì)中間開3cm～4cm的種植孔，將穴盤苗脫模后移入種植孔中，與基質(zhì)齊平壓實(shí)，并澆透水。培養(yǎng)20d后，待苗高長至15cm±5cm時可做定植苗栽培。林下種植及管理林地環(huán)境宜選擇郁閉度0.6以下的林地。整地施肥應(yīng)清除林間雜草、石塊等雜物。整地時深翻30cm以上，并施入腐熟農(nóng)家肥或生物有機(jī)肥。施肥量按照NY/T1868執(zhí)行。林下種植與養(yǎng)護(hù)選苗宜選擇苗高15cm±5cm的容器苗。種植方法移栽前一周應(yīng)澆一次透水。按行距25cm～30cm，株距10cm～15cm，開溝深度10cm～15cm種植，覆土壓實(shí)后澆透水。除草應(yīng)遵循“除小、除早、除了”的原則，及時中耕除草。排水遇澇時應(yīng)及時排水。病蟲害防治以預(yù)防為主，綜合防治為原則，優(yōu)先采取物理防治和生物防治措施。采收采收期嫩芽采收期宜在4～5月采收嫩芽。鮮花采收期宜在6～9月采收鮮切花，花苞透色時采收最佳。根采收期宜在10月至12月采收2年以上的根。采收方法嫩芽采收可在距地面高10cm處掐尖采收。鮮花采收可在距地面高20cm處進(jìn)行剪截，剪后枝材應(yīng)及時進(jìn)行保水處理。根采收秋季割去莖葉，采用人工或機(jī)械挖出2年以上的肉質(zhì)根，洗凈泥土，去掉根須，進(jìn)行干燥、分級。技術(shù)檔案管理按照GB/T6001執(zhí)行。附