生物制藥技術(shù)工藝流程詳解及練習(xí)題

綜合試卷第=PAGE1*2-11頁（共=NUMPAGES1*22頁） 綜合試卷第=PAGE1*22頁（共=NUMPAGES1*22頁）PAGE①姓名所在地區(qū)姓名所在地區(qū)身份證號密封線1.請首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名，身份證號和所在地區(qū)名稱。2.請仔細(xì)閱讀各種題目的回答要求，在規(guī)定的位置填寫您的答案。3.不要在試卷上亂涂亂畫，不要在標(biāo)封區(qū)內(nèi)填寫無關(guān)內(nèi)容。一、選擇題1.生物制藥技術(shù)中，以下哪種技術(shù)用于生產(chǎn)重組蛋白？

A.轉(zhuǎn)基因技術(shù)

B.重組DNA技術(shù)

C.蛋白質(zhì)工程

D.生物發(fā)酵技術(shù)

2.以下哪種生物制藥工藝屬于下游工藝？

A.細(xì)胞培養(yǎng)

B.蛋白質(zhì)分離純化

C.轉(zhuǎn)染技術(shù)

D.細(xì)胞裂解

3.生物制藥生產(chǎn)過程中，以下哪種設(shè)備用于去除雜質(zhì)？

A.超濾

B.離心

C.沉淀

D.紫外線消毒

4.以下哪種方法用于檢測生物制藥中的內(nèi)毒素？

A.ELISA

B.水平板凝集試驗(yàn)

C.免疫熒光

D.氣相色譜

5.生物制藥生產(chǎn)過程中，以下哪種技術(shù)用于提高蛋白表達(dá)量？

A.優(yōu)化培養(yǎng)基成分

B.調(diào)整溫度和pH值

C.改善細(xì)胞培養(yǎng)條件

D.以上都是

6.以下哪種方法用于檢測生物制藥中的蛋白質(zhì)含量？

A.比色法

B.熒光法

C.電泳

D.以上都是

7.生物制藥生產(chǎn)過程中，以下哪種技術(shù)用于去除病毒？

A.紫外線消毒

B.過濾

C.離心

D.以上都是

8.以下哪種生物制藥工藝屬于上游工藝？

A.細(xì)胞培養(yǎng)

B.蛋白質(zhì)分離純化

C.轉(zhuǎn)染技術(shù)

D.細(xì)胞裂解

答案及解題思路：

1.答案：B

解題思路：重組DNA技術(shù)是利用DNA重組技術(shù)將外源基因插入到宿主細(xì)胞中，使其表達(dá)特定的蛋白質(zhì)，因此用于生產(chǎn)重組蛋白。

2.答案：B

解題思路：下游工藝主要包括蛋白質(zhì)的分離純化，這是在生物制藥生產(chǎn)過程中對產(chǎn)物進(jìn)行分離和純化的階段。

3.答案：A

解題思路：超濾是一種用于去除溶液中分子量較大雜質(zhì)的技術(shù)，常用于生物制藥生產(chǎn)中的純化過程。

4.答案：B

解題思路：水平板凝集試驗(yàn)是檢測內(nèi)毒素的經(jīng)典方法，它利用內(nèi)毒素與特異性抗體的結(jié)合來檢測樣品中的內(nèi)毒素。

5.答案：D

解題思路：提高蛋白表達(dá)量通常需要通過多種手段，包括優(yōu)化培養(yǎng)基成分、調(diào)整溫度和pH值、改善細(xì)胞培養(yǎng)條件等。

6.答案：D

解題思路：檢測蛋白質(zhì)含量的方法有多種，包括比色法、熒光法、電泳等，這些方法可以單獨(dú)使用或結(jié)合使用來提高檢測的準(zhǔn)確性。

7.答案：D

解題思路：去除病毒的方法有多種，包括紫外線消毒、過濾、離心等，這些方法可以單獨(dú)使用或結(jié)合使用以實(shí)現(xiàn)病毒的有效去除。

8.答案：A

解題思路：上游工藝主要包括細(xì)胞培養(yǎng)，這是生物制藥生產(chǎn)的第一步，涉及細(xì)胞的選擇、培養(yǎng)和擴(kuò)增。二、填空題1.生物制藥技術(shù)中，將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞的過程稱為______。

答案：基因轉(zhuǎn)染

解題思路：基因轉(zhuǎn)染是將外源基因?qū)胨拗骷?xì)胞的過程，它是實(shí)現(xiàn)基因工程化生產(chǎn)的關(guān)鍵步驟。

2.生物制藥生產(chǎn)過程中，用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)的細(xì)胞稱為______。

答案：工程細(xì)胞

解題思路：工程細(xì)胞是指經(jīng)過基因改造，能夠生產(chǎn)特定蛋白質(zhì)的細(xì)胞，如重組DNA技術(shù)中的宿主細(xì)胞。

3.生物制藥生產(chǎn)過程中，用于去除雜質(zhì)的工藝稱為______。

答案：純化

解題思路：純化是生物制藥工藝中的重要環(huán)節(jié)，旨在從混合物中去除雜質(zhì)，提高產(chǎn)品的純度和質(zhì)量。

4.生物制藥生產(chǎn)過程中，用于檢測內(nèi)毒素的試驗(yàn)稱為______。

答案：鱟試驗(yàn)

解題思路：鱟試驗(yàn)是一種檢測內(nèi)毒素的方法，通過鱟血液中的凝固酶活性變化來判斷樣品中是否含有內(nèi)毒素。

5.生物制藥生產(chǎn)過程中，用于檢測蛋白質(zhì)含量的方法有______、______、______。

答案：紫外吸收法、電泳法、比色法

解題思路：

紫外吸收法：通過測量蛋白質(zhì)溶液在特定波長下的吸光度來檢測蛋白質(zhì)含量。

電泳法：利用蛋白質(zhì)分子在電場中的遷移速度差異來分離和定量蛋白質(zhì)。

比色法：通過化學(xué)反應(yīng)特定顏色的物質(zhì)，根據(jù)顏色深淺來定量蛋白質(zhì)。三、判斷題1.生物制藥技術(shù)中，重組DNA技術(shù)是將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞的過程。（）

答案：√

解題思路：重組DNA技術(shù)（RebinantDNATechnology）是生物技術(shù)中的一個(gè)重要分支，其核心是將外源基因（目的基因）插入到宿主細(xì)胞的基因組中，使其在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。這一過程通常涉及限制酶切割、連接酶連接等步驟，最終實(shí)現(xiàn)目的基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)。

2.生物制藥生產(chǎn)過程中，細(xì)胞培養(yǎng)屬于上游工藝。（）

答案：√

解題思路：在生物制藥的生產(chǎn)過程中，上游工藝通常指的是從細(xì)胞培養(yǎng)到收獲生物制品的整個(gè)過程，包括細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵、提取等步驟。細(xì)胞培養(yǎng)是這一過程中的第一步，因此屬于上游工藝。

3.生物制藥生產(chǎn)過程中，離心用于去除雜質(zhì)。（）

答案：√

解題思路：離心是生物制藥生產(chǎn)中常用的分離技術(shù)之一，通過高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生離心力，使混合物中的不同成分根據(jù)密度差異分離。在去除雜質(zhì)、分離細(xì)胞和蛋白質(zhì)等步驟中，離心是一個(gè)重要的操作。

4.生物制藥生產(chǎn)過程中，ELISA用于檢測內(nèi)毒素。（）

答案：×

解題思路：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）是一種用于檢測特定抗原或抗體的技術(shù)，廣泛應(yīng)用于生物制藥中的質(zhì)量控制。但是檢測內(nèi)毒素通常使用的是LAL（LimulusAmebocyteLysate）測試，而不是ELISA。

5.生物制藥生產(chǎn)過程中，比色法用于檢測蛋白質(zhì)含量。（）

答案：√

解題思路：比色法是一種常用的定量分析方法，通過比較樣品與標(biāo)準(zhǔn)溶液的顏色深淺來測定蛋白質(zhì)含量。在生物制藥生產(chǎn)過程中，比色法是檢測蛋白質(zhì)含量的常用方法之一。四、簡答題1.簡述生物制藥技術(shù)的基本工藝流程。

原料處理與細(xì)胞培養(yǎng)：收集或提取生物原料，如血液、細(xì)胞組織等，進(jìn)行必要的預(yù)處理，如提取、分離等，然后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

發(fā)酵與細(xì)胞培養(yǎng)：在適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵或細(xì)胞培養(yǎng)，促進(jìn)目標(biāo)生物制品的。

提取與純化：從發(fā)酵液中提取目標(biāo)蛋白質(zhì)，通過一系列的分離純化技術(shù)，如離心、層析、電泳等，提高目標(biāo)產(chǎn)品的純度。

制劑：將純化后的目標(biāo)蛋白質(zhì)與輔料等混合，制備成最終的產(chǎn)品形式，如注射劑、片劑等。

質(zhì)量檢驗(yàn)：對產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量檢驗(yàn)，保證產(chǎn)品的安全性和有效性。

包裝與儲(chǔ)存：將合格的產(chǎn)品進(jìn)行包裝，并按照規(guī)定的儲(chǔ)存條件進(jìn)行儲(chǔ)存。

2.簡述生物制藥生產(chǎn)過程中，上游工藝和下游工藝的區(qū)別。

上游工藝：也稱為發(fā)酵工藝，主要涉及生物材料的制備，包括細(xì)胞的培養(yǎng)、發(fā)酵、提取等過程。上游工藝注重細(xì)胞生長條件、營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)、生物量的積累等，旨在獲得高濃度的生物制品。

下游工藝：也稱為分離純化工藝，主要涉及生物制品的提取、純化和制劑等過程。下游工藝注重產(chǎn)品的分離純化效果、質(zhì)量控制和生產(chǎn)效率等。

3.簡述生物制藥生產(chǎn)過程中，蛋白質(zhì)分離純化的主要方法。

離心分離：根據(jù)蛋白質(zhì)的密度、形狀和大小，通過離心力將其分離。

沉淀法：利用蛋白質(zhì)的溶解度差異，通過添加沉淀劑使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來。

離子交換層析：根據(jù)蛋白質(zhì)表面電荷的差異，通過離子交換樹脂分離。

凝膠過濾層析：根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小，通過凝膠過濾柱分離。

親和層析：利用蛋白質(zhì)與配體之間的特異性相互作用，通過親和層析柱分離。

電泳：根據(jù)蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)和分子大小，通過電場作用進(jìn)行分離。

答案及解題思路：

1.答案：如上所述，生物制藥技術(shù)的基本工藝流程包括原料處理與細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵與細(xì)胞培養(yǎng)、提取與純化、制劑、質(zhì)量檢驗(yàn)和包裝與儲(chǔ)存等步驟。

解題思路：了解生物制藥的生產(chǎn)流程，結(jié)合實(shí)際操作步驟進(jìn)行分析。

2.答案：上游工藝注重生物材料的制備和細(xì)胞生長條件，下游工藝注重產(chǎn)品的分離純化和質(zhì)量控制。

解題思路：區(qū)分上游和下游工藝的定義和作用，結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)過程進(jìn)行對比。

3.答案：蛋白質(zhì)分離純化的主要方法包括離心分離、沉淀法、離子交換層析、凝膠過濾層析、親和層析和電泳等。

解題思路：熟悉蛋白質(zhì)分離純化的常見方法，結(jié)合各種方法的原理和應(yīng)用進(jìn)行分析。五、論述題1.論述生物制藥技術(shù)中，重組DNA技術(shù)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用。

1.1重組DNA技術(shù)的原理

描述重組DNA技術(shù)的基本原理，包括目的基因的克隆、表達(dá)載體的構(gòu)建等。

1.2目的基因的選擇與克隆

討論如何選擇合適的目的基因，以及克隆目的基因的過程。

1.3表達(dá)載體的構(gòu)建

闡述構(gòu)建表達(dá)載體的過程，包括啟動(dòng)子、終止子和基因序列的插入。

1.4基因表達(dá)的調(diào)控

分析如何通過基因表達(dá)調(diào)控系統(tǒng)提高重組蛋白的表達(dá)效率。

1.5應(yīng)用案例

結(jié)合具體案例，展示重組DNA技術(shù)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用效果。

2.論述生物制藥生產(chǎn)過程中，細(xì)胞培養(yǎng)對蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響。

2.1細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理

介紹細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理，包括細(xì)胞增殖、代謝和生長環(huán)境的要求。

2.2不同細(xì)胞系對蛋白質(zhì)表達(dá)的影響

分析不同細(xì)胞系在蛋白質(zhì)表達(dá)上的差異及其原因。

2.3培養(yǎng)條件對蛋白質(zhì)表達(dá)的影響

討論培養(yǎng)基成分、溫度、pH、氧氣供應(yīng)等培養(yǎng)條件對蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響。

2.4培養(yǎng)技術(shù)對蛋白質(zhì)表達(dá)的影響

探討細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，如流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器等，對蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響。

2.5應(yīng)用案例

提供實(shí)例說明細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在不同生物制藥產(chǎn)品生產(chǎn)中的應(yīng)用。

3.論述生物制藥生產(chǎn)過程中，蛋白質(zhì)分離純化對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。

3.1蛋白質(zhì)分離純化的基本原理

描述蛋白質(zhì)分離純化的基本原理，包括層析、電泳、沉淀等方法。

3.2純化步驟對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響

分析蛋白質(zhì)在不同純化步驟中的結(jié)構(gòu)變化及其對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。

3.3純度與均一性的評估

討論如何評估蛋白質(zhì)的純度和均一性，以及這些指標(biāo)對產(chǎn)品質(zhì)量的重要性。

3.4純化過程中的質(zhì)量控制

分析蛋白質(zhì)純化過程中的質(zhì)量控制措施，如無菌操作、避免污染等。

3.5應(yīng)用案例

結(jié)合實(shí)際案例，展示蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)在生物制藥生產(chǎn)中的應(yīng)用及其對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。

答案及解題思路：

答案：

1.重組DNA技術(shù)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用主要包括：基因克隆、表達(dá)載體的構(gòu)建和基因表達(dá)調(diào)控。通過這些步驟，可以有效地表達(dá)出目的蛋白，實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。例如利用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的重組人胰島素就是典型應(yīng)用。

2.細(xì)胞培養(yǎng)對蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響主要受細(xì)胞系、培養(yǎng)條件和培養(yǎng)技術(shù)等因素的影響。例如在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，使用表達(dá)載體的細(xì)胞培養(yǎng)方法可以提