珍珠層粉在化妝品中的應(yīng)用

序號(hào)：編碼：第九屆“挑戰(zhàn)杯”廣東大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽作品申報(bào)書作品名稱：珍珠層粉在化妝品中的應(yīng)用學(xué)校全稱：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)申報(bào)者姓名（集體名稱）：羅善鍇羅冠生林韶蕓類別：√自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文 □哲學(xué)社會(huì)科學(xué)類社會(huì)調(diào)查報(bào)告和學(xué)術(shù)論文□科技發(fā)明制作A類□科技發(fā)明制作B類報(bào)送方式：□省級(jí)報(bào)送作品□高校直送作品說明1.申報(bào)者應(yīng)在認(rèn)真閱讀此說明各項(xiàng)內(nèi)容后按要求詳細(xì)填寫。2．申報(bào)者在填寫申報(bào)作品情況時(shí)只需根據(jù)個(gè)人項(xiàng)目或集體項(xiàng)目填寫A1或A2表，根據(jù)作品類別（自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文、哲學(xué)社會(huì)科學(xué)類社會(huì)調(diào)查報(bào)告和學(xué)術(shù)論文、科技發(fā)明制作）分別填寫B(tài)1、B2或B3表。所有申報(bào)者可根據(jù)情況填寫C表。3.表內(nèi)項(xiàng)目填寫時(shí)一律用鋼筆或打印，字跡要端正、清楚，此申報(bào)書可復(fù)制。4.序號(hào)、編碼由第九屆“挑戰(zhàn)杯”廣東大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽組委會(huì)填寫。5．學(xué)術(shù)論文、社會(huì)調(diào)查報(bào)告及所附的有關(guān)材料必須是中文（若是外文，請(qǐng)附中文本），請(qǐng)以4號(hào)楷體打印在A4紙上，附于申報(bào)書后，字?jǐn)?shù)在8000字左右（文章版面尺寸14.5×22cm）。6．作品申報(bào)書須按要求由各校競(jìng)賽組織協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)統(tǒng)一寄送。7.其他參賽事宜請(qǐng)向本校競(jìng)賽組織協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)咨詢。

A2申報(bào)者情況（集體項(xiàng)目）說明：1．必須由申報(bào)者本人按要求填寫；2．申報(bào)者代表必須是作者中學(xué)歷最高者，其余作者按學(xué)歷高低排列；3．本表中的學(xué)籍管理部門簽章視為申報(bào)者情況的確認(rèn)。申報(bào)者代表情況姓名羅善鍇性別男出生年月1984年9月學(xué)校華南農(nóng)業(yè)大學(xué)系別、專業(yè)、年級(jí)理學(xué)院2004級(jí)應(yīng)用化學(xué)學(xué)歷本科學(xué)制四年入學(xué)時(shí)間2004.09作品名稱珍珠層粉在化妝品中的應(yīng)用畢業(yè)論文題目通訊地址華南農(nóng)業(yè)大學(xué)華山學(xué)生宿舍19棟410室郵政編碼510640辦公電住地通訊地址華南農(nóng)業(yè)大學(xué)華山學(xué)生宿舍19棟410室郵政編碼510640住宅電話020—85285264其他作者情況姓名性別年齡學(xué)歷所在單位羅冠生男22本科華南農(nóng)業(yè)大學(xué)林韶蕓女22本科華南農(nóng)業(yè)大學(xué)資格認(rèn)定學(xué)校學(xué)籍管理部門意見以上作者是否為2006年7月1日前正式注冊(cè)在校的全日制非成人教育、非在職的高等學(xué)校中國(guó)籍?？粕?、本科生、碩士研究生或博士研究生。是□否（部門簽章）年月日院系負(fù)責(zé)人或?qū)熞庖姳咀髌肥欠駷檎n外學(xué)術(shù)科技或社會(huì)實(shí)踐活動(dòng)成果是□否負(fù)責(zé)人簽名：年月日

B1．申報(bào)作品情況（自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文）說明：1．必須由申報(bào)者本人填寫；2．本部分中的科研管理部門簽章視為對(duì)申報(bào)者所填內(nèi)容的確認(rèn)；3．作品分類請(qǐng)按作品的學(xué)術(shù)方向或所涉及的主要學(xué)科領(lǐng)域填寫；4．碩士研究生、博士研究生作品不在此列。作品全稱作品分類（D）A．機(jī)械與控制（包括機(jī)械、儀器儀表、自動(dòng)化控制、工程、交通、建筑等）B．信息技術(shù)（包括計(jì)算機(jī)、電信、通訊、電子等）C．?dāng)?shù)理（包括數(shù)學(xué)、物理、地球與空間科學(xué)等）D．生命科學(xué)（包括生物、農(nóng)學(xué)、藥學(xué)、醫(yī)學(xué)、健康、衛(wèi)生、食品等）E．能源化工（包括能源、材料、石油、化學(xué)、化工、生態(tài)、環(huán)保等）作品撰寫的目的和基本思路作品介紹：本作品是用乳酸和胰蛋白酶對(duì)珍珠層粉進(jìn)行水解，獲得含有多種氨基酸、小分子肽及微量元素的酶解液，并將酶解液應(yīng)用于化妝品中，研發(fā)具有特殊功能的化妝品。通過實(shí)驗(yàn)，本作品預(yù)計(jì)可以達(dá)到以下目的：一、為工業(yè)生產(chǎn)珍珠層粉酶解液提供優(yōu)異的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（如反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間及催化劑等等），節(jié)省工業(yè)生產(chǎn)成本，提高珍珠層粉有效成分的提取率。二、為珍珠層粉在醫(yī)療、健康等方面的應(yīng)用提供前提基礎(chǔ)。三、利用珍珠層粉含有的藥用成分，開發(fā)具有特殊功能的化妝品（如消炎、去痘、消斑、美白、抗衰老等），保護(hù)人體皮膚健康?；舅悸罚赫渲閷臃勖附庖褐苽錇V液成分檢測(cè)酸解過濾珍珠層粉濾液成分檢測(cè)酶酸過濾濾渣濾渣合并兩次濾液，濃縮，作為化妝品和醫(yī)用的原料液。成品設(shè)計(jì)：配料營(yíng)養(yǎng)液在水相配制成品乳化配方設(shè)計(jì)油相原料液配制成品成品功能性檢測(cè)：去痘、美白、抗衰老等.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及分析檢測(cè)：穩(wěn)定性、安全性等.作品的科學(xué)性先進(jìn)性及獨(dú)特之處本作品在化妝品原料液的提取中采用方開泰和王元先生提出的均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，該方法是對(duì)多因素多水平的試驗(yàn)設(shè)計(jì)提出的，具有均勻好、試驗(yàn)次數(shù)少，預(yù)報(bào)準(zhǔn)確等特點(diǎn)。廣泛用于國(guó)防、工業(yè)等的試驗(yàn)設(shè)計(jì)。本實(shí)驗(yàn)采用該方法的設(shè)計(jì)思路：根據(jù)酸—酶解珍珠層粉的反應(yīng)因素、反應(yīng)水平數(shù)及因素間可能存在的交互作用選擇合適的均勻設(shè)計(jì)表，建立試驗(yàn)方案，通過實(shí)驗(yàn)、利用方差分析和回歸分析法，建立數(shù)學(xué)模型，優(yōu)化數(shù)學(xué)模型，從而預(yù)報(bào)較佳的實(shí)驗(yàn)條件和響應(yīng)值（配方設(shè)計(jì)也會(huì)嘗試用該方法進(jìn)行設(shè)計(jì)）。一直來(lái)國(guó)內(nèi)對(duì)珍珠的水解報(bào)道較多，但能檢測(cè)出色氨酸的報(bào)道較少見，是因先用鹽酸解珍珠使色氨酸受到破壞之故。色氨酸是一種衡量蛋白質(zhì)品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，是人體所必要的氨基酸。本實(shí)驗(yàn)采用酸——酶水解法，再用高效液相色譜（HighPertormanceLiquidChromatography）對(duì)酶解液的濾液進(jìn)行分離及檢測(cè)，用原子發(fā)射光譜（AtomicEmissionSpectrometry）等對(duì)酸解液的濾液進(jìn)行微量元素的檢測(cè)，有望檢測(cè)出色氨酸及之前未能被檢測(cè)出成份。本護(hù)膚品是O/W型的潤(rùn)膚露，運(yùn)用HLB法配制而成的，離心測(cè)試為一級(jí)品，耐寒耐熱測(cè)試均為優(yōu)級(jí)品，酸性在6.0左右與人體的皮膚的酸堿性相適應(yīng)，油水乳化體系的穩(wěn)定性高。本產(chǎn)品的添加了多種透皮促進(jìn)劑，促使珍珠營(yíng)養(yǎng)液能被皮膚吸收。作品的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義本實(shí)驗(yàn)采用兼價(jià)的珍珠層粉作為原料，操作成本較低，開發(fā)出來(lái)的營(yíng)養(yǎng)護(hù)膚品較易為大眾所接受。本實(shí)驗(yàn)提取出的珍珠層粉營(yíng)養(yǎng)液可以廣泛地應(yīng)用于健康、醫(yī)療及食品工業(yè)等方面，本實(shí)驗(yàn)得到的護(hù)膚系列產(chǎn)品，將對(duì)人體的皮膚起到增強(qiáng)免疫力、消斑、抗衰老等作用，進(jìn)而保護(hù)人體皮膚健康。學(xué)術(shù)論文文摘珍珠層粉是由貝殼珍珠層研磨得到的，其成分組成和結(jié)構(gòu)與珍珠粉非常相似，因此二者有相似的藥效作用。珍珠層粉較珍珠粉的價(jià)格便宜得多，珍珠層粉完全有可能替代名貴的珍珠粉作為開發(fā)化妝品和保健食品的原料，這樣可以大大降低成本。本文采用酸酶水解的方法從珍珠層粉中提取出鈣離子、微量元素和蛋白質(zhì)，并對(duì)它們進(jìn)行處理，從而得到濃縮了的營(yíng)養(yǎng)液。并將制得的營(yíng)養(yǎng)液加入已設(shè)計(jì)好的珍珠層粉營(yíng)養(yǎng)露配方中，使其營(yíng)養(yǎng)成份更易于被人體吸收，從而提高珍珠層粉的利用價(jià)值。作品在何時(shí)、何地、何種機(jī)構(gòu)舉行的會(huì)議上或報(bào)刊上發(fā)表及所獲獎(jiǎng)勵(lì)鑒定結(jié)果請(qǐng)?zhí)峁?duì)于理解、審查、評(píng)價(jià)所申報(bào)作品具有參考價(jià)值的現(xiàn)有技術(shù)及技術(shù)文獻(xiàn)的檢索目錄主要參考文獻(xiàn)：1、方開泰,馬長(zhǎng)興.2001.正交與均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)[M].北京：科學(xué)出版社.2、樊欣,邵謙謙.2003.SAS8.X經(jīng)濟(jì)統(tǒng)計(jì)[M].北京：北京希望電子出版社.3、張洪淵,萬(wàn)海清.2002.生物化學(xué)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社.4、黃青萍，盤紅梅等.2000.珍珠的藥理作用及臨床應(yīng)用[J]．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,11（6）：564～565.5、鄭全英，毛葉盟.2004.海水珍珠與淡水珍珠的成分、藥理作用及功效[J].上每中醫(yī)約雜志,38（3）：54～55.6、裘炳毅.1995.化妝品化學(xué)與工藝技術(shù)大全[M].中國(guó)輕工業(yè)出版社.申報(bào)材料清單（申報(bào)論文一篇，相關(guān)資料名稱及數(shù)量）1.申報(bào)論文：《珍珠層粉在化妝品中的應(yīng)用》科研管理部門簽章年月日

C.當(dāng)前國(guó)內(nèi)外同類課題研究水平概述說明：1.申報(bào)者可根據(jù)作品類別和情況填寫；2.填寫此欄有助于評(píng)審。珍珠是由貝體外套膜中的珍珠囊分泌的珍珠質(zhì)沉積而成,而貝殼是直接由外套膜分泌產(chǎn)生的。鑒于二者的成分和結(jié)構(gòu)非常相似此,近年來(lái)人們?cè)趯?duì)珍珠粉綜合開發(fā)利用的同時(shí),也增加了對(duì)珍珠層粉價(jià)值開發(fā)研究,以期在利用方面以廉價(jià)的珍珠層粉替代價(jià)值昂貴的珍珠粉作為化妝品或保健品的原料,達(dá)到節(jié)約和開發(fā)并舉的目的。（一）貝殼珍珠層的成分孫家美等[1]曾用X射線熒光光譜儀法對(duì)25種淡水貝殼珍珠層進(jìn)行了多種元素的檢測(cè),共檢測(cè)出18種元素，盡管這些貝類生活環(huán)境、方式、個(gè)體大小、身體形狀、珍珠層顏色等各不相同,但其元素組成卻極為相似。主體元素是Ca,海產(chǎn)貝殼都含有Cl,有的還檢測(cè)到Br和I。陳貴卿等[2]對(duì)21種貝類進(jìn)行的X射線衍射分析發(fā)現(xiàn),有的貝類珍珠層完全由文石組成,如背角無(wú)齒蚌、褶紋冠長(zhǎng)蚌、黑珠母貝、合浦珠母貝、大珠母貝、珠母貝、企鵝珍珠貝等;而有的貝殼珍珠層則完全由方解石組成,如近江牡蠣,但這類種屬極少。就目前見到的研究珍珠層有機(jī)組成的文獻(xiàn)(國(guó)內(nèi))中,只有有關(guān)氨基酸的報(bào)道，證明氨基酸是貝殼珍珠層有機(jī)物組成的主體,且不下15種之多,以丙氨酸和甘氨酸為最多。因測(cè)試的具體貝類不同,其種類和數(shù)量略有差異,氨基酸占整個(gè)珍珠層含量的1%～5%。有的文獻(xiàn)指出,珍珠層中還含有多糖、色素等其它一些有機(jī)物,但具體的分離、測(cè)試尚未見報(bào)道。（二）在醫(yī)藥和化工方面的開發(fā)應(yīng)用曹彩等[2]對(duì)珍珠、珍珠層粉在醫(yī)療保健進(jìn)行了探測(cè)，表明珍珠、珍珠層粉從成蟲早期開始給藥能明顯延長(zhǎng)果蠅的平均壽命和最高壽命,海水珍珠和珍珠層粉對(duì)雄性果蠅效果較好。而從成蟲中期開始給藥時(shí),效果不如從成蟲早期開始給藥好。珍珠、[2]馮麗琪等[3][3]珍珠層粉對(duì)免疫功能有改善作用,對(duì)治療口腔潰瘍有一定療效[4][4]對(duì)珍珠層粉應(yīng)用范圍的拓展有助于進(jìn)一步提高珍珠養(yǎng)殖業(yè)的附加值。目前對(duì)珍珠粉和珍珠層粉的利用主要是取其氨基酸、蛋白質(zhì)和微量元素,而對(duì)在整個(gè)量上占優(yōu)勢(shì)的珍珠鈣的利用卻還很少。朱越雄等[5][5]珍珠入藥,有鎮(zhèn)心定驚、清肝除翳、收斂生機(jī)之用。近年來(lái)隨著珍珠醫(yī)藥保健品、飲品和化妝品的大量開發(fā),珍珠的價(jià)格有升無(wú)降,于是人們就將開發(fā)的目光投向了成分與其相似的貝殼珍珠層。劉承松、謝玉坎等人對(duì)大珠母貝珍珠層的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究后指出大珠母貝、合浦珠母貝的貝殼珍珠層與其天然珍珠在化學(xué)組分上基本相似,少數(shù)無(wú)機(jī)元素的差異不足以影響其藥用價(jià)值,用珍珠層代替珍珠入藥,從化學(xué)組成的相似性這一點(diǎn)來(lái)看是合理可行的。上海測(cè)試技術(shù)研究所對(duì)多種珍珠及其貝殼珍珠層的主要成分、微量元素、氨基酸種類、含量進(jìn)行對(duì)比分析后認(rèn)為:二者有相同的藥理效用,完全有可能用人們遺棄的貝殼珍珠層替代名貴的珍珠。由于貝殼珍珠層含有豐富的氨基酸和許多人體必需的微量元素且價(jià)廉易得,成為開發(fā)高級(jí)化妝品的重要原料,在起到良好保健作用的同時(shí)也會(huì)收到客觀的經(jīng)濟(jì)效益。據(jù)所查文獻(xiàn)，珍珠層粉被很多人所忽略，對(duì)其研究還比較少，除了在醫(yī)藥方面簡(jiǎn)單應(yīng)用外，大多數(shù)都被拋棄，在化妝品的應(yīng)用中還沒有它的足跡，因而，本實(shí)驗(yàn)是一個(gè)值得研究的課題。[參考文獻(xiàn)]：[1]孫家美,毛振偉。貝殼珍珠層元素的X射線熒光光譜分析。湛江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1991,11(2):25~30。[2]梁金龍,王驚濤,彭明生.貝殼珍珠層的研究與應(yīng)用[J].礦物巖石地球化學(xué)通報(bào),1999,(18):403～404.[3]曹彩,徐志,韋煥英,姚樹漢,劉元.珍珠、珍珠層粉醫(yī)療保健新用途初探[J].中國(guó)中藥雜志，1996，（21）：635～638.[4]馮麗琪,李小薇,江瑜茵,等.新生兒紅臀與局部微生物感染的關(guān)系[J].南方護(hù)理學(xué)報(bào),2004,11(5):315～316.[5]高平.復(fù)發(fā)性口腔潰瘍用山茛菪堿與珍珠層粉治療的療效觀察[J].河北醫(yī)學(xué),2002,(8):1024～1025.[6]朱越雄,宋慧春.珍珠層粉作為乳酸發(fā)酵中鈣源添加劑的研究[J].水利漁業(yè),2003,(23):14～15.D.推薦者情況及對(duì)作品的說明說明：1．由推薦者本人填寫；2．推薦者必須具有高級(jí)專業(yè)技術(shù)職稱，并是與申報(bào)作品相同或相關(guān)領(lǐng)域的專家學(xué)者或?qū)I(yè)技術(shù)人員（教研組集體推薦亦可）；3．推薦者填寫此部分，即視為同意推薦；4．推薦者所在單位簽章僅被視為對(duì)推薦者身份的確認(rèn)。推薦者情況姓名樂學(xué)義性別男年齡46職稱教授工作單位華南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院通訊地址華南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院應(yīng)用化學(xué)系郵政編碼510642單位電話020—85287010住宅電話020—85282024推薦者所在單位簽章（簽章）年月日請(qǐng)對(duì)申報(bào)者申報(bào)情況的真實(shí)性作出闡述本作品系羅善鍇等三位同學(xué)組成的小組獨(dú)立完成，查閱的文獻(xiàn)資料充實(shí)，方案可行，數(shù)據(jù)可信，結(jié)論正確。請(qǐng)對(duì)作品的意義、技術(shù)水平、適用范圍及推廣前景作出您的評(píng)價(jià)本作品開發(fā)珍珠層粉作為較廉價(jià)的化妝品添加劑，設(shè)計(jì)出合理的化妝品配方，并進(jìn)行了初步的功能性檢測(cè)，有較好的發(fā)展前景，為開發(fā)化妝品市場(chǎng)、充分利用貝殼珍珠層粉提供了可能。其它說明推薦者情況姓名楊卓鴻性別男年齡33職稱教授工作單位華南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院通訊地址華南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院應(yīng)用化學(xué)系郵編510642單位電話85280319住宅電話38902602推薦者所在單位簽章簽章日期年月日請(qǐng)對(duì)申報(bào)者申報(bào)情況的真實(shí)性作出闡述本作品是由羅善鍇等三位同學(xué)親自查閱文獻(xiàn)資料和書籍，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了詳細(xì)分析、討論，得出了初步結(jié)論，為下一步深入研究打下基礎(chǔ)。請(qǐng)對(duì)作品的意義、技術(shù)水平、適用范圍及推廣前景作出您的評(píng)價(jià)本作品以廉價(jià)的貝殼珍珠層粉為原料，并利用其提取液為添加劑，研制高級(jí)化妝品，選題新穎。查閱大量文獻(xiàn)資料，設(shè)計(jì)與文獻(xiàn)方法不同的配方，通過系列實(shí)驗(yàn)篩選出較好配方設(shè)計(jì)，具有深入研究的價(jià)值。作品的結(jié)果表明珍珠層粉加入到化妝品中效果明顯，有較好的推廣應(yīng)用前景。其它說明學(xué)校組織協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)確認(rèn)并蓋章（團(tuán)委代章）年月日校主管領(lǐng)導(dǎo)或校主管部門確認(rèn)蓋章年月日

E．大賽組織委員會(huì)秘書處資格和形式審查意見組委會(huì)秘書處資格審查意見審查人（簽名）年月日組委會(huì)秘書處形式審查意見審查人（簽名）年月日組委會(huì)秘書處審查結(jié)果□合格□不合格負(fù)責(zé)人（簽名）年月日

F．參賽作品打印處珍珠層粉在化妝品中的應(yīng)用羅善鍇羅冠生林韶蕓指導(dǎo)老師：玉副教授華南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，廣州，510640摘要：珍珠層粉是由貝殼珍珠層研磨得到的，其成分組成和結(jié)構(gòu)與珍珠粉非常相似，因此二者有相似的藥效作用。珍珠層粉較珍珠粉的價(jià)格便宜得多，珍珠層粉完全有可能替代名貴的珍珠粉作為開發(fā)化妝品和保健食品的原料，這樣可以大大降低成本。本文采用酸酶水解的方法從珍珠層粉中提取出鈣離子、微量元素和蛋白質(zhì)，并對(duì)它們進(jìn)行處理，從而得到濃縮了的營(yíng)養(yǎng)液。并將制得的營(yíng)養(yǎng)液加入已設(shè)計(jì)好的珍珠營(yíng)養(yǎng)露配方中，使其營(yíng)養(yǎng)成份更易于被人體吸收，從而提高珍珠層粉的利用價(jià)值。關(guān)鍵詞：珍珠層粉酶解液凱氏定氮法化妝品PEARLLAYERPOWDERAPPLYINCOSMETICAuthor:LuoShangKaiLuoGuangShengLinShaoYunInstructor:HeTingYuAssociateprofessorCollegeOfScienceOfSouthChinaAgriculturalUmiversity,Guangzhou,510640Abstract:Pearllayerpowder,whichisskivedfromconchpearllayer,resemblespearlpowderiningredientandstructure.Sotheyarealikeinmedicaleffect.Butpearllayerpowderismorechearperthanpearlpowder.IfpearllayerpowderisusedintheCosmeticandhealthfoodasasubstituteofpearlpowder,thecostofproductioncanbereducedinthisway.Thetextadoptacid—enzymehydrolyzetodealwithpearllayerpowder.Thecalciumion,microelementandprotein,whichextractedfrompearllayerpowder,canbefurtherprocessedturnintothenutritionliquid.NutritionliquidwillbejoinedintotheMoisturizingcream.SothattheFunctionalpositionofthepearllayerpowdercanbemoreearilyabsorbedbytheskin.Accordingly,thevalueofpearllayerpowderisimproved.Keywords:PearllayerpowderEnzymolysisliquicMicroKjeldhalCosmetic1前言珍珠是一種非常重要的中藥材，也是一種高貴的裝飾品，在我國(guó)已有兩千多年的使用歷史?！侗静菥V目》載“珍珠涂面，令人潤(rùn)澤好顏色。珍珠涂手足，去皮膚逆臚,能化面去黯,令光澤潔白”。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，珍珠含有的主要成分為碳酸鈣、微量元素和有機(jī)物。而有機(jī)物中主要組成是角殼蛋白，角殼蛋白由多種氨基酸組成，主要有谷氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、、亮氨酸、賴氨酸、精氨酸、門冬氨酸[1]～[4]。微量元素主要有鐵、鋅、鈷、鉻、錳、鍶和鎳等。我國(guó)珍珠資源十分豐富。目前，中國(guó)淡水珍珠年產(chǎn)量過1200噸，成為世界第一產(chǎn)珠國(guó)，而貝殼珍珠層作為珍珠生產(chǎn)的副產(chǎn)物，其年產(chǎn)量也很大。有資料報(bào)道，貝殼珍珠層的主要成分與珍珠相似，同樣含有碳酸鈣、有機(jī)物和微量元素，且二者的藥效作用也相當(dāng)[5]。但貝殼珍珠層價(jià)格低廉，因此對(duì)貝殼珍珠層的利用引起了人們極大的重視和興趣。一般地，貝殼珍珠層被研磨成粉末而應(yīng)用于美容科學(xué)。其用法有兩種：口服和外敷。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道［6］，用珍珠層粉外敷治療青春期痤瘡臨床實(shí)驗(yàn)治愈例為76％以上。廣州第一人民醫(yī)院中醫(yī)科也用珍珠層粉外敷輔助清痘飲治療青春期痤瘡63例，有效率達(dá)93％［7］。可見珍珠層粉藥效功效之大。珍珠層粉外敷的一般用法是用水調(diào)成糊狀涂于患處或做成面模敷于臉上，這樣的做法致使許多有效成分被不溶于水的碳酸鈣所包圍，不能被皮膚很好的吸收；且時(shí)常要調(diào)糊成模，使用起來(lái)不方便，因此珍珠層粉的進(jìn)一步開發(fā)利用顯得很有必要。本實(shí)驗(yàn)通過酸—酶解反應(yīng)，使不溶的碳酸鈣轉(zhuǎn)化為鈣離子、角殼蛋白轉(zhuǎn)化為氨其酸和小肽，所以酶解—酸解后的珍珠層粉不受碳酸鈣和有機(jī)物顆粒的影響，應(yīng)用于護(hù)膚品中更能被皮膚吸收，使用起來(lái)也較為方便。它的保健功效是:去痘、消斑、增白、嫩膚。2實(shí)驗(yàn)部分2.1原料、試劑和儀器珍珠層粉，購(gòu)于湛江銀浪海洋生物技術(shù)，批號(hào)：20060701乳酸，分析純（天津市化學(xué)試劑一廠）,批號(hào)：060417胰蛋白酶，活力為1000～1500u/mg（上海源聚生物科技）,批號(hào)：060528FOSSKjeltexTM2200自動(dòng)凱氏定氮儀電子分析天平（ProducebyMetlerToledoGroup）OJ—90電動(dòng)攪拌器（天津歐諾儀器儀表）SY—1—2電熱式恒溫水浴鍋（天津歐諾儀器儀表）JRJ—300—1剪切乳化攪拌機(jī)（上海標(biāo)材模型廠）臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備）其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純2.2珍珠層粉樣品分析2.2.1珍珠層粉的鈣含量測(cè)定準(zhǔn)確稱取0.4542g珍珠層粉，并將其溶于蒸餾水中，定溶至100ml，。用移液管精確量取四份20ml的樣品于250ml錐形瓶中，根據(jù)GB/T192812003測(cè)定鈣含量的方法對(duì)樣品進(jìn)行標(biāo)定。2.2.2珍珠層粉蛋白質(zhì)含量測(cè)定在分析天平中準(zhǔn)確稱量1.000g珍珠層粉三份于小燒杯中，分別加入數(shù)毫升1.0mol/L的硫酸溶液，使CO32轉(zhuǎn)化為CO2逸出，再用自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定其蛋白質(zhì)含量。2.3角殼蛋白的提取及制備2.3.1均勻設(shè)計(jì)方法影響角殼蛋白提取率（y）的因素有乳酸濃度、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、攪拌速度。本實(shí)驗(yàn)采用均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)的方法[8]，在恒定攪拌速度的條件下對(duì)乳酸濃度（x1）、反應(yīng)溫度（x2）及反應(yīng)時(shí)間（x3）三個(gè)因素進(jìn)行考查。表1每個(gè)因素取7個(gè)水平Tab.1everyfactorchosesevenlevel酸濃度acidconcentration/％：141618202224溫度temperature/℃：404550556065時(shí)間time/h：11.522.533.5利用DPS統(tǒng)計(jì)軟件自帶的均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)功能，通過輸入3因素6水平進(jìn)行迭代5min，得到以下均勻設(shè)計(jì)表。表2均勻設(shè)計(jì)表及對(duì)應(yīng)水平Tab.2Uniformdesigntableandparallelismlevel因子乳酸濃度（x1）反應(yīng)溫度(x2)反應(yīng)時(shí)間(x3)FactorlacticacidreactionreactionConcentration/%temperature/℃time/hN1(1)14(2)45(4)2.5N2(6)24(3)50(5)3.0 N3(4)20(1)40(2)1.5N4(5)22(6)65 (3)2.0N5 (3)18(5)60(6)3.5N6(2)16(4)55(1)1.0注：中心化偏差CD＝0.1365Notice:centerwarpCD=0.13652.3.2均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟1．配制相應(yīng)濃度14％、16％、18％、20％、22％及24％的乳酸溶液250ml。2.準(zhǔn)確稱取5.000g珍珠層粉于250ml三口燒瓶中，用20ml水把燒瓶壁的層粉洗干凈，從下到上安裝反應(yīng)裝置，固定裝置后，開啟電動(dòng)攪拌器，以預(yù)定速度攪拌，再打開恒壓漏斗（預(yù)先盛有相應(yīng)的乳酸溶液），慢慢滴入乳酸溶液，以反應(yīng)器內(nèi)少量氣泡為宜，滴完后用10ml水潤(rùn)洗量筒和恒壓漏斗，潤(rùn)洗液滴入反應(yīng)器。并適當(dāng)搖勻反應(yīng)器。3.預(yù)定時(shí)間一到，停止攪拌，反應(yīng)后溶液PH為5～6。把反應(yīng)液移入離心管，用15ml水沖洗燒瓶。離心管于相應(yīng)溫度恒溫10min，然后以4500rpm離心10min，上層液倒入錐形瓶，用15ml水把各管沉淀洗進(jìn)一支離心管，再以4500rpm離心5min，上層液倒入錐形瓶，再洗滌離心管兩次。然后用10ml水洗滌沉淀，把濾渣洗入燒杯，用凱氏定氮法進(jìn)行蛋白質(zhì)的測(cè)定,計(jì)算提取率y。把濾液濃縮至飽和，靜置過夜，以少量沉淀析出為宜，備用。重復(fù)以上操作6次。2.4酶解反應(yīng)參考文獻(xiàn)[9]的方法，對(duì)1.3提取出的角殼蛋白進(jìn)行酶解反應(yīng)。1酶液的配制準(zhǔn)確稱取0.5000g胰蛋白酶，溶于PH＝8.04的磷酸二氫鉀—磷酸氫二鈉的緩沖溶液中，再定溶至100ml，配成0.005g/ml的酶液。2反應(yīng)液的制取對(duì)1.3酸解反應(yīng)確定的條件進(jìn)行放大處理，以20g層粉反應(yīng)，以獲得足夠多的、較為純的角殼蛋白。準(zhǔn)確稱取0.1000g角殼蛋白于50ml三口燒瓶中，加入PH＝8.04的磷酸二氫鉀—磷酸氫二鈉緩沖溶液10ml，用攪拌棒慢慢攪拌使角殼蛋白溶解，再加入（1）配制的酶液2ml,于50℃水解24h。反應(yīng)完后，把反應(yīng)器至于90℃環(huán)境中保溫10min滅酶，再把反應(yīng)液移入離心管，并用5～10ml水沖洗三口燒瓶，以4500rpm離心，上層清液于旋轉(zhuǎn)蒸餾儀中濃縮至一定體積。2.5化妝品營(yíng)養(yǎng)液制取合并1.3酸解后離心的上層清液與1.4酶解后離心的上層清液，加入少量活性碳，數(shù)小時(shí)后抽濾，所得濾液即為珍珠層粉營(yíng)養(yǎng)液。2.6化妝品配方設(shè)計(jì)2.6.1實(shí)驗(yàn)用的配方：（100g）表3配方設(shè)計(jì)Tab.3ThedirectionforproducingEmollientcream物質(zhì)TheincludingofEmollientcream（％）配方一Partone配方二Parttwo配方三Partthree配方四Partfour油相Oilobject蜂蠟Beeswax110.50.42硬脂酸Stearicacid4442.6羊毛脂Woolwax221.030.84十六醇Cetylalcohol332.51.28硅油Dimethicone334.125BRIJ720.80.80.840.51水相Aqueousobject甘油Glycerin555.034.21聚乙二醇－400PEG4005554.29三乙醇胺Triethanolamine0.50.50.510.37EDTANa20.70.70.70.61硫代硫酸鈉Hyposulphite0.10.10.10.1尼箔金甲脂PHBesters0.10.10.10.1硼酸Boracicacid0.50.50.50.5珍珠層粉營(yíng)養(yǎng)液Pearllayerpowdenutritionliquid3～53～53～53～5BRIJ7212.42.42.41.71去離子水Deionizedwater余量leavings余量leavings余量leavings余量leavings2.6.2實(shí)驗(yàn)步驟1.按照以上的四個(gè)配方配好相應(yīng)水相和油相。加熱水浴鍋中的水至80℃待用。2.用75％以上的乙醇蒸汽將乳化剪切機(jī)的定子和轉(zhuǎn)子熏10min。所要用的儀器都要用75％的乙醇消毒或者用沸水消毒10min，并烘干待用。3.將水相和油相分別加熱到90℃，使油相和水相中的各物質(zhì)完全熔化，并保溫30min，滅菌。30min后將油相轉(zhuǎn)移到磁力攪拌機(jī)上攪拌并恒溫80℃左右，確定油相完全熔化后，待水相85℃時(shí)把水相緩慢地加入油相當(dāng)中，加完后攪拌數(shù)分鐘，此時(shí)要恒溫在75℃左右。把均質(zhì)后混合液轉(zhuǎn)至乳化剪切機(jī)進(jìn)行乳化剪切，并用水浴鍋恒溫70℃～75℃左右。若在轉(zhuǎn)移的過程中油水混合液的溫度低于70℃必須在低速乳化的情況下把混合液加熱到70℃才緩慢的調(diào)節(jié)乳化剪切機(jī)的速度至5000～5500rpm。當(dāng)乳化機(jī)的速度達(dá)到5000～5500rpm時(shí)要迅速記下時(shí)間。20min后調(diào)整乳化剪切機(jī)的速度至1500rpm左右，并記下時(shí)間。待溫度降至55℃左右時(shí)關(guān)閉乳化剪切機(jī)，并記下時(shí)間，此時(shí)為成品。2.7產(chǎn)品功能性檢測(cè)1.確定乳化類型將乳液滴加在含有CoCl2的干燥濾紙上，若液滴周圍變紅則為O/W型乳液，若依然為藍(lán)色則為W/O型乳液[10]。2.穩(wěn)定性測(cè)定將10克產(chǎn)品裝入離心管中，將烘箱的溫度調(diào)至48±1℃左右，（保溫一個(gè)小時(shí)，目的是使?jié)櫮w露均勻地到達(dá)48℃。）立即拿到離心機(jī)中離心分別以2000rpm.3000rpm.4000rpm離心30min。若以2000rpm離心30min不分離則為合格品，以3000rpm離心30min不分離則為一級(jí)品，若以4000rpm離心30min不分離則為優(yōu)秀品[11]。3.耐熱考驗(yàn)將產(chǎn)品置于烘箱中，并保溫48±1℃24小時(shí)后取出恢復(fù)到室溫，若不出現(xiàn)油水分離的情況，則產(chǎn)品耐熱性優(yōu)[11]。4．耐寒性考驗(yàn)將產(chǎn)品置于冰箱中，并分別保溫－5℃，－10℃，－15℃24小時(shí)后取出恢復(fù)室溫觀察油水情況。若保溫－5℃24小時(shí)后恢復(fù)室溫油水不分離則為合格品，若保溫－10℃24小時(shí)后恢復(fù)到室溫不分離則為一級(jí)品，若保溫－15℃24小時(shí)后恢復(fù)室溫油水不分離則為優(yōu)級(jí)品[11]。3結(jié)果與討論3.1珍珠層粉的鈣含量表4測(cè)定珍珠層粉鈣的結(jié)果Tab.4theresultofmensuratepearllayerpowdercalcic項(xiàng)目樣品體積EDTA濃度所用EDTA體積碳酸鈣含量平均值相對(duì)偏差itemsampleEDTAuseEDTAvol.calciumaveragerelativevol./mlconcentrationv/mlcarbonatevaluewarpc/(mol/L)contentω/%/%/%117.0594.5030.63217.4096.4431.413200.050317.0894.67095.0990.45417.1094.7800.34鈣含量以碳酸鈣（CaCO3）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，數(shù)值以％表示，按以下公式計(jì)算：ω=*100結(jié)果列于上表第五列。M——碳酸鈣的摩爾質(zhì)量數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）(M=100.1)。m——稱取的珍珠層粉質(zhì)量，單位為克(g)。由以上結(jié)果可知，第二號(hào)樣品相對(duì)偏差太大，估計(jì)為異常值，應(yīng)將其去除。去除后碳酸鈣含量平均值及相對(duì)偏差。表5去除異常值Tab.5wipeoffabnormityvalue項(xiàng)目碳酸鈣含量平均值相對(duì)偏差itemcalciumcarbonateavergevaluerelativecontentω/%/%warp/%194.5030.16394.67094.6510.02494.7800.14去除異常點(diǎn)后，結(jié)果令人滿意。3.2測(cè)定珍珠層粉中蛋白質(zhì)含量表6凱氏定氮測(cè)定蛋白質(zhì)含量結(jié)果Tab.6theresultofMicroKjeldhalmensurateproteincontent項(xiàng)目層粉質(zhì)量鹽酸濃度所用鹽酸體積試劑空白所用含氮量平均值鹽酸體積Itemlayerhydrochloricusehydrochloricreagentblanknitrogenavergepowderacidacidvol./mlusehydrochloriccontentvaluemass/gconcentration/(mol/L)acid/ml/g/g11.000.47783.040.570.00428721.000.06188.685.020.0031670.00335131.000.05907.454.110.002598根據(jù)蛋白質(zhì)的質(zhì)量與蛋白質(zhì)中含氮量的關(guān)系，即6.25g蛋白質(zhì)中含有1g氮。所以珍珠層粉中蛋白質(zhì)含量為0.021g/1g層粉。由于嘗試采用了不同濃度的鹽酸標(biāo)定吸收液硼酸，所得結(jié)果有點(diǎn)不盡人意。3.3尋求較適提取角殼蛋白的條件表7均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果Tab.7thetestresultofuniformdesign因子乳酸濃度x1反應(yīng)溫度x2反應(yīng)時(shí)間x3含氮量yFactorlacticacidreactionreactionnitrogenConcentration/%temperature/℃time/hcontent/gN114452.50.010633N224503.0 0.010071N320401.50.012208N42265 2.00.009889N5 18603.50.010832N616551.00.012814由上表可知，6次試驗(yàn)結(jié)果中以第6號(hào)試驗(yàn)的效率（0.012814）為最高，相應(yīng)的試驗(yàn)條件為：乳酸濃度x1＝16％，反應(yīng)溫度x2=55，反應(yīng)時(shí)間x3=1.0?，F(xiàn)為研究各因素對(duì)響應(yīng)值的影響，運(yùn)用SAS系統(tǒng)[8]上線性歸模型對(duì)試驗(yàn)進(jìn)行分析，結(jié)果如下:模型y=0.015880.00009546x10.00002423x20.00076529x3表8方差分析Tab.8AnovaAnalyse方差來(lái)源自由度平方和均方FP值SourseDFSumofSquareMeanSquareFValuePValue回歸Model30.000004450.000001481.180.4898誤差Erro20.000002520.00000126總和CorrectedTotal50.00000698表9參數(shù)估計(jì)Tab.9ParameterEstimate變量自由度參數(shù)估計(jì)標(biāo)準(zhǔn)差tp值VariableDFParameterEstimateStandardErrortValuepValue截距intercept10.015880.003524.520.0457x110.000095460.000138930.690.5630x210.000024230.000055570.440.7054x310.000765290.000555711.380.3024調(diào)整后的相關(guān)系數(shù)Ra=0.0963由方差分析的F檢驗(yàn)和各參數(shù)估計(jì)的t檢驗(yàn)可以看出，各因素對(duì)響應(yīng)值都沒有統(tǒng)計(jì)意義，因此，線性回歸模型并不適合。進(jìn)一步考慮用二次響應(yīng)回歸模型，但無(wú)法得到回歸結(jié)果。因此對(duì)結(jié)果采用直觀分析的方法，結(jié)果是以第6號(hào)試驗(yàn)最好，但在對(duì)第6號(hào)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，提取物包含有較多未反應(yīng)的碳酸鈣，這將影響下一步的酶解反應(yīng)。為此，對(duì)6次試驗(yàn)中再進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)第3號(hào)試驗(yàn)效率較高、且提取物包含的碳酸鈣很微量，相應(yīng)的條件為乳酸濃度為20％，反應(yīng)溫度為40℃，反應(yīng)時(shí)間為1.5h。利用第3號(hào)試驗(yàn)條件進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。表10重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果Tab.10Theresultofrepeattest次數(shù)乳酸濃度反應(yīng)溫度反應(yīng)時(shí)間含氮量TimelacticacidreactionreactionnitrogenConcentration/%temperature/℃time/hcontent10.010062220％401.50.01132330.010845由表七可知，試驗(yàn)重復(fù)性好。3.4配方乳化結(jié)果1.配方一的乳化剪切的時(shí)間為44min其中以速度4000rpm～4500rpm乳化的時(shí)間為30min，降溫乳化的速度為1000rpm,時(shí)間為10min。而配方二乳化剪切的時(shí)間為31min，其中15min是以4000rpm～4500rpm進(jìn)行乳化，降溫乳化的速度為1000rpm，時(shí)間為10min。配方三乳化時(shí)間為33mi