DB62T 2948-2018 馬鈴薯種質(zhì)資源離體保存技術(shù)規(guī)程

馬鈴薯種質(zhì)資源離體保存技術(shù)規(guī)程2019-01-01實施2019-01-01實施甘肅省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I 12規(guī)范性引用文件 13縮略語 14術(shù)語和定義 15組織培養(yǎng) 26離體保存 4本標準按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由甘肅省農(nóng)業(yè)科學院提出。本標準由甘肅省糧食作物栽培標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位：甘肅省農(nóng)業(yè)科學院馬鈴薯研究所。本標準主要起草人：齊恩芳、呂和平、文國宏、賈小霞、劉石、王敏、李高峰、李建武、張武、黃偉。下列文件對于本文件的應(yīng)用是必可少的凱是注日期的引用文件，僅注母期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)道用于本文件。PVX:馬鈴薯X病毒(PotatovirusX,PYX)PLRV:馬鈴薯卷葉病毒(PotatolenirPSTVd:馬鈴薯紡錘塊莖類病毒(PotatosspindletubexiodPSTVdimmunosorbentR:雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳法(ReturnPolyacrlamideGielElectrophoresis)外植體培養(yǎng)基一種人工配制的、適合培養(yǎng)材料生長繁殖的混合養(yǎng)料。主要工2把培養(yǎng)基中的各種大量元素用量擴大10倍，微量元素、有機元素和植物生長調(diào)節(jié)劑等用量擴大100在無菌條件下，應(yīng)用莖尖分生組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的，不帶PVX、PVY、PVS、PVA、PL將試管苗、試管薯等植物組織培養(yǎng)物儲存在使其抑制生長或配制：母液可配成10倍～100倍。各種藥品必須在充分溶解后才能混合，同在2℃~4℃的冰箱中貯存，有機類物質(zhì)貯存時間不宜過長，無機鹽母液在一個月內(nèi)用完。發(fā)現(xiàn)有霉菌深5.1.2培養(yǎng)基制備程序水、母液、糖、瓊脂→混合→pH調(diào)試→加熱溶解試管→水洗→干燥→分裝→加封口材料→高壓滅5.1.3pH值的調(diào)整培養(yǎng)基配好后，應(yīng)隨即進行pH值的調(diào)試。一般用酸度計或精密pH試紙測試。培養(yǎng)基pH值小于5用5.1.4培養(yǎng)基的分裝3試管置于高壓蒸汽滅菌鍋，于1.105Kpa,121℃滅菌15min～20min。菌；工作臺面用紫外線照射及75%酒精噴霧滅菌；植物材料表面用消毒劑滅菌。用實驗服和拖鞋，洗凈雙手并閑酒精棉球擦拭雙手，特別是指甲5.3.3建立外植體水沖洗2h,然后超凈工作臺上嚴格消毒會消毒用75%酒精變通30s,再用0.1%6升永浸泡7min～8min(或4h,31℃條件下培養(yǎng)處理6周37C高溫鈍化病毒，制病毒的繁殖，31℃可提高分化苗的生點，切取帶1個~2個葉原基，大小為0.2mm~03mm的莖尖接種于莖尖培養(yǎng)基上。溫度23℃±2℃,濕度75%,光照時間16h,初期光照強度1000Lx,4周后2000Lx,出苗后增加至4000Lx。培養(yǎng)30d～40d可分化小芽，然后轉(zhuǎn)入快繁培養(yǎng)基生根，發(fā)育成3個~44挑選生長健壯的馬鈴薯試管苗進行剪切，取帶1片葉的中間莖段，葉面朝上接種在裝有保存培養(yǎng)基的試管中(每試管接2株),每個材料至少保存6份。同6.1.2。同6.1.4。對連續(xù)保存6個～12個月以上的馬鈴薯種質(zhì)資源，觀察試管苗及試管薯生長形態(tài)，若試管苗開始枯萎，或試管薯休眠期已過