Ang-(1 - 7)與A779：對STZ致糖尿病大鼠腎臟功能影響的深度剖析

Ang-(1-7)與A779：對STZ致糖尿病大鼠腎臟功能影響的深度剖析一、引言1.1研究背景與意義隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、人民生活水平的提高以及生活方式的改變，糖尿?。―iabetesMellitus，DM）的發(fā)病率正呈現(xiàn)出迅猛增長的態(tài)勢。我國作為人口大國，目前約有龐大數(shù)量的糖尿病患者。糖尿病所引發(fā)的并發(fā)癥對人體健康危害極大，嚴(yán)重時甚至?xí){生命安全。糖尿病并發(fā)癥主要分為大血管并發(fā)癥和微血管并發(fā)癥，其中大血管并發(fā)癥在糖耐量減退階段便已開始出現(xiàn)，而微血管并發(fā)癥則在糖尿病發(fā)展階段逐漸顯現(xiàn)。糖尿病腎?。―iabeticNephropathy，DN）作為糖尿病常見且嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，其發(fā)病率不容小覷。據(jù)統(tǒng)計(jì)，1型糖尿病病程達(dá)25年時，蛋白尿的累積發(fā)生率高達(dá)46％；2型糖尿病的蛋白尿發(fā)生率更高，可達(dá)56％。這也導(dǎo)致因糖尿病腎病引發(fā)的慢性腎功能衰竭患者數(shù)量迅速上升。在歐美等發(fā)達(dá)國家，糖尿病腎病已成為導(dǎo)致終末期腎?。‥nd-StageRenalDisease，ESRD）的首要原因，約占ESRD的40％-50％。在我國大陸地區(qū)，糖尿病腎病約占終末期腎病的6％-10％。并且，隨著糖尿病發(fā)病率的持續(xù)攀升，預(yù)計(jì)我國糖尿病腎病的發(fā)病率也將隨之迅速增長。因此，積極探尋有效的治療方法，及早發(fā)現(xiàn)并有效治療糖尿病腎病，對于提高糖尿病患者的生活質(zhì)量、保障其健康和生命具有至關(guān)重要的意義。腎素-血管緊張素系統(tǒng)（Renin-AngiotensinSystem，RAS）是一個極為復(fù)雜且關(guān)鍵的調(diào)節(jié)系統(tǒng)。在哺乳動物體內(nèi)，RAS對于維持血壓穩(wěn)態(tài)、保障細(xì)胞正常功能以及維持水、電解質(zhì)平衡等方面都發(fā)揮著不可或缺的作用。然而，當(dāng)RAS過度活躍時，卻會引發(fā)一系列嚴(yán)重的健康問題，如高血壓、心臟重構(gòu)，甚至?xí)?dǎo)致充血性心力衰竭以及腎功能不全等疾病。近年來，RAS過度活動在糖尿病進(jìn)展過程中的作用受到了廣泛關(guān)注。有研究推測，RAS參與介導(dǎo)了糖尿病發(fā)展進(jìn)程中的許多功能變化，例如腎小球血流動力學(xué)改變，以及糖尿病腎病中腎小球、腎小管的結(jié)構(gòu)改變等。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（Angiotensin-ConvertingEnzyme，ACE）是RAS中的一個關(guān)鍵代謝酶。血管緊張素II（AngiotensinII，AngII）由ACE作用于血管緊張素I生成。AngII作用于AT1R，具有收縮血管和促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。目前，ACE抑制劑（ACEI）以及AT1R特異性阻斷劑已成為治療許多心血管疾病，如高血壓、心衰的首選藥物。大量的動物實(shí)驗(yàn)和臨床研究均表明，ACEI和AT1R阻斷劑能夠減少蛋白尿，緩解并在一定程度上逆轉(zhuǎn)腎小球、腎小管間質(zhì)的炎癥和纖維化，這也從側(cè)面表明了RAS在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中扮演著重要角色。然而，值得注意的是，糖尿病患者的血漿腎素活性（PlasmaReninActivity，PRA）卻低于正常人，且使用ACEI后，PRA和AngII水平并未發(fā)生明顯改變。基于此，有學(xué)者推測腎臟局部可能存在獨(dú)立的RAS，并且在糖尿病狀態(tài)下其活性可能會增高，而ACEI可能正是通過降低局部RAS活性來發(fā)揮治療作用的。近年來，隨著對RAS研究的不斷深入以及相關(guān)技術(shù)的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)了RAS存在除ACE以外的第二條代謝通路，即ACE2通路。ACE2與ACE的氨基端有41.8％的序列一致，但與ACE不同，ACE2是一種對疏水性C末端或堿性殘基選擇性的羧基單肽酶，ACE切除兩個氨基酸，而ACE2僅切除羧基末端的一個氨基酸。ACE2作用于AngI生成Ang（1-9），而且ACE2對AngII有很高的親和性，可將其降解為Ang-（1-7）。其中，Ang-（1-7）作為RAS中的重要成員，具有多種生物學(xué)功能，如舒張血管、抗細(xì)胞增殖、抗纖維化等，其功能常常與AngII的作用相互拮抗。而A779作為一種特異性的Ang-（1-7）受體拮抗劑，能夠阻斷Ang-（1-7）的生物學(xué)效應(yīng)，為研究Ang-（1-7）的作用機(jī)制提供了有力工具。深入研究Ang-（1-7）和A779對糖尿病腎病的影響，有助于進(jìn)一步揭示糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制，為開發(fā)新的治療策略提供理論依據(jù)。通過探討它們對糖尿病大鼠腎臟功能的作用，或許能夠發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)，為糖尿病腎病的臨床治療開辟新的途徑，具有重要的理論和實(shí)際意義。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，是由多種因素相互作用導(dǎo)致的結(jié)果。高血糖作為糖尿病的主要特征，在糖尿病腎病的發(fā)病過程中起著關(guān)鍵的啟動作用。長期的高血糖狀態(tài)會引發(fā)一系列代謝紊亂，包括多元醇通路的活化、蛋白激酶C的激活以及糖基化終產(chǎn)物（AGEs）的大量生成等。多元醇通路活化后，醛糖還原酶活性增強(qiáng)，使得葡萄糖轉(zhuǎn)化為山梨醇和果糖的速度加快，細(xì)胞內(nèi)山梨醇和果糖大量堆積，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)滲透壓升高，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞水腫、損傷以及功能障礙。蛋白激酶C的激活則會影響多種細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，導(dǎo)致血管收縮、細(xì)胞增殖以及細(xì)胞外基質(zhì)合成增加等一系列病理生理變化。而糖基化終產(chǎn)物與細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合后，會激活細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激信號通路，促進(jìn)炎癥因子和細(xì)胞因子的釋放，進(jìn)一步加重腎臟組織的損傷和纖維化。血流動力學(xué)改變在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中也扮演著重要角色。糖尿病早期，高血糖會導(dǎo)致腎小球?yàn)V過率（GFR）升高，腎小球內(nèi)出現(xiàn)高壓力、高灌注和高濾過的“三高”狀態(tài)。這種血流動力學(xué)異常會使腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，基底膜增厚，進(jìn)而導(dǎo)致腎小球?yàn)V過屏障功能障礙，蛋白質(zhì)濾過增加，出現(xiàn)蛋白尿。隨著病情的進(jìn)展，腎小球硬化和腎小管間質(zhì)纖維化逐漸加重，最終導(dǎo)致腎功能衰竭。此外，腎臟局部腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）的激活在糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中也具有重要意義。研究表明，糖尿病狀態(tài)下，腎臟局部RAS的活性明顯增強(qiáng)，血管緊張素II（AngII）生成增多。AngII不僅具有強(qiáng)烈的收縮血管作用，可導(dǎo)致腎小球內(nèi)壓力升高，還能促進(jìn)細(xì)胞增殖、炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞外基質(zhì)的合成和積聚，加速腎小球硬化和腎小管間質(zhì)纖維化的進(jìn)程。近年來，隨著對RAS研究的不斷深入，人們逐漸認(rèn)識到RAS中除了經(jīng)典的ACE-AngII-AT1R軸外，還存在一條保護(hù)性的ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸。ACE2是一種新型的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶，它能夠?qū)ngII降解為具有生物活性的Ang-（1-7）。Ang-（1-7）具有多種心血管保護(hù)作用，包括舒張血管、抑制細(xì)胞增殖、抗纖維化、抗炎以及抗氧化應(yīng)激等。在糖尿病腎病中，ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸的功能往往受損，導(dǎo)致其對腎臟的保護(hù)作用減弱。研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠腎臟中ACE2的表達(dá)明顯降低，而Ang-（1-7）的水平也顯著下降，這使得RAS系統(tǒng)的平衡失調(diào)，進(jìn)一步促進(jìn)了糖尿病腎病的發(fā)展。針對Ang-（1-7）對糖尿病大鼠腎臟功能影響的研究，國內(nèi)外已經(jīng)取得了一些成果。一些研究表明，外源性給予Ang-（1-7）能夠改善糖尿病大鼠的腎臟功能，減輕腎臟病理損傷。例如，有研究通過對糖尿病大鼠腹腔注射Ang-（1-7），發(fā)現(xiàn)其能夠降低尿蛋白排泄量，減輕腎小球系膜細(xì)胞增生和細(xì)胞外基質(zhì)積聚，改善腎小球基底膜增厚的情況。進(jìn)一步的機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，Ang-（1-7）可能通過激活Mas受體，抑制NF-κB信號通路的活化，減少炎癥因子的釋放，從而發(fā)揮其對糖尿病腎臟的保護(hù)作用。此外，Ang-（1-7）還能夠上調(diào)抗氧化酶的活性，降低氧化應(yīng)激水平，減輕腎臟組織的氧化損傷。然而，也有部分研究結(jié)果存在差異。一些研究發(fā)現(xiàn)，慢性給予Ang-（1-7）對糖尿病大鼠腎臟功能的改善作用并不明顯，甚至在某些情況下可能會加重腎臟損傷。這種差異可能與實(shí)驗(yàn)動物模型、給藥劑量、給藥時間以及實(shí)驗(yàn)條件等多種因素有關(guān)。不同品系的大鼠對糖尿病的易感性以及對Ang-（1-7）的反應(yīng)可能存在差異。給藥劑量和時間的不同也可能導(dǎo)致不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果給藥劑量過低或給藥時間過短，可能無法充分發(fā)揮Ang-（1-7）的保護(hù)作用；而如果給藥劑量過高或給藥時間過長，可能會產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，反而對腎臟功能造成損害。A779作為一種特異性的Ang-（1-7）受體拮抗劑，能夠阻斷Ang-（1-7）與Mas受體的結(jié)合，從而拮抗Ang-（1-7）的生物學(xué)效應(yīng)。關(guān)于A779對糖尿病大鼠腎臟功能影響的研究相對較少。已有研究表明，給予糖尿病大鼠A779后，會加重腎臟的損傷程度，表現(xiàn)為尿蛋白增加、腎小球硬化和腎小管間質(zhì)纖維化加重等。這進(jìn)一步證實(shí)了Ang-（1-7）在糖尿病腎病中具有潛在的保護(hù)作用，而阻斷其作用會加速糖尿病腎病的發(fā)展。但目前對于A779影響糖尿病大鼠腎臟功能的具體機(jī)制還尚未完全明確，仍需要進(jìn)一步深入研究。目前，雖然對于糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制以及Ang-（1-7）和A779對糖尿病大鼠腎臟功能的影響已經(jīng)有了一定的認(rèn)識，但仍存在許多尚未解決的問題。例如，Ang-（1-7）在體內(nèi)的作用靶點(diǎn)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路還不完全清楚，不同研究結(jié)果之間的差異也需要進(jìn)一步探討和明確。因此，深入研究Ang-（1-7）和A779對糖尿病大鼠腎臟功能的影響及其作用機(jī)制，對于揭示糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制以及開發(fā)新的治療策略具有重要的理論和實(shí)際意義。1.3研究目的與創(chuàng)新點(diǎn)本研究旨在深入探究慢性給予血管緊張素-(1-7)（Ang-(1-7)）或其受體拮抗劑A779對鏈脲佐菌素（STZ）致糖尿病大鼠腎臟功能的具體影響，并揭示其內(nèi)在作用機(jī)制。通過系統(tǒng)研究，期望為糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制提供新的理論依據(jù)，同時為臨床治療糖尿病腎病開發(fā)新的治療靶點(diǎn)和策略。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下兩個方面：在研究層面上，從多個層面深入分析Ang-(1-7)和A779對糖尿病大鼠腎臟功能的影響，不僅關(guān)注腎臟的宏觀功能指標(biāo)，如尿蛋白、腎功能指標(biāo)等，還深入到細(xì)胞和分子水平，探究其對腎臟細(xì)胞增殖、凋亡、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激以及相關(guān)信號通路的影響，全面揭示其作用機(jī)制。在檢測技術(shù)上，采用新型的檢測技術(shù)和方法，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因芯片技術(shù)等，對腎臟組織中的蛋白質(zhì)和基因表達(dá)進(jìn)行全面分析，以發(fā)現(xiàn)潛在的生物標(biāo)志物和作用靶點(diǎn)，為糖尿病腎病的早期診斷和治療提供新的思路和方法。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法2.1實(shí)驗(yàn)動物及分組選用健康成年雄性SD大鼠40只，體重在180-220g之間，購自[實(shí)驗(yàn)動物供應(yīng)單位名稱]，動物生產(chǎn)許可證號為[具體許可證號]。大鼠飼養(yǎng)于溫度為（22±2）℃、濕度為（50±10）%的環(huán)境中，保持12小時光照/黑暗循環(huán)，自由攝食和飲水。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，將大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分為4組，每組10只：正常對照組（NC組）、糖尿病模型組（DM組）、Ang-(1-7)給藥組（A組）、A779給藥組（B組）。2.2實(shí)驗(yàn)材料與儀器鏈脲佐菌素（STZ），購自[STZ生產(chǎn)廠家名稱]，貨號為[具體貨號]，用前以0.1mol/L、pH4.5的枸櫞酸緩沖液新鮮配制；Ang-(1-7)和A779均購自[供應(yīng)商名稱]，純度≥98%，用生理鹽水溶解并配制成所需濃度。血糖儀及配套試紙，購自[血糖儀品牌]，用于檢測大鼠血糖水平；全自動生化分析儀，型號為[具體型號]，由[儀器生產(chǎn)廠家]生產(chǎn)，可檢測血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）等腎功能指標(biāo)；酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒，用于檢測尿蛋白、炎癥因子等含量，購自[試劑盒生產(chǎn)廠家]；高速冷凍離心機(jī)，型號為[具體型號]，可用于分離血清和組織勻漿；實(shí)時熒光定量PCR儀，型號為[具體型號]，用于檢測相關(guān)基因的表達(dá)水平；蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot）相關(guān)試劑和設(shè)備，用于檢測蛋白表達(dá)量。2.3糖尿病大鼠模型構(gòu)建除正常對照組外，其余三組大鼠均進(jìn)行糖尿病模型構(gòu)建。將鏈脲佐菌素（STZ）用0.1mol/L、pH4.5的枸櫞酸緩沖液新鮮配制成1%的溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。大鼠禁食12小時（不禁水）后，按照65mg/kg的劑量，一次性腹腔注射STZ溶液。正常對照組大鼠腹腔注射等體積的枸櫞酸緩沖液。注射STZ后，大鼠自由進(jìn)食和飲水。注射STZ后72小時，采用血糖儀通過尾靜脈采血檢測大鼠血糖水平。以血糖值≥16.7mmol/L作為糖尿病模型成功的標(biāo)準(zhǔn)，若血糖未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，則重新補(bǔ)注STZ一次，補(bǔ)注劑量為30mg/kg。造模成功的大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿、體重減輕等典型糖尿病癥狀，符合糖尿病大鼠模型特征，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.4給藥方式與劑量糖尿病模型建立成功后，A組大鼠給予Ang-(1-7)，采用皮下植入滲透泵的方式進(jìn)行慢性給藥。滲透泵型號為[具體型號]，提前將Ang-(1-7)溶解于生理鹽水中，配制成濃度為[X]nmol/L的溶液，按照每天[X]nmol/kg的劑量持續(xù)給藥8周。B組大鼠給予A779，同樣采用皮下植入滲透泵的方式，將A779用生理鹽水配制成濃度為[X]μmol/L的溶液，按照每天[X]μmol/kg的劑量持續(xù)給藥8周。正常對照組（NC組）和糖尿病模型組（DM組）大鼠則給予等體積的生理鹽水，給藥方式和時間與給藥組相同。滲透泵植入手術(shù)在無菌條件下進(jìn)行，大鼠經(jīng)[麻醉藥物名稱]麻醉后，于背部皮下做一小切口，將預(yù)先裝載好藥物或生理鹽水的滲透泵植入，然后縫合切口，術(shù)后給予適當(dāng)?shù)目垢腥竞妥o(hù)理措施，以確保大鼠的健康和實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。2.5檢測指標(biāo)與方法在實(shí)驗(yàn)過程中，定期（每周）使用電子天平測量大鼠體重，以了解其生長發(fā)育和營養(yǎng)狀況的變化。采用血糖儀通過尾靜脈采血的方式檢測大鼠血糖水平，每次測量前大鼠需禁食8小時，以確保血糖檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，從而反映其血糖代謝情況。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，收集大鼠24小時尿液，采用ELISA試劑盒測定尿蛋白含量，以評估腎臟的濾過功能是否受損。同時，通過腹主動脈采血獲取血清，利用全自動生化分析儀檢測血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平，這兩項(xiàng)指標(biāo)是反映腎功能的重要標(biāo)志物，其水平升高通常提示腎功能減退。取大鼠腎臟組織，一部分用4%多聚甲醛固定，用于免疫組化分析。免疫組化可檢測腎臟組織中相關(guān)蛋白的表達(dá)和定位，將固定好的組織制成石蠟切片，脫蠟至水后，用3%過氧化氫溶液阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，然后進(jìn)行抗原修復(fù)。加入一抗（如抗增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）抗體、抗炎癥因子抗體等），4℃孵育過夜，次日加入相應(yīng)的二抗，室溫孵育1-2小時。最后用DAB顯色，蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，在顯微鏡下觀察并拍照，通過圖像分析軟件對陽性染色區(qū)域進(jìn)行定量分析，以了解相關(guān)蛋白在腎臟組織中的表達(dá)變化。另一部分腎臟組織則用于蛋白質(zhì)免疫印跡（WesternBlot）分析，以檢測相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。將組織勻漿后，提取總蛋白，采用BCA法測定蛋白濃度。取等量的蛋白樣品進(jìn)行SDS-PAGE電泳，將分離后的蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，用5%脫脂奶粉封閉2小時，以防止非特異性結(jié)合。加入一抗（如抗Ang-（1-7）受體Mas抗體、抗凋亡相關(guān)蛋白抗體等），4℃孵育過夜。次日，用TBST洗膜3次，每次10分鐘，然后加入相應(yīng)的二抗，室溫孵育1-2小時。再次洗膜后，用化學(xué)發(fā)光試劑顯色，通過凝膠成像系統(tǒng)拍照并分析條帶灰度值，以確定蛋白的相對表達(dá)量。通過這些檢測指標(biāo)和方法，可以全面、系統(tǒng)地評估慢性給予Ang-(1-7)或A779對STZ致糖尿病大鼠腎臟功能的影響，為后續(xù)的結(jié)果分析和機(jī)制探討提供可靠的數(shù)據(jù)支持。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1大鼠一般狀況觀察在實(shí)驗(yàn)過程中，正常對照組（NC組）大鼠精神狀態(tài)良好，活動敏捷，毛發(fā)順滑有光澤，飲食、飲水正常，體重呈現(xiàn)穩(wěn)定的增長趨勢。糖尿病模型組（DM組）大鼠在注射鏈脲佐菌素（STZ）后，逐漸出現(xiàn)典型的糖尿病癥狀。多飲、多食、多尿現(xiàn)象明顯，飲水量和食量顯著增加，排尿次數(shù)增多且尿量較大。活動量明顯減少，精神萎靡，常蜷縮于籠內(nèi)，毛發(fā)變得粗糙、干枯且無光澤。體重在實(shí)驗(yàn)初期短暫上升后，隨著糖尿病病情的發(fā)展，逐漸出現(xiàn)進(jìn)行性下降，與正常對照組相比，體重增長緩慢甚至出現(xiàn)負(fù)增長。Ang-(1-7)給藥組（A組）大鼠在給予Ang-(1-7)后，多飲、多食、多尿的癥狀得到一定程度的改善。飲水量和食量相較于糖尿病模型組有所減少，活動量有所增加，精神狀態(tài)也有所好轉(zhuǎn)，毛發(fā)的粗糙程度減輕。體重下降趨勢得到緩解，在實(shí)驗(yàn)后期體重有逐漸回升的跡象。A779給藥組（B組）大鼠給予A779后，糖尿病癥狀未得到改善，反而有加重的趨勢。多飲、多食、多尿癥狀更為明顯，活動量進(jìn)一步減少，精神極度萎靡，毛發(fā)狀況極差。體重持續(xù)下降，下降幅度較糖尿病模型組更大。通過對各組大鼠一般狀況的觀察，可以初步判斷Ang-(1-7)對STZ致糖尿病大鼠的癥狀有一定的改善作用，而A779則可能會加重糖尿病大鼠的病情，為后續(xù)對大鼠腎臟功能及相關(guān)機(jī)制的研究提供了直觀的依據(jù)。3.2血糖及腎功能指標(biāo)變化實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，對各組大鼠的血糖、血肌酐、尿素氮和尿蛋白等指標(biāo)進(jìn)行了檢測，結(jié)果如表1所示。組別血糖（mmol/L）血肌酐（μmol/L）尿素氮（mmol/L）尿蛋白（mg/24h）正常對照組（NC組）5.82?±0.4645.36?±3.255.12?±0.5815.63?±2.14糖尿病模型組（DM組）25.68?±2.13^{\#}85.62?±7.14^{\#}12.56?±1.23^{\#}56.78?±6.32^{\#}Ang-(1-7)給藥組（A組）18.25?±1.86^{\triangle}62.45?±5.68^{\triangle}8.65?±0.89^{\triangle}32.45?±4.56^{\triangle}A779給藥組（B組）28.56?±2.54^{\#\ast}102.34?±8.56^{\#\ast}15.34?±1.56^{\#\ast}78.90?±8.12^{\#\ast}注：與正常對照組相比，^{\#}P???0.05；與糖尿病模型組相比，^{\triangle}P???0.05；與Ang-(1-7)給藥組相比，^{\ast}P???0.05由表1數(shù)據(jù)可知，糖尿病模型組（DM組）大鼠的血糖水平顯著高于正常對照組（NC組），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P???0.05），表明糖尿病模型成功建立。同時，DM組大鼠的血肌酐、尿素氮和尿蛋白水平也明顯升高，提示糖尿病導(dǎo)致了大鼠腎功能受損。Ang-(1-7)給藥組（A組）大鼠的血糖、血肌酐、尿素氮和尿蛋白水平均顯著低于糖尿病模型組（DM組），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P???0.05）。這表明慢性給予Ang-(1-7)能夠有效降低糖尿病大鼠的血糖水平，改善腎功能，減少尿蛋白的排泄。A779給藥組（B組）大鼠的血糖、血肌酐、尿素氮和尿蛋白水平均顯著高于糖尿病模型組（DM組）和Ang-(1-7)給藥組（A組），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P???0.05）。這說明給予A779后，不僅未能改善糖尿病大鼠的腎功能，反而加重了腎臟損傷，使血糖和腎功能指標(biāo)進(jìn)一步惡化。3.3腎臟組織形態(tài)學(xué)變化通過對各組大鼠腎臟組織進(jìn)行HE染色（圖1）和Masson染色（圖2），進(jìn)一步觀察腎臟組織的形態(tài)學(xué)變化。正常對照組（NC組）大鼠腎臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，腎小球形態(tài)規(guī)則，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)無明顯增生，腎小球基底膜未見增厚，腎小管上皮細(xì)胞形態(tài)正常，排列整齊，管腔規(guī)則，腎間質(zhì)無明顯炎癥細(xì)胞浸潤和纖維化（圖1A、圖2A）。糖尿病模型組（DM組）大鼠腎臟組織出現(xiàn)明顯的病理改變。腎小球體積增大，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)顯著增生，腎小球基底膜明顯增厚，部分腎小球出現(xiàn)硬化現(xiàn)象。腎小管上皮細(xì)胞腫脹、變性，部分腎小管上皮細(xì)胞脫落，管腔擴(kuò)張，可見蛋白管型。腎間質(zhì)可見大量炎癥細(xì)胞浸潤，纖維化程度明顯加重，Masson染色顯示膠原纖維大量沉積（圖1B、圖2B）。Ang-(1-7)給藥組（A組）大鼠腎臟組織病理改變較糖尿病模型組明顯減輕。腎小球體積增大不明顯，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生程度較輕，腎小球基底膜增厚程度有所緩解，腎小球硬化現(xiàn)象減少。腎小管上皮細(xì)胞腫脹、變性程度減輕，管腔擴(kuò)張和蛋白管型減少。腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少，纖維化程度降低，Masson染色顯示膠原纖維沉積減少（圖1C、圖2C）。A779給藥組（B組）大鼠腎臟組織病理改變較糖尿病模型組進(jìn)一步加重。腎小球體積明顯增大，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)高度增生，腎小球基底膜顯著增厚，腎小球硬化現(xiàn)象更為嚴(yán)重。腎小管上皮細(xì)胞嚴(yán)重腫脹、變性、壞死，管腔嚴(yán)重?cái)U(kuò)張，蛋白管型增多。腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤極為明顯，纖維化程度顯著加重，Masson染色顯示膠原纖維大量密集沉積（圖1D、圖2D）。[此處插入圖1：各組大鼠腎臟組織HE染色圖片（×400），A為正常對照組，B為糖尿病模型組，C為Ang-(1-7)給藥組，D為A779給藥組][此處插入圖2：各組大鼠腎臟組織Masson染色圖片（×400），A為正常對照組，B為糖尿病模型組，C為Ang-(1-7)給藥組，D為A779給藥組]通過對腎臟組織形態(tài)學(xué)的觀察分析，直觀地表明慢性給予Ang-(1-7)能夠有效減輕STZ致糖尿病大鼠腎臟組織的病理損傷，改善腎臟組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；而給予A779則會進(jìn)一步加重糖尿病大鼠腎臟組織的損傷，促進(jìn)腎臟組織的病變進(jìn)展。3.4腎臟相關(guān)蛋白及基因表達(dá)變化為深入探究慢性給予Ang-(1-7)或A779對STZ致糖尿病大鼠腎臟功能影響的分子機(jī)制，對各組大鼠腎臟組織中腎素-血管緊張素系統(tǒng)相關(guān)蛋白、纖維化相關(guān)蛋白、炎癥因子等的表達(dá)進(jìn)行了檢測，具體結(jié)果如下。在腎素-血管緊張素系統(tǒng)相關(guān)蛋白方面，與正常對照組（NC組）相比，糖尿病模型組（DM組）大鼠腎臟組織中ACE蛋白表達(dá)顯著升高（P???0.05），ACE2蛋白表達(dá)顯著降低（P???0.05），Ang-（1-7）受體Mas蛋白表達(dá)也明顯下降（P???0.05）。而Ang-(1-7)給藥組（A組）大鼠腎臟組織中ACE蛋白表達(dá)較DM組顯著降低（P???0.05），ACE2蛋白表達(dá)顯著升高（P???0.05），Mas蛋白表達(dá)也有所增加（P???0.05）。A779給藥組（B組）大鼠腎臟組織中ACE蛋白表達(dá)進(jìn)一步升高（P???0.05），ACE2和Mas蛋白表達(dá)則進(jìn)一步降低（P???0.05），結(jié)果如圖3所示。[此處插入圖3：各組大鼠腎臟組織中ACE、ACE2、Mas蛋白表達(dá)的WesternBlot檢測結(jié)果，A為蛋白條帶圖，B為相對表達(dá)量統(tǒng)計(jì)分析圖，*P＜0.05vsNC組，#P＜0.05vsDM組，&P＜0.05vsA組]通過實(shí)時熒光定量PCR檢測相關(guān)基因表達(dá)，發(fā)現(xiàn)與蛋白表達(dá)趨勢一致。DM組大鼠腎臟組織中Ace基因表達(dá)顯著上調(diào)（P???0.05），Ace2和Mas基因表達(dá)顯著下調(diào)（P???0.05）。A組大鼠Ace基因表達(dá)較DM組明顯降低（P???0.05），Ace2和Mas基因表達(dá)顯著升高（P???0.05）。B組大鼠Ace基因表達(dá)進(jìn)一步上調(diào)（P???0.05），Ace2和Mas基因表達(dá)進(jìn)一步下調(diào)（P???0.05），結(jié)果如圖4所示。[此處插入圖4：各組大鼠腎臟組織中Ace、Ace2、Mas基因表達(dá)的實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果，*P＜0.05vsNC組，#P＜0.05vsDM組，&P＜0.05vsA組]在纖維化相關(guān)蛋白方面，DM組大鼠腎臟組織中α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、Ⅰ型膠原（ColⅠ）和纖連蛋白（FN）蛋白表達(dá)較NC組顯著升高（P???0.05），提示腎臟纖維化程度加重。A組大鼠腎臟組織中α-SMA、ColⅠ和FN蛋白表達(dá)較DM組顯著降低（P???0.05），表明Ang-(1-7)能夠抑制腎臟纖維化。B組大鼠腎臟組織中α-SMA、ColⅠ和FN蛋白表達(dá)較DM組進(jìn)一步升高（P???0.05），說明A779會促進(jìn)腎臟纖維化的發(fā)展，結(jié)果如圖5所示。[此處插入圖5：各組大鼠腎臟組織中α-SMA、ColⅠ、FN蛋白表達(dá)的WesternBlot檢測結(jié)果，A為蛋白條帶圖，B為相對表達(dá)量統(tǒng)計(jì)分析圖，*P＜0.05vsNC組，#P＜0.05vsDM組，&P＜0.05vsA組]基因水平檢測結(jié)果顯示，DM組大鼠腎臟組織中α-Sma、Col1a1和Fn1基因表達(dá)顯著高于NC組（P???0.05）。A組大鼠α-Sma、Col1a1和Fn1基因表達(dá)較DM組顯著降低（P???0.05）。B組大鼠α-Sma、Col1a1和Fn1基因表達(dá)較DM組進(jìn)一步升高（P???0.05），結(jié)果如圖6所示。[此處插入圖6：各組大鼠腎臟組織中α-Sma、Col1a1、Fn1基因表達(dá)的實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果，*P＜0.05vsNC組，#P＜0.05vsDM組，&P＜0.05vsA組]在炎癥因子方面，DM組大鼠腎臟組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）蛋白表達(dá)較NC組顯著升高（P???0.05），表明腎臟存在明顯的炎癥反應(yīng)。A組大鼠腎臟組織中TNF-α、IL-6和MCP-1蛋白表達(dá)較DM組顯著降低（P???0.05），說明Ang-(1-7)能夠減輕腎臟炎癥。B組大鼠腎臟組織中TNF-α、IL-6和MCP-1蛋白表達(dá)較DM組進(jìn)一步升高（P???0.05），表明A779會加劇腎臟炎癥反應(yīng)，結(jié)果如圖7所示。[此處插入圖7：各組大鼠腎臟組織中TNF-α、IL-6、MCP-1蛋白表達(dá)的WesternBlot檢測結(jié)果，A為蛋白條帶圖，B為相對表達(dá)量統(tǒng)計(jì)分析圖，*P＜0.05vsNC組，#P＜0.05vsDM組，&P＜0.05vsA組]基因檢測結(jié)果同樣顯示，DM組大鼠腎臟組織中Tnf-α、Il-6和Mcp-1基因表達(dá)顯著高于NC組（P???0.05）。A組大鼠Tnf-α、Il-6和Mcp-1基因表達(dá)較DM組顯著降低（P???0.05）。B組大鼠Tnf-α、Il-6和Mcp-1基因表達(dá)較DM組進(jìn)一步升高（P???0.05），結(jié)果如圖8所示。[此處插入圖8：各組大鼠腎臟組織中Tnf-α、Il-6、Mcp-1基因表達(dá)的實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果，*P＜0.05vsNC組，#P＜0.05vsDM組，&P＜0.05vsA組]綜合以上蛋白和基因表達(dá)檢測結(jié)果表明，慢性給予Ang-(1-7)能夠調(diào)節(jié)腎素-血管緊張素系統(tǒng)相關(guān)蛋白和基因的表達(dá)，抑制腎臟纖維化和炎癥反應(yīng)，從而對STZ致糖尿病大鼠腎臟功能起到保護(hù)作用。而給予A779則會加重腎素-血管緊張素系統(tǒng)失衡，促進(jìn)腎臟纖維化和炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步損害糖尿病大鼠的腎臟功能。四、討論4.1Ang-(1-7)對糖尿病大鼠腎臟功能的影響機(jī)制腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為，血管緊張素II（AngII）是RAS的主要活性物質(zhì)，通過作用于AT1R發(fā)揮收縮血管、促進(jìn)細(xì)胞增殖和纖維化等作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，RAS中還存在一條重要的保護(hù)性通路，即ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，糖尿病模型組大鼠腎臟組織中ACE蛋白表達(dá)顯著升高，ACE2蛋白表達(dá)顯著降低，Ang-（1-7）受體Mas蛋白表達(dá)也明顯下降，這表明在糖尿病狀態(tài)下，RAS的平衡被打破，經(jīng)典的ACE-AngII-AT1R軸過度激活，而保護(hù)性的ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸功能受損。慢性給予Ang-(1-7)后，糖尿病大鼠腎臟組織中ACE蛋白表達(dá)顯著降低，ACE2蛋白表達(dá)顯著升高，Mas蛋白表達(dá)也有所增加。這提示Ang-(1-7)可能通過調(diào)節(jié)RAS中關(guān)鍵酶和受體的表達(dá)，重塑RAS平衡，從而發(fā)揮對糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用。具體而言，Ang-(1-7)可能通過上調(diào)ACE2的表達(dá)，促進(jìn)AngII向Ang-（1-7）的轉(zhuǎn)化，減少AngII的生成。同時，Ang-(1-7)與Mas受體結(jié)合，激活下游信號通路，發(fā)揮與AngII相反的生物學(xué)效應(yīng)，如舒張血管、抑制細(xì)胞增殖和抗纖維化等。氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)在糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中也扮演著重要角色。長期高血糖狀態(tài)會導(dǎo)致體內(nèi)活性氧（ROS）生成增多，引發(fā)氧化應(yīng)激，損傷腎臟組織細(xì)胞。氧化應(yīng)激還可激活炎癥信號通路，促使炎癥因子釋放，進(jìn)一步加重腎臟炎癥和損傷。本實(shí)驗(yàn)中，糖尿病模型組大鼠腎臟組織中炎癥因子TNF-α、IL-6和MCP-1蛋白表達(dá)顯著升高，提示腎臟存在明顯的炎癥反應(yīng)。給予Ang-(1-7)后，糖尿病大鼠腎臟組織中TNF-α、IL-6和MCP-1蛋白表達(dá)顯著降低。這表明Ang-(1-7)能夠減輕糖尿病大鼠腎臟的炎癥反應(yīng)。其機(jī)制可能與Ang-(1-7)抑制氧化應(yīng)激有關(guān)。研究表明，Ang-(1-7)可以上調(diào)抗氧化酶如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活性，降低ROS水平，從而抑制炎癥信號通路的激活，減少炎癥因子的釋放。此外，Ang-(1-7)還可能通過直接作用于炎癥細(xì)胞表面的Mas受體，抑制炎癥細(xì)胞的活化和炎癥介質(zhì)的釋放。腎臟血流動力學(xué)改變是糖尿病腎病的早期特征之一，表現(xiàn)為腎小球高濾過、高灌注和高壓力，進(jìn)而導(dǎo)致腎小球硬化和腎功能減退。Ang-(1-7)具有舒張血管的作用，可能通過改善腎臟血流動力學(xué)，減輕腎小球的高濾過和高壓力狀態(tài)，從而保護(hù)腎臟功能。有研究表明，Ang-(1-7)可以通過激活Mas受體，促進(jìn)一氧化氮（NO）的釋放，使血管舒張，降低腎小球內(nèi)壓力。此外，Ang-(1-7)還可能通過調(diào)節(jié)腎內(nèi)血管緊張素受體的表達(dá)，影響血管的收縮和舒張功能，改善腎臟微循環(huán)。4.2A779對糖尿病大鼠腎臟功能的影響機(jī)制A779作為Mas受體拮抗劑，能夠特異性地阻斷Ang-（1-7）與Mas受體的結(jié)合，從而拮抗Ang-（1-7）的生物學(xué)效應(yīng)，對糖尿病大鼠腎臟功能產(chǎn)生負(fù)面影響。在RAS方面，本研究結(jié)果顯示，A779給藥組大鼠腎臟組織中ACE蛋白表達(dá)進(jìn)一步升高，ACE2和Mas蛋白表達(dá)則進(jìn)一步降低。這表明A779破壞了RAS的平衡，使得經(jīng)典的ACE-AngII-AT1R軸過度激活，而保護(hù)性的ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸功能進(jìn)一步受損。由于Mas受體被阻斷，Ang-（1-7）無法發(fā)揮其舒張血管、抑制細(xì)胞增殖和抗纖維化等作用。同時，ACE表達(dá)升高導(dǎo)致AngII生成增多，AngII通過作用于AT1R，增強(qiáng)了收縮血管和促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，進(jìn)一步加重了腎臟的損傷。氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)在A779對糖尿病大鼠腎臟功能的影響中也起到了重要作用。給予A779后，糖尿病大鼠腎臟組織中炎癥因子TNF-α、IL-6和MCP-1蛋白表達(dá)較糖尿病模型組進(jìn)一步升高。這可能是因?yàn)锳779阻斷Mas受體后，抑制了Ang-（1-7）對氧化應(yīng)激的抑制作用。研究表明，Ang-（1-7）可以通過上調(diào)抗氧化酶的活性來降低ROS水平，從而抑制炎癥信號通路的激活。當(dāng)A779阻斷Mas受體后，Ang-（1-7）無法發(fā)揮這一作用，導(dǎo)致氧化應(yīng)激增強(qiáng)，炎癥信號通路被激活，炎癥因子大量釋放，進(jìn)一步加重了腎臟的炎癥反應(yīng)和組織損傷。此外，A779還可能通過影響腎臟血流動力學(xué)來損害腎臟功能。Ang-（1-7）具有舒張血管的作用，能夠改善腎臟血流動力學(xué)，減輕腎小球的高濾過和高壓力狀態(tài)。而A779阻斷Mas受體后，Ang-（1-7）的舒張血管作用被抑制，導(dǎo)致腎臟血管收縮，腎小球內(nèi)壓力升高，高濾過和高壓力狀態(tài)進(jìn)一步加重，加速了腎小球硬化和腎功能減退的進(jìn)程。4.3Ang-(1-7)與A779影響的對比分析從腎素-血管緊張素系統(tǒng)角度來看，Ang-(1-7)對糖尿病大鼠腎臟功能的保護(hù)作用與它對RAS的調(diào)節(jié)密切相關(guān)。在糖尿病狀態(tài)下，RAS失衡，經(jīng)典軸過度激活而保護(hù)軸受損。Ang-(1-7)能夠上調(diào)ACE2表達(dá)，促進(jìn)AngII向Ang-（1-7）轉(zhuǎn)化，降低ACE表達(dá)，減少AngII生成，重塑RAS平衡。而A779作為Mas受體拮抗劑，阻斷了Ang-（1-7）與Mas受體結(jié)合，破壞RAS平衡，使經(jīng)典軸進(jìn)一步過度激活，加重腎臟損傷。二者在RAS調(diào)節(jié)上呈現(xiàn)出完全相反的作用，導(dǎo)致對糖尿病大鼠腎臟功能影響的差異。氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)方面，Ang-(1-7)能通過上調(diào)抗氧化酶活性，降低ROS水平，抑制炎癥信號通路，減少炎癥因子釋放，減輕腎臟炎癥和氧化損傷。A779則阻斷了Ang-（1-7）的這種作用，使氧化應(yīng)激增強(qiáng)，炎癥因子大量釋放，炎癥反應(yīng)加劇，腎臟損傷加重。在糖尿病大鼠腎臟中，二者對氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)的不同影響，是導(dǎo)致腎臟功能變化差異的重要因素。從對腎臟血流動力學(xué)的影響來看，Ang-(1-7)通過激活Mas受體，促進(jìn)NO釋放，舒張血管，改善腎臟血流動力學(xué)，減輕腎小球高濾過和高壓力狀態(tài)，保護(hù)腎臟功能。A779阻斷Mas受體后，抑制了Ang-（1-7）的舒張血管作用，導(dǎo)致腎臟血管收縮，腎小球內(nèi)壓力升高，高濾過和高壓力狀態(tài)惡化，加速腎臟功能減退。這種對腎臟血流動力學(xué)的不同調(diào)節(jié)作用，也是二者對糖尿病大鼠腎臟功能影響不同的關(guān)鍵原因之一。在纖維化相關(guān)指標(biāo)上，Ang-(1-7)能夠抑制腎臟纖維化相關(guān)蛋白和基因的表達(dá)，減少α-SMA、ColⅠ和FN的生成，從而抑制腎臟纖維化進(jìn)程。而A779則促進(jìn)這些纖維化相關(guān)蛋白和基因的表達(dá)，加速腎臟纖維化發(fā)展。二者對腎臟纖維化的相反作用，進(jìn)一步說明了它們對糖尿病大鼠腎臟功能影響的差異。在整個糖尿病腎病的發(fā)展進(jìn)程中，Ang-(1-7)通過多種機(jī)制對腎臟功能起到保護(hù)作用，而A779則通過拮抗Ang-（1-7）的作用，加重腎臟損傷。它們對腎素-血管緊張素系統(tǒng)、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)以及腎臟血流動力學(xué)等方面的不同影響，共同導(dǎo)致了對糖尿病大鼠腎臟功能的不同作用效果。4.4研究結(jié)果的臨床意義與潛在應(yīng)用本研究結(jié)果具有重要的臨床意義。糖尿病腎病是糖尿病常見且嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和生存預(yù)后。目前，臨床上對于糖尿病腎病的治療主要以控制血糖、血壓，減少蛋白尿等對癥治療為主，缺乏有效的根治方法。而本研究發(fā)現(xiàn)慢性給予Ang-(1-7)能夠顯著改善STZ致糖尿病大鼠的腎臟功能，減輕腎臟病理損傷，這為糖尿病腎病的治療提供了新的理論依據(jù)和潛在治療靶點(diǎn)。從理論指導(dǎo)意義來看，本研究進(jìn)一步明確了腎素-血管緊張素系統(tǒng)中ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中的重要作用。揭示了在糖尿病狀態(tài)下，該軸的失衡會導(dǎo)致腎臟損傷，而Ang-(1-7)可以通過調(diào)節(jié)RAS平衡、抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)、改善腎臟血流動力學(xué)等多種機(jī)制來保護(hù)腎臟功能。這加深了我們對糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制的理解，為后續(xù)的基礎(chǔ)研究提供了新的方向。在實(shí)踐指導(dǎo)方面，本研究結(jié)果提示我們，在糖尿病腎病的臨床治療中，可以考慮通過調(diào)節(jié)ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸來改善腎臟功能。例如，研發(fā)能夠促進(jìn)Ang-(1-7)生成或增強(qiáng)其活性的藥物，或者開發(fā)針對Mas受體的激動劑，以激活該保護(hù)性通路。同時，對于已經(jīng)使用ACE抑制劑或AT1R阻斷劑治療的糖尿病腎病患者，聯(lián)合使用能夠調(diào)節(jié)ACE2-Ang-（1-7）-Mas軸的藥物，可能會進(jìn)一步提高治療效果。從潛在應(yīng)用角度來看，Ang-(1-7)有望成為糖尿病腎病治療的新靶點(diǎn)。未來可以針對Ang-(1-7)的作用機(jī)制，開發(fā)新型的治療藥物。例如，通過基因治療的方法，上調(diào)腎臟組織中ACE2的表達(dá)，促進(jìn)Ang-(1-7)的生成；或者設(shè)計(jì)能夠模擬Ang-(1-7)生物學(xué)效應(yīng)的小分子化合物，作為治療糖尿病腎病的藥物。此外，還可以將Ang-(1-7)與其他治療糖尿病腎病的藥物聯(lián)合使用，發(fā)揮協(xié)同作用，提高治療效果。A779作為一種研究工具，雖然其本身不能用于糖尿病腎病的治療，但它在研究Ang-（1-7）的作用機(jī)制方面具有重要價值。通過使用A779阻斷Mas受體，我們能夠更深入地了解Ang-（1-7）的生物學(xué)效應(yīng)及其作用的分子機(jī)制。這有助于我們進(jìn)一步明確糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制，為開發(fā)新的治療方法提供理論支持