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1、1、白血病免疫分型北京愛普益醫(yī)學(xué)檢測(cè)中心市場(chǎng)部的孫曉琳,2、流式細(xì)胞術(shù)的基本概念,流式細(xì)胞術(shù)(簡(jiǎn)稱Flow Cytometry,F(xiàn)CM )是一種快速、準(zhǔn)確、客觀、同時(shí)測(cè)定單個(gè)微粒(通常是細(xì)胞)多個(gè)特性的技術(shù)例如,各種細(xì)胞、微生物和人工合成微粒等所研究的微粒的特性,可以同時(shí)篩選特定的組作為生物粒子,包含各種物理和生物學(xué)特征,定量,3,散射光信號(hào)和熒光信號(hào),前向角散射光(FSC,F(xiàn)orward Scatter ) 入射激光前向散射光信號(hào)細(xì)胞的相對(duì)大小及其表面積側(cè)角散射光(SSC Side Scatter )入射激光的90角散射光信號(hào)細(xì)胞粒度和細(xì)胞內(nèi)相對(duì)復(fù)雜的熒光素與特異抗體結(jié)合,熒光抗體越與細(xì)胞抗
2、原結(jié)合,產(chǎn)生的熒光信號(hào)越強(qiáng)。 4、CD45/SS模式圖、5、抗原分布、表面、細(xì)胞漿、核內(nèi)是共同檢查還是分別檢查? CD 3,4,8,四甲基環(huán)境,CD 3,4,8,四甲基環(huán)境DNA,CD 3,4,8,四甲基環(huán)境DNA,6,安裝門,08-03307,7,7 8 9、血液腫瘤分類過程,10、白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)、白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標(biāo)記是正常造血細(xì)胞不同分化發(fā)育階段表達(dá)的分化抗原。 盡管是惡性腫瘤細(xì)胞,卻能表達(dá)正常血球所具有的抗原,因此可以根據(jù)該抗原的表達(dá)譜對(duì)白血病/淋巴瘤進(jìn)行免疫分類。 為了正確分析白血病/淋巴瘤細(xì)胞,必須充分理解正常造血細(xì)胞分化抗原的表達(dá)模式。 只有精通正常細(xì)胞的
3、抗原表達(dá)模式才能識(shí)別白血病/淋巴瘤細(xì)胞的存在。 細(xì)胞類型鑒定,borowitz et al (1993 ) ajcp 10033530534-40.steltzeretal (1993 ) annyacadsci 66335365-280,12, CD45/SS成像正常骨髓細(xì)胞血液腫瘤細(xì)胞老化粒細(xì)胞、食酸細(xì)胞早幼-成熟粒細(xì)胞M3、CML單核細(xì)胞M4、M5 LGL淋巴細(xì)胞CLL、ALL、CLD正常前體細(xì)胞M0、M1、M2、嗜堿粒細(xì)胞M4、M5、ALL成熟紅細(xì)胞、血小板M6、M7、MM細(xì)胞碎片pre - 、13、b淋巴細(xì)胞分化和抗原表達(dá)的關(guān)系圖,woodandborowitz (2006 ) He
4、nryslaboratorymedicine,14、t淋巴細(xì)胞分化和抗原表達(dá)的關(guān)系圖woodandborowitz (2006 ) Henry 粒細(xì)胞分化和抗原表達(dá)的關(guān)系圖,woodandborowitz (2006 ) Henryslaboratorymedicine,16,單核細(xì)胞分化和抗原表達(dá)的關(guān)系圖woodandborowitz (2006 ) Henryslaboratorymedic 根據(jù)非腫瘤b淋巴細(xì)胞表型、19、非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型、20、非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型、21、白血病免疫分型、白血病細(xì)胞表達(dá)的一系列相關(guān)抗原,確定其系列的來源。 例如淋系T/B、粒單系、紅系、巨
5、核系等。 根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的序列進(jìn)一步分類其相關(guān)抗原。 例如,之前的b、之前的b、普通的B、22、初治急性白分型、acuteleukemia-blastspresent%、紅色系和巨核系的鑒定需要追加二線抗體。CD71,GPA,CD41,cd61,23,AML-m3,24,AML-M4 CD2CD 5雙CD4/CD8SCD3-、CD2 CD5 CD4 or CD8 sCD3、CD2-/ CD5-/ sCD3- CD4- CD8-、TdT CD10- clg- sig-、Pre-B、CD10 cig TdT sig-,b, sig CD10 /- clg /- TdT-,公共TDT cd10
6、clg-SIG -,earlythumbyte,Early B- Precursor,27,B-ALL,28,Pre-BALL,29,白血病免疫分型的價(jià)值是ALL的細(xì)胞類型(認(rèn)定AML的特性。 形態(tài)學(xué)上未分化的急性白血病有助于細(xì)胞類型的鑒定。 我在診斷白血病。 例如M6、M7、M0等。 30、多發(fā)性骨髓瘤(MM )、多發(fā)性骨髓瘤是漿細(xì)胞異常增殖性疾病。正常的漿細(xì)胞可以使用CD38 /CD45dim/-、CD38/CD45雙標(biāo)記檢測(cè)外周血和骨髓標(biāo)本,正確地劃定漿細(xì)胞群。 通常使用CD38和CD45結(jié)合輕鏈檢查,分析多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞。 另外,正常漿細(xì)胞的表面標(biāo)記為CD19 /CD56-,多發(fā)性骨髓
7、瘤細(xì)胞標(biāo)記為CD19-/CD56。 CD138現(xiàn)在被認(rèn)為是漿細(xì)胞最特異的指標(biāo)。 因此,用流式細(xì)胞儀對(duì)外周血或骨髓標(biāo)本進(jìn)行多參數(shù)分析,計(jì)算異常漿細(xì)胞的含量對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療評(píng)價(jià)具有重要意義。 31,MM,32,用流式細(xì)胞儀診斷血液腫瘤劣勢(shì),1,纖維化、硬化的骨髓可能沒有充分的細(xì)胞分析。 2、即使細(xì)胞過多凝聚或結(jié)成塊,也可能沒有足夠的分析細(xì)胞。 3、硬化的組織也很難得到充分的分析細(xì)胞。 4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系喪失。 5 .比率過低,很難檢測(cè)出單克隆b細(xì)胞。 33、流式免疫表型診斷血液腫瘤劣勢(shì),6、無異常免疫表型的t細(xì)胞淋巴瘤也有可能難以檢出。 7、異常的t細(xì)胞免疫表型不一定提示t細(xì)胞腫瘤,也是感染引起的
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