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文檔簡介
1、1、白血病免疫分型北京愛普益醫(yī)學檢測中心市場部的孫曉琳,2、流式細胞術(shù)的基本概念,流式細胞術(shù)(簡稱Flow Cytometry,F(xiàn)CM )是一種快速、準確、客觀、同時測定單個微粒(通常是細胞)多個特性的技術(shù)例如,各種細胞、微生物和人工合成微粒等所研究的微粒的特性,可以同時篩選特定的組作為生物粒子,包含各種物理和生物學特征,定量,3,散射光信號和熒光信號,前向角散射光(FSC,F(xiàn)orward Scatter ) 入射激光前向散射光信號細胞的相對大小及其表面積側(cè)角散射光(SSC Side Scatter )入射激光的90角散射光信號細胞粒度和細胞內(nèi)相對復雜的熒光素與特異抗體結(jié)合,熒光抗體越與細胞抗
2、原結(jié)合,產(chǎn)生的熒光信號越強。 4、CD45/SS模式圖、5、抗原分布、表面、細胞漿、核內(nèi)是共同檢查還是分別檢查? CD 3,4,8,四甲基環(huán)境,CD 3,4,8,四甲基環(huán)境DNA,CD 3,4,8,四甲基環(huán)境DNA,6,安裝門,08-03307,7,7 8 9、血液腫瘤分類過程,10、白血病免疫分型的理論基礎、白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標記是正常造血細胞不同分化發(fā)育階段表達的分化抗原。 盡管是惡性腫瘤細胞,卻能表達正常血球所具有的抗原,因此可以根據(jù)該抗原的表達譜對白血病/淋巴瘤進行免疫分類。 為了正確分析白血病/淋巴瘤細胞,必須充分理解正常造血細胞分化抗原的表達模式。 只有精通正常細胞的
3、抗原表達模式才能識別白血病/淋巴瘤細胞的存在。 細胞類型鑒定,borowitz et al (1993 ) ajcp 10033530534-40.steltzeretal (1993 ) annyacadsci 66335365-280,12, CD45/SS成像正常骨髓細胞血液腫瘤細胞老化粒細胞、食酸細胞早幼-成熟粒細胞M3、CML單核細胞M4、M5 LGL淋巴細胞CLL、ALL、CLD正常前體細胞M0、M1、M2、嗜堿粒細胞M4、M5、ALL成熟紅細胞、血小板M6、M7、MM細胞碎片pre - 、13、b淋巴細胞分化和抗原表達的關(guān)系圖,woodandborowitz (2006 ) He
4、nryslaboratorymedicine,14、t淋巴細胞分化和抗原表達的關(guān)系圖woodandborowitz (2006 ) Henry 粒細胞分化和抗原表達的關(guān)系圖,woodandborowitz (2006 ) Henryslaboratorymedicine,16,單核細胞分化和抗原表達的關(guān)系圖woodandborowitz (2006 ) Henryslaboratorymedic 根據(jù)非腫瘤b淋巴細胞表型、19、非腫瘤粒細胞、單核細胞表型、20、非腫瘤粒細胞、單核細胞表型、21、白血病免疫分型、白血病細胞表達的一系列相關(guān)抗原,確定其系列的來源。 例如淋系T/B、粒單系、紅系、巨
5、核系等。 根據(jù)白血病細胞表達的序列進一步分類其相關(guān)抗原。 例如,之前的b、之前的b、普通的B、22、初治急性白分型、acuteleukemia-blastspresent%、紅色系和巨核系的鑒定需要追加二線抗體。CD71,GPA,CD41,cd61,23,AML-m3,24,AML-M4 CD2CD 5雙CD4/CD8SCD3-、CD2 CD5 CD4 or CD8 sCD3、CD2-/ CD5-/ sCD3- CD4- CD8-、TdT CD10- clg- sig-、Pre-B、CD10 cig TdT sig-,b, sig CD10 /- clg /- TdT-,公共TDT cd10
6、clg-SIG -,earlythumbyte,Early B- Precursor,27,B-ALL,28,Pre-BALL,29,白血病免疫分型的價值是ALL的細胞類型(認定AML的特性。 形態(tài)學上未分化的急性白血病有助于細胞類型的鑒定。 我在診斷白血病。 例如M6、M7、M0等。 30、多發(fā)性骨髓瘤(MM )、多發(fā)性骨髓瘤是漿細胞異常增殖性疾病。正常的漿細胞可以使用CD38 /CD45dim/-、CD38/CD45雙標記檢測外周血和骨髓標本,正確地劃定漿細胞群。 通常使用CD38和CD45結(jié)合輕鏈檢查,分析多發(fā)性骨髓瘤細胞。 另外,正常漿細胞的表面標記為CD19 /CD56-,多發(fā)性骨髓
7、瘤細胞標記為CD19-/CD56。 CD138現(xiàn)在被認為是漿細胞最特異的指標。 因此,用流式細胞儀對外周血或骨髓標本進行多參數(shù)分析,計算異常漿細胞的含量對多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療評價具有重要意義。 31,MM,32,用流式細胞儀診斷血液腫瘤劣勢,1,纖維化、硬化的骨髓可能沒有充分的細胞分析。 2、即使細胞過多凝聚或結(jié)成塊,也可能沒有足夠的分析細胞。 3、硬化的組織也很難得到充分的分析細胞。 4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系喪失。 5 .比率過低,很難檢測出單克隆b細胞。 33、流式免疫表型診斷血液腫瘤劣勢,6、無異常免疫表型的t細胞淋巴瘤也有可能難以檢出。 7、異常的t細胞免疫表型不一定提示t細胞腫瘤,也是感染引起的
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