實驗設計(碩士).ppt

1、A,1,實驗設計一、實驗設計概論（一）概念（二）重要性及意義二、實驗設計原則三、實驗設計三要素四、實驗設計內(nèi)容（一）課題研究設計（二）實驗操作設計1.基本程序2.具體步驟和注意事項五、計算機在科學研究中的應用,A,2,一、概論（一）概念實驗設計:是從事科學研究的設想和計劃是進行科學研究必須首先經(jīng)過的步驟也是能否達到研究目的的關(guān)鍵所在包括課題研究設計和實驗操作設計,A,3,（二）重要性和意義良好的設計是成功的一半能否達到研究目標的關(guān)鍵所在設計按設計操作結(jié)果目標蛋白檢測技術(shù)：ELISAWesternBlot免疫組化放免檢測抗體芯片免疫共沉淀,A,4,二、實驗設計原則1.為目標服務2.簡捷化的原則用

2、簡單的方法能解決的問題不要用復雜的方法以節(jié)省時間和經(jīng)費3.要有創(chuàng)新意識學術(shù)思路創(chuàng)新技術(shù)方法創(chuàng)新研究有所發(fā)現(xiàn)和突破4.可行理論基礎(chǔ)實踐條件,A,5,三、實驗設計三要素1.分組隨機化避免偏倚2.設置對照組通過比較得結(jié)論，認識規(guī)律和特點3.實驗的可重復性樣本量的問題普遍規(guī)律：個別一般,A,6,四、實驗設計的內(nèi)容（一）課題研究設計研究生開題報告、課題研究計劃1.選題方面在充分調(diào)研了解某項目研究的目的和意義、國內(nèi)外研究動態(tài)的基礎(chǔ)上，立題科學性、迫切性和實用性,A,7,2.明確研究目標從事科學研究要解決的問題，達到的目標3.確定研究內(nèi)容研究內(nèi)容為研究的核心，內(nèi)容為目標服務4.選定研究方法據(jù)研究內(nèi)容而定，方

3、法為內(nèi)容服務不能為方法而方法5.解決關(guān)鍵技術(shù)內(nèi)容創(chuàng)新的關(guān)鍵，技術(shù)創(chuàng)新的主要內(nèi)容。,A,8,6.可行性分析不僅要創(chuàng)新，而且可行，缺一不可技術(shù)路線可行研究方法可行7.工作基礎(chǔ)預實驗研究內(nèi)容研究方法,A,9,8.條件保障實驗室建設儀器設備情況9.課題組成員人在科學研究中起決定作用周密的實驗，無人無法進行,A,10,（二）實驗操作設計研究生一定要掌握1.基本程序熟悉觀察指標確定研究方法查閱資料，熟悉該研究方法的各項內(nèi)容確定實驗流程物品、器材準備試劑配制實驗操作程序?qū)嵤┙Y(jié)果判定、記錄數(shù)據(jù)處理,A,11,2.具體步驟和注意事項（1）明確觀察指標了解課題研究的整體設計關(guān)鍵是明確要解決的問題明確研究內(nèi)容根據(jù)研

4、究內(nèi)容確定觀察指標,A,12,（2）選擇合適的技術(shù)方法簡單、創(chuàng)新、可行基因檢測技術(shù)PCR：擴增雜交：膜雜交：SouthernBlotNorthernBlot原位雜交基因芯片：集成化,A,13,（）熟悉技術(shù)方法的有關(guān)知識原理：明白為什么能用此方法解決問題如PCR原理：DNAn擴增核酸分子雜交探針標記步驟：不僅知道如何做還知道為什么這么做（howandwhy),A,14,A,15,關(guān)鍵步驟：實驗成敗的關(guān)鍵改建創(chuàng)新技術(shù)方法結(jié)果判定陽性與陰性結(jié)果的判定與分析真假陽性與意義如何避免、克服和改進,A,16,（）關(guān)于試劑配制問題整個實驗的關(guān)鍵一旦試劑配制不當會導致整個實驗的失敗如：抗凝劑凝血有核細胞分離,A

5、,17,選對試劑：磷酸鹽，Tris-HCl,鈉鹽是否含水，分子量是多少濃度：原裝試劑純度與濃度不一定是100%如：鹽酸，甲醛稀釋的倍數(shù)關(guān)系：抗體等,A,18,Ph值：適宜AP-堿性（8.2）HRP中性（7.4）多聚甲醛配制（8.0）溶液：水（最常用）甲醇和乙醇等,A,19,消毒、滅菌問題是否要求無菌操作高壓滅菌應用于能耐高溫試劑，如鹽溶液過濾除菌應用于不耐高溫試劑，如蛋白制劑,A,20,試劑儲存問題避免蛋白制劑的反復凍融溫度：室溫，-20-80，-180時間：有效期，半衰期過濾,A,21,（）操作流程物品器材準備充分有條不紊，避免隨用隨抓的壞習慣無菌問題,A,22,邊做邊思考明白每一步所起作用

6、假如去掉此步，會有什么影響假如改進此步，會有什么效果技術(shù)改進與創(chuàng)新的基礎(chǔ)加樣要看清試劑否則導致整個實驗失敗,A,23,做上一步要想到下一步如何做提前做好準備，避免手忙腳亂如冰凍切片后固定，要提前配好固定液結(jié)果要妥善保管，及時記錄保密，丟失陽性結(jié)果喪失如熒光染色及時照相，因結(jié)果不穩(wěn)定,A,24,根據(jù)需要設置對照實驗保證結(jié)果的科學性和可信性1.陰性對照2.陽性對照3.空白對照4.溶液對照：配試劑的溶液5.參比標準對照：用標準的藥物做對照6.質(zhì)控對照：控制實驗穩(wěn)定性對照,A,25,（）記錄與歸檔包括結(jié)果觀察和實驗方法兩部分應一并歸檔邊做邊記錄，避免歸檔時重整理藍黑或黑墨水記錄切忌用圓珠筆記錄，否則，

7、無法歸檔打印原件歸檔,A,26,實驗記錄的基本要求真實、及時、準確、完整謹防隨意亂記和隨意涂改更不能偽造，編造數(shù)據(jù)實驗記錄的內(nèi)容實驗的名稱、目的、設計方案、時間材料、方法、過程、觀察指標實驗結(jié)果及分析等,A,27,（7）數(shù)據(jù)處理問題要貫徹在研究工作的全過程利用計算機進行分析處理在數(shù)據(jù)處理過程中，善于發(fā)現(xiàn)問題反饋修正研究和設計中的不足邊實驗邊處理數(shù)據(jù)不易遺漏和丟失數(shù)據(jù)若待實驗結(jié)束后再處理、整理數(shù)據(jù)往往會發(fā)現(xiàn)重要數(shù)據(jù)的丟失,A,28,（8）在整個實驗過程中注意發(fā)現(xiàn)新現(xiàn)象和意想不到的結(jié)果重大的發(fā)現(xiàn)往往在偶然中獲得的不應刪改實驗記錄，一定要真實,A,29,五、計算機在科學研究中的應用1.查閱資料（internet)2.實驗設計(words)3.實驗記錄（Exce