支原體及衣原體.ppt

1、支原體及衣原體,王悅,支原體（mycoplasma）,柔膜體綱,支原體目,肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體,解脲尿原體,支原體科,無(wú)膽甾原體科,螺原體科,支原體屬,脲原體屬,3.生物學(xué)性狀,3.2 結(jié)構(gòu) 內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類(lèi)，中層為脂類(lèi)（膽固醇為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、二性霉素B等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。細(xì)胞膜外有莢膜。 特殊的頂端結(jié)構(gòu)： 粘附宿主上皮 細(xì)胞表面，與支 原體的致病有關(guān)。,3.生物學(xué)性狀,3.2 培養(yǎng)特性 培養(yǎng)基中需加入1020%人或動(dòng)物血清以提供膽固醇和其他長(zhǎng)鏈脂肪酸。多數(shù)還需添加酵母浸液、組織浸液、核酸提取物和輔酶。 最適pH

2、7.88.0之間，低于7.0則死亡，但解脲脲原體最適 pH6.06.5。 兼性厭氧，多數(shù)在37微氧環(huán)境生長(zhǎng)良好。 固體培養(yǎng)基上，37培養(yǎng)310天可生長(zhǎng)直徑10600m的 “油煎蛋”樣菌落，低倍鏡觀察菌落呈圓形，中央致密隆起，外 周有顆粒包繞。 繁殖方式除了二分裂外，還有分節(jié)、出芽、斷裂和分枝等 方式。,3.生物學(xué)特性,3.生物學(xué)性狀,3.生物學(xué)性狀,3.生物學(xué)性狀,3.3 生化反應(yīng),3.4 抗原結(jié)構(gòu) 支原體的抗原主要來(lái)自細(xì)胞膜外層蛋白、構(gòu)成莢膜的肽聚糖和中層 脂類(lèi)組成。其外層蛋白是型特異性抗原，具有免疫原性。 生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（GIT）和代謝抑制試驗(yàn)（MIT）利用針對(duì)此抗原的型 特異性血清來(lái)抑制支

3、原體在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，可將支原體分成若干血 清型。3.5 抵抗力 支原體無(wú)細(xì)胞壁，對(duì)理化因素抵抗力弱： 不耐干燥、不耐熱，耐寒。 對(duì)化學(xué)消毒劑敏感，但對(duì)堿、醋酸鉈、結(jié)晶紫有抵抗力。 對(duì)作用于細(xì)胞壁的青霉素類(lèi)天然耐受，對(duì)干擾蛋白質(zhì)合成和 作用于DNA螺旋酶阻礙DNA合成的抗生素敏感。,3.生物學(xué)特性,4.1 致病物質(zhì) 粘附素：粘附到尿道和生殖道上皮細(xì)胞 莢膜或者微莢膜：具有抗吞噬作用 毒性代謝產(chǎn)物：神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過(guò)氧化氫和 超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細(xì)胞或紅細(xì)胞的病理?yè)p傷 超抗原：免疫調(diào)節(jié) 其它：如穿透支原體粘附侵入CD4 T細(xì)胞引起損傷,4.致病性,4.3 免疫性 體液免疫：抗

4、膜蛋白的抗體包括IgM、IgG和SIgA 細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4Th1 細(xì)胞分泌細(xì)胞因子,4.致病性, 肺炎支原體是目前所能確定引起人類(lèi)呼吸道感染性疾病的唯一支原體，主要引起人類(lèi)支原體肺炎。,肺炎支原體,0.20.3m，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀； 初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中，一般10天左右長(zhǎng)出菌落；多次傳代后生長(zhǎng)加快，菌落呈“油煎蛋”狀； 能發(fā)酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素，對(duì)豚鼠紅細(xì)胞產(chǎn)生溶血環(huán)； 對(duì)美藍(lán)、醋酸鉈、青霉素不敏感。,1.生物學(xué)性狀, 2.1 主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏末秋初，115歲人群發(fā)病率較高，嬰兒發(fā)病率最高。 2.2 含

5、特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。 肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起組織損傷。 莢膜 毒性代謝產(chǎn)物,2.致病性, 原發(fā)性非典型性肺炎（primary atypical pneumonia）（間質(zhì)性肺炎），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。還可引起咽喉炎、鼻炎、中耳炎和氣管炎等,3.所致疾病, 血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞； 呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感

6、染有較強(qiáng)保護(hù)作用； 出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作,4.免疫性,標(biāo)本采集 咽拭子去患者咽部分泌物或痰標(biāo)本于培養(yǎng)基培養(yǎng) 分離鑒定 12w取菌落生化鑒定（分離陽(yáng)性率低） （形態(tài)、糖發(fā)酵、溶血性、紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)） 生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)GIT 代謝抑制試驗(yàn)MIT 冷凝集試驗(yàn) PCR：從痰標(biāo)本中檢測(cè)支原體核酸16S rRNA或 P1蛋白基因 ELISA: 抗體檢測(cè) 抗原檢測(cè),4.微生物學(xué)檢查, 大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物 喹諾酮類(lèi)藥物,5.治療, 脲原體屬中只有解脲脲原體是致病支原體，主要引起人類(lèi)生殖道感染。,解脲脲原體, 形態(tài)：0.50.3 m，單個(gè)或成雙排列 固體培養(yǎng)：48 h后長(zhǎng)出直徑1530 m

7、“油煎蛋”狀菌落。 最適pH為5.56.5。 生化反應(yīng)：分解尿素，不分解糖類(lèi)和精氨 酸，液體培養(yǎng)基中分解尿素產(chǎn)生氨 抵抗力：對(duì)1:2000醋酸鉈不敏感 抗原：MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲 原體分為A、B兩大群。 14個(gè)血清型。,1.生物學(xué)性狀, -粘附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷； -產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對(duì)宿主細(xì)胞有急性毒性作用； -磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。,2. 致病機(jī)制, 通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。 還可通過(guò)胎盤(pán)感染胎兒，出現(xiàn)早產(chǎn)和死胎。也能引起婦女不孕不育癥。 常與衣原體、淋球菌合并感染 可通過(guò)兩性傳播，是引起性傳播疾病的病原

8、體之一。,3.所致疾病,接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；再取0.2 ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基，在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經(jīng)37培養(yǎng)2448 h，用低倍鏡觀察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。 PCR,4.微生物學(xué)檢查,加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。 四環(huán)素類(lèi)（紅霉素、多西環(huán)素、阿奇霉素等）、 喹諾酮類(lèi)藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。,5.防治,衣原體,沙眼衣原體,肺炎衣原體,衣原體（chlamydia）, G-，圓形或橢圓形體 具有細(xì)胞壁，其組成與G-菌相似 有獨(dú)特的發(fā)育周期，二分裂方式繁殖 獨(dú)立的酶系統(tǒng)，但不能產(chǎn)生代謝能量，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生

9、對(duì)多種抗生素敏感 有核糖體，基因組有DNA和RNA,共同特征, 3.1獨(dú)特的發(fā)育周期 原體（elementary body，EB）小而致密，成熟型，高度易感性； 網(wǎng)狀體（reticulate body，RB）大而疏松，繁殖型，不具感染性。,3.生物學(xué)性狀,包涵體（inclusion)：是衣原體在細(xì)胞空泡內(nèi)繁殖過(guò)程中所形成的集團(tuán)形態(tài)，內(nèi)含無(wú)數(shù)子代原體和正在分裂的網(wǎng)狀體。,3.生物學(xué)性狀, 3.2培養(yǎng)特性 專性細(xì)胞內(nèi)寄生，可在雞胚卵黃囊中以及Hela細(xì)胞、HL等細(xì)胞中 繁殖生長(zhǎng)。 3.3抗原結(jié)構(gòu) 根據(jù)細(xì)胞壁的成分不同分為： 屬特異性抗原 脂多糖 種特異性抗原 外膜蛋白 型特異性抗原 外膜蛋白可變區(qū)

10、氨基酸序列不同 3.4抵抗力 對(duì)熱敏感，耐寒耐干燥 對(duì)甲醛、酒精等常用消毒劑敏感，紫外線可迅速滅活 多種抗生素可抑制繁殖,3.生物學(xué)性狀, 4.1 致病物質(zhì) 內(nèi)毒素樣物質(zhì)抑制細(xì)胞代謝，破壞細(xì)胞 主要外膜蛋白與吸附、侵入宿主細(xì)胞及阻止吞噬體 和溶酶體融合有關(guān) 熱休克蛋白肉芽腫性炎癥、瘢痕形成,4.致病性與免疫性,4.致病性與免疫性, 4.2所致疾病, 4.3免疫性 細(xì)胞免疫與體液免疫，細(xì)胞免疫為主,直接涂片鏡檢 采用Giemsa、碘液或熒光抗體染色鏡檢，檢查上皮細(xì)胞內(nèi)有無(wú)包涵體。 分離培養(yǎng) 接種雞胚卵黃囊、小鼠或傳代細(xì)胞 核酸檢測(cè),5.微生物學(xué)檢查,沙眼衣原體 Chlamydia trachomatis,傳染源：人 沙眼生物型、LGV性病淋巴肉芽腫生物型、鼠生物型,沙眼生物型 湯飛凡，1955，雞胚卵黃囊接種法 首次分離,對(duì)人不致病,沙眼,眼-眼，眼-手-眼:,沙眼生物型 A、B、Ba和C血清型,感染眼結(jié)膜上皮細(xì)胞,增殖，包涵體,局部炎癥,早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生,后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫 以及角膜血管翳引起的角膜損害,影響視力或致盲,包涵體結(jié)膜炎( 成人、嬰兒） 由沙眼生物型D-K血清型引起 嬰兒產(chǎn)道傳染 成人癥狀類(lèi)似沙眼，病變較輕 泌尿生殖道感染 性接觸 血清型與包涵體結(jié)膜炎相同,性病淋巴肉芽腫生物型,血清型（L1、L2、L2a及L3） 致