基因擴增儀PCR儀測溫系統(tǒng)校準規(guī)范

1、基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)校準規(guī)范一個范圍本規(guī)范適用于48孔或96孔的孔結(jié)構(gòu)測量范圍為(0120)的多信道基因擴增器(PCR校正)測溫系統(tǒng)或單信道基因擴增器(PCR校正)溫度校正的校正，其他孔結(jié)構(gòu)和溫度范圍的基因擴增器(PCR校正)測溫系統(tǒng)的溫度校正可參考本規(guī)范。2參照文件本規(guī)范引用以下文件JJF 1071-2000 國家計量校準規(guī)范編寫規(guī)則JJF 1007-2007 溫度計量名詞術(shù)語及定義JJF 1527-2015 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準規(guī)范YY/T 1173-2010 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀智能運輸系統(tǒng)- 90 1990年國際溫標注日引用文件僅注日版本適用于本規(guī)格未填寫日期的參考文件的最新

2、版本(包括所有修改單)適用于本規(guī)格。3術(shù)語3.1基因擴增器(PCR器)，即聚合酶鏈式反應(yīng)分析器polymerasechainreactionanalyzer基于PCR (聚合酶鏈式反應(yīng))技術(shù)原理，模擬DNA或RNA復(fù)制過程，在不存在鑄造模型、引物、校驗和的條件下，特異性擴增已知序列并對其進行檢測分析的儀器設(shè)備。 YY/T 1173-2010 3.23.2基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)temperaturemeasuringsystemforpolymerasechainreactionanalyzer用于基因擴增器(PCR器)的專用溫度校準裝置。3.3溫度校正專用等溫塊和附件isotherma

3、lblockandaccessoryfortemperaturecalibration與標準恒溫箱結(jié)合使用，提供基因擴增器測量(PCR器)溫系溫度校正的潔凈溫場輔助裝置。3.4溫度校正專用等溫塊測試孔testingholefortemperaturecalibration本發(fā)明提供一種模擬基因擴增器溫度塊搖滾樂內(nèi)的結(jié)構(gòu)并將基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的探頭放置于插孔內(nèi)的專用等溫塊搖滾樂。3.5基因擴增器溫度校正專用等溫塊標準溫度驗證孔temperature validate hole在基因擴增器等溫塊上設(shè)有放置標準鉑電阻溫度校正的固定位置。3.6溫度測量范圍溫度測量在精度要求中，基因擴增器測

4、溫系統(tǒng)可實現(xiàn)的上下限溫度f的范圍。3.7顯示值誤差指示錯誤基因擴增器測溫系統(tǒng)在溫度測量范圍內(nèi)可達到的最大溫度誤差。3.8溫度極限分辨率溫度解決方案。所述基因擴增器測溫系統(tǒng)顯示與向末尾變化的修正數(shù)順序?qū)?yīng)的輸入變化溫度值。4概要基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)是用于基因擴增器(PCR器)的實時溫度校準的感測系統(tǒng)。 通常由多通道測溫傳感器(測溫模塊)、數(shù)據(jù)收集模塊、數(shù)據(jù)線、顯示器(電腦)構(gòu)成。圖1是示出基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的測溫結(jié)構(gòu)的圖5修正測量特性5.1顯示值誤差基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的溫度顯示值誤差最大允許誤差： 0.20。5.2溫度測量范圍基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的溫度

5、測量范圍請復(fù)蓋(30100)。5.3溫度極限分辨率基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的溫度極限分辨率必須在0.01以下。5.4功能性檢查5.4.1外觀基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)應(yīng)外觀良好。 各通道溫度傳感器的外形應(yīng)干凈、無彎曲、無斷裂、清潔無污染。 溫度傳感器封裝良好，導(dǎo)線連接器應(yīng)良好接觸。 溫度傳感器使用的保護管及導(dǎo)線應(yīng)能承受相應(yīng)的使用溫度。5.4.2顯示功能基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的顯示功能的檢查在電源接通的狀態(tài)下進行。 測溫系統(tǒng)各通道的溫度值滿足溫度極限分辨率的要求，顯示數(shù)和圖像要清晰，小數(shù)點和狀態(tài)的顯示要準確。測溫系統(tǒng)超過測溫范圍、傳感器故障時，軟件應(yīng)實時顯示對應(yīng)的通道編號。6校

6、準條件6.1環(huán)境條件6.1.1環(huán)境溫度： (1535)； 環(huán)境大氣濕度：85 %RH。6.1.2電氣量測儀器設(shè)備的環(huán)境條件應(yīng)符合相應(yīng)要求。6.1.3校準時，基因擴增器(PCR器)測溫系統(tǒng)的供電電壓應(yīng)在正常工作范圍內(nèi)，與共恒溫設(shè)備和電氣測量共同使用的電源條件應(yīng)滿足相應(yīng)的使用要求。6.2測量用標準設(shè)備及配對設(shè)備測量用標準設(shè)備及配對設(shè)備如表3所示。表3測定用標準器及配對設(shè)備序列號德老虎鉗名稱技術(shù)要求用途備考1二等規(guī)格鉑測溫電阻體溫度校正測量范圍(-189.3442419.527) )溫度標準器也可以使用符合要求的其他測量標準2電測設(shè)備0.005級，電氣測量設(shè)備加裝標準器后，最小極限分辨率相當于0.0

7、01。定徑套電氣測量設(shè)備3與恒溫箱PCR測溫專用等溫塊及配件溫度范圍溫度均勻性溫度變異性提供基因擴增器測溫系統(tǒng)專用的均勻溫場以標準鉑電阻為測定基準時，作業(yè)區(qū)域的深度為300mm以上。沒有自重結(jié)構(gòu)的基因擴增器測溫系統(tǒng)必須與壓桿組合使用(-20150)0.030.01/10min4水三相點瓶U=0.002，k=2測定標準鉑電阻的水三相點值7校準項目和校準方法7.1校準項目a )溫度顯示值誤差b )測溫范圍c )溫度極限分辨率7.2校正方法7.2.1校準前的準備a )打開電氣測量設(shè)備進行預(yù)熱，預(yù)熱時間至少達到20min或其使用說明書相應(yīng)要求。b )將標準鉑電阻溫度校正裝入預(yù)先凍結(jié)的水三相點瓶中，測量

8、其水三相點值。 新測量的水三相點值輸入到定徑套電氣測量設(shè)備中使用。c )按照恒溫箱和使用說明書的要求正常工作，保證工作區(qū)域的液面在規(guī)定位置。d )基因擴增器測溫系統(tǒng)本體接通電源進行預(yù)熱，進入測量狀態(tài)。e )基因擴增器測溫系統(tǒng)校正專用等溫布搖滾樂，如圖2所示放置在恒溫箱內(nèi)(建議向等溫布搖滾樂溫度孔內(nèi)注入15L導(dǎo)熱油以保證更好的溫度傳導(dǎo)性)，以保證等溫布搖滾樂在恒溫箱內(nèi)所需的液面浸漬深度滿足下表所示的要求。局浸式等溫封搖滾樂全浸式等溫封搖滾樂浸漬深度180毫米180毫米圖2基因擴增器測溫系統(tǒng)校正專用等溫塊搖滾樂示意圖f )如圖3所示，將基因擴增器測溫系統(tǒng)放入PCR測溫專用等溫子搖滾樂。 將標準鉑電

9、阻溫度校準插入PCR測溫專用等溫布搖滾樂專用驗證孔內(nèi)，保證標準鉑電阻測溫零配件和等溫布搖滾樂底部的保持水平，將恒溫箱設(shè)定在所需的校準溫度點，并將等溫布搖滾樂與恒溫箱一起溫度穩(wěn)定1小時后，所監(jiān)測的標準鉑電阻溫度校準顯示基因擴增器測溫系統(tǒng)校準裝置的溫度波動度小于0.01/10min，基因增加圖3在基因擴增器測溫系統(tǒng)等溫子搖滾樂內(nèi)校正溫度顯示值誤差原理圖7.2.2校準過程7.2.2.1溫度顯示值的誤差a )校正溫度顯示值誤差的溫度點一般選擇為30、50、60、70、90、95。 如果用戶提出請求，可以根據(jù)用戶的請求選擇校準點。b )將基因擴增器測溫模塊與測溫系統(tǒng)本體連接，使其處于正常工作狀態(tài)。 將基

10、因擴增模組放入基因擴增器測溫系統(tǒng)校正專用等溫布搖滾樂，將溫度傳感器放入等溫布搖滾樂測試孔，保證測溫傳感器與等溫布搖滾樂貼緊，并蓋上絕熱棉。 沒有自重功能的基因擴增器測溫系統(tǒng)需要在測溫模塊上對密封件進行加壓。 參照圖3。 在云同步中，將標準鉑電阻溫度校正放入恒溫箱中，將標準鉑電阻溫度校正放入PCR測溫專用等溫塊搖滾樂專用驗證孔中，浸漬在恒溫介質(zhì)中的深度在180mm以上。c )將恒溫箱設(shè)定為校準的溫度點，恒溫箱的實際溫度的最大偏差為0.20以下，(以二等標準鉑電阻溫度校正的顯示值為基準)穩(wěn)定30分鐘以上，分別讀取標準器和基因擴增器測溫系統(tǒng)的各通道的溫度值，連續(xù)4次進行測量。 修正各自的平均值。標準

11、器(t*1)測試點a1(ta1) 測試點a2(ta2) 測試點an(tan )欸標準器(t*2) 測試點a1(ta1) 測試點a2(ta2) 測試點an(tan )欸標準器(t*3)測試點a1(ta1) 測試點a2(ta2) 測試點an(tan )欸標準器(t*4) 測試點a1(ta1) 測試點a2(ta2) 測試點an(tan )在測定中，恒溫箱的溫度變化在0.01以下。d )根據(jù)上述c )的測定要求，在30、50、60、70、90、95的狀態(tài)下，依次測定標準器和基因擴增器測溫系統(tǒng)的各通道a1an點的溫度顯示值。e )溫度校準點也可根據(jù)客戶要求，采用上述方法進行測量。7.2.2.2溫度測量范

12、圍7.2.2.1中的b )和c )的要求，分別測定基因擴增器測溫系統(tǒng)的溫度測定通常下限30和通常上限95的狀態(tài)下的顯示值誤差。溫度測量上限和溫度下限也可以根據(jù)制造商填寫的溫度測量范圍，用上述方法進行測量。7.2.2.3溫度極限分辨率節(jié)根據(jù)7.2.2.1中的b )和c )的要求，將基因擴增器測溫系統(tǒng)模塊放入恒溫箱中的基因擴增器校準專用等溫布搖滾樂溫度驗證孔內(nèi)，并將恒溫箱與等溫布搖滾樂一起設(shè)定在90、恒溫30min以上，而測量基因擴增器測溫系統(tǒng)在90的狀態(tài)下保持穩(wěn)定b )根據(jù)校正基因擴增器測溫系統(tǒng)的標稱顯示的溫度極限分辨率D1，緩慢調(diào)整恒溫箱的設(shè)定溫度，直到校正基因擴增器測溫系統(tǒng)的顯示值穩(wěn)定為(t

13、1 D1)，并記錄此時的標準鉑電阻溫度校正顯示值T2，將基因擴增器測溫系統(tǒng)放入恒溫槽中的基因放大器校正專用等溫塊在恒溫10min以上c )按照步驟a和步驟b，反復(fù)進行連續(xù)4次測定，記錄數(shù)據(jù)。 修正4次測定和的平均值。d )溫度極限分辨率(率)請用=進行訂正7.3校準結(jié)果的處理7.3.1溫度顯示值的誤差按下式校正式中：基因擴增器測溫系統(tǒng)溫度顯示值誤差?；驍U增器測溫系統(tǒng)a1an通道4次溫度測量的平均值。標準鉑電阻溫度校正4次測定得到的溫度測定的平均值。按照JJG160的規(guī)定，換算以標準鉑電阻溫度校正4次測定的溫度值，并校正其平均值按照JJG160的規(guī)定，換算以標準鉑電阻溫度校正4次測定的溫度值，

14、并校正其平均值b )計算基因擴增器測溫系統(tǒng)a1an通道的4次溫度測量的平均值。c )修正基因擴增器測溫系統(tǒng)的各通道a1an的顯示值誤差；修理到約0.01。7.3.2溫度極限分辨率(率)通過下式進行修正。=-其中-是溫度極限分辨率、標稱溫度極限分辨率D1的有效位數(shù)約為；等溫塊在恒溫箱內(nèi)穩(wěn)定在90.00時，在基因擴增器測溫系統(tǒng)的各個通道一次測量的溫度顯示值的4次平均值，以標稱溫度極限分辨率D1的有效位數(shù)計約為；在基因擴增器測溫系統(tǒng)的各通道中一次測量的溫度顯示值(T2 D1 )時的標準鉑電阻溫度校正顯示值的4次平均值，以標稱溫度極限分辨率D1的有效位數(shù)計約為；a )修正基因擴增器測溫系統(tǒng)的各通道a1

15、an的顯示值誤差；=-、公稱溫度極限分辨率D1的有效位數(shù)約為。b )計算基因擴增器測溫系統(tǒng)某通道的4次測定結(jié)果的平均值。用公稱溫度極限分辨率D1的有效位數(shù)修理約、。8校正結(jié)果的表現(xiàn)校對結(jié)果必須反映在校對證明書上。 校對證書必須至少包含以下信息：a )標題：“校對證明書”；b )實驗室名稱和地址c )進行校正的場所(與實驗室地址不同時)d )證書的唯一標識符(如編號)、每頁和總頁數(shù)的標識符e )客戶的姓名和地址f )被校對象的記述和明確的識別g )在進行校正的日期與校正結(jié)果的有效性和應(yīng)用有關(guān)的情況下，應(yīng)該說明被校正對象的接收日期h )在涉及校準結(jié)果的有效性的應(yīng)用的情況下，對被校正樣本的采樣順序進行說明I )顯示校準所依據(jù)的技術(shù)規(guī)格(包括名稱和符號)j )本次校準中使用的測定基準的質(zhì)量跟蹤和有效性的說明k )校正環(huán)境的說明l )各校正項目的檢查結(jié)果的說明m )校準規(guī)格偏差的說明n )校準證書頒發(fā)者的簽名、職務(wù)或等效標識牌；o )表示校正結(jié)果僅對被校正對象有效的聲明p )未經(jīng)實驗室書面批準，不得部分復(fù)制證書聲明。附錄a