PCT和CRP在感染性疾病中的臨床應用.ppt

1、PCT和CRP在感染性疾病中的臨床應用,廣東省婦幼保健院檢驗科 胡 塔,2,CRP的發(fā)現(xiàn),C-反應蛋白(C-reactive protein)簡稱CRP, 1930年由Tillet和Francis在急性大葉性肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)，因其能與肺炎鏈球菌C莢膜多糖起沉淀反應而得名，是人類重要的急性期反應蛋白，急性期濃度可升高上千倍。CRP具有多種生物學活性，被認為是最敏感的炎性指標之一。,3,CRP的結構,CRP是環(huán)狀五球體蛋白，屬于鈣結合蛋白，相對分子量約為120000，由五個相同的亞基依靠非共價鍵構成，在細胞因子IL-6家族誘導下由肝臟上皮細胞迅速合成。,4,CRP的表達與功能,CRP是人體非特異

2、性免疫機制的一部分。 CRP不能通過胎盤，在體內分布甚廣，除血液外、胸水、腹水、心包液及關節(jié)液中均可測出。 CRP作為有免疫防御特性的鈣結合蛋白, 其最主要生物學功能是在Ca2+存在下與磷酸膽堿、DNA、組蛋白等結合。 CRP能夠與體內凋亡壞死的細胞或者外部入侵的細菌、真菌、寄生蟲等的細胞壁中的磷酸膽堿結合,從而激活補體,調理吞噬,促使內源性或外源性配體物質的清除。,5,CRP的參考值,正常值10mg/L 新生兒生出生后3d內測CRP無特異性，因為分娩使CRP應激性升高。,6,正常人群CRP值,7,CRP臨床應用參考范圍,8,CRP的穩(wěn)定性,9,CRP的檢測,80年代以前作為炎癥和組織損傷的非

3、特異性標志物大量應用于臨床。 但是由于過去CRP的檢測方法較為落后，假陽性和假陰性很高，影響了它在臨床上的價值，而逐漸被臨床所忽視。 近年來由于檢測技術不斷更新，用于檢測CRP的快速、簡便、可靠的方法已迅速建立。使CRP的臨床應用大大增加。其在醫(yī)學上的價值也真正得到了廣泛的承認和認可。,10,CRP檢測方法比較,11,單向免疫擴散法,1,膠乳凝集試驗,2,免疫比濁法,3,膠乳增強試驗,4,免疫標記測定,5,CRP檢測方法簡介：,12,CRP檢測方法（1）單向免疫擴散法,優(yōu)點： 特異性高，重復性好，操作簡單，價格低廉，不需要特殊儀器檢測等。 缺點： 此法最大的缺點是在抗原過量時易出現(xiàn)假陰性，因此

4、用該方法檢測CRP，若未出現(xiàn)沉淀環(huán)時，必須稀釋標本后復檢，以避免漏診。此外，由于該法的敏感性較差，制約了其臨床上的廣泛應用。,13,CRP檢測方法（2）膠乳凝集試驗,優(yōu)點： 簡單快速，敏感性、特異性較高 缺點： 易受補體、類風濕因子（RF） 等因素的干擾，產生假陽性結果。因此，為了提高結果的準確性，檢測時應對待測標本進行預處理，以去除干擾因素。,14,CRP檢測方法（3）免疫比濁法,此法是一種抗原抗體結合反應的動態(tài)測定法，可快速、準確地測量樣品中抗原的含量，并且可在多種自動化檢測儀上應用。 目前應用較廣泛的Quik-Read 快速CRP定量檢測，就是以免疫比濁法為基本原理。 研究顯示：免疫比濁

5、法在檢測時間、操作方法、結果精確度、重復性、靈敏度方面均優(yōu)于單擴法與膠乳凝集法。,15,CRP檢測方法（4）膠乳增強試驗,在上述的比濁法中，檢測CRP的敏感性方面仍不夠理想。這就需要建立更敏感、更精確、在血清CRP濃度較低的情況下（0.110mg/L）仍具有較高準確度的檢測方法 。 膠乳增強免疫透射比濁法測定超敏CRP(Hs-CRP)是一種新型的檢測方法，具有快速、方便、準確等優(yōu)點 。 利用該方法檢測Hs-CRP在預測和預防冠心病、動脈粥樣硬化等心血管疾病中起重要作用。,16,CRP檢測方法（5）免疫標記測定,ELISA、免疫發(fā)光法和化學發(fā)光法等都可用于CRP的測定。 化學發(fā)光法的靈敏度和定量

6、精確度可與RIA媲美,而無同位素污染,試劑穩(wěn)定,分析速度快。 CRP-POCT(床邊試驗)法 ELISA干片法。 把磷脂酰膽堿(PC)化學交聯(lián)固定于載體。 樣品中待檢測的CRP與載體的PC結合。 被酶標記的抗CRP單抗結合。 可靈敏、特異性檢測CRP,約5分鐘可得結果。,17,CRP的臨床應用,18,CRP在細菌與病毒感染的患者之間存在明顯差異，細菌感染時快速升高。 CRP的持續(xù)升高也可發(fā)生在慢性炎癥，包括自身免疫性疾病以及腫瘤中。 CRP在絕大多數(shù)病毒感染的血清濃度變化不大或不變,這是由于大多數(shù)病毒感染是在細胞內增殖進行,而完整的細胞膜上缺乏暴露的磷脂蛋白質,故不能觸發(fā)CRP的產生和結合。,

7、（1）CRP用于感染的鑒別,19,血清CRP在感染發(fā)生后58h即開始升高, 48h達到峰值，血漿半衰期19h，高峰值可達正常的數(shù)百倍。 隨著感染控制它可在2448h迅速下降, 1w 內恢復正常。 CRP的水平和持續(xù)時間與感染程度呈正相關。 CRP持續(xù)升高或再度升高提示臨床應重視病情的變化。,（1）CRP用于感染的鑒別,20,CRP的臨床應用,21,CRP應用（2）評估病情,CRP為1050mg/L表示輕度炎癥。 CRP升至100mg/L表示較嚴重的疾病，它的嚴重程度在必要時需靜脈注射。 CRP 100mg/L表示嚴重的疾病過程并常表示細菌感染的存在。,22,CRP應用（3）抗生素的治療監(jiān)測,C

8、RP可作為抗生素療效觀察的參考指標。 CRP下降至正常時，建議中斷抗生素治療。 當高危人群缺少微生物學診斷時，CRP檢測結果可為抗生素治療的指引。,23,CRP應用（4）外科術后,患者施行手術后2472h,血中CRP水平明顯升高,約在第57天恢復正常。 凡驟升后持續(xù)高水平多預示合并感染。對中、大手術患者,建議在術前和術后37天各做常規(guī)檢測一次。 凡術后57天CRP仍持續(xù)高水平者,理應懷疑合并感染,并配合治療作隨訪監(jiān)測。,24,CRP應用（5）癌癥,對于癌癥患者，已升高或正在升高的CRP預示著預后不良及常提示轉移。 結腸癌是導致死亡人數(shù)第二多的癌癥。研究顯示，血液CRP含量最高的那些人患結直腸癌

9、的危險，是CRP含量最低者的兩倍。,25,CRP應用（6）心血管疾病,CRP水平可預測將來心肌梗塞及中風的危險性。 在痛疼開始后數(shù)小時內CRP升高，3-4d達高峰，在CK-MB回到正常后7-10d也降至正常。 CRP含量2.1mg/L的人與1mg/L者比較 將來發(fā)生心肌梗塞的危險性為后者的2.9倍 發(fā)生缺血性中風的危險性為后者的1.9倍； 發(fā)生外周動脈血管性疾病的危險性為后者的4.1倍。,26,快速CRP的實驗室應用,27,CRP樣品前處理存在問題,28,最新CRP檢測流程,減少9個步驟 改善2個步驟 消除人為誤差 減少1800步驟(每天200個標本),29,CRP是一種五球體結構的高度保守的

10、急時相蛋白，它作為模式識別分子，與特殊的分子結構結合而發(fā)揮作用。 CRP作為宿主先天性免疫應答的一部分，在機體平衡和自身保護中起著重要貢獻。 CRP的檢測：對于普通的炎癥用常敏CRP檢測即可，而對于心血管疾病、代謝綜合征、自身免疫性疾病、新生兒疾病檢測等則需用超敏CRP檢測方法。 CRP對機體許多疾病的早期診斷、鑒別診斷、療效觀察、預后評估以及指導臨床抗生素的合理應用等有重要的意義。速度快、簡便實用、可靠性強的CRP檢測手段，值得在臨床臨床上推廣應用。,小結,30,Thanks!,31,練習題：,1.CRP作為急性期反應蛋白，與WBC、ESR等指標相比在臨床疾病的診療方面有何優(yōu)勢？ 2.請簡要說明CPR的臨床應用主要體現(xiàn)在哪些方面？,32,降鈣素原,PCT（降鈣素原，procalcitonin）也是一種炎癥標志物質，當嚴重細菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時它在血漿中的水平升高。 自身免疫、過敏和病毒感染時P