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文檔簡介
1、從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的 芽孢桿菌,鞏固微生物分離純化、細(xì)菌保藏等技能,對(duì)所學(xué)習(xí)過的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜合技能訓(xùn)練,培養(yǎng)綜合利用微生物學(xué)、生物化學(xué)等相關(guān)知識(shí),自行設(shè)計(jì)、實(shí)施并判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的能力,學(xué)習(xí)掌握從環(huán)境中分離產(chǎn)淀粉酶菌株以及菌株初步鑒定的方法,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?獲得產(chǎn)淀粉酶的菌株并對(duì)其進(jìn)行初步的鑒定,實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料,產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌含量在不同土壤中含量也不同,實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行預(yù)埋工作,能使土壤中產(chǎn)淀粉酶的細(xì)菌含量增加。待實(shí)驗(yàn)前取樣即可,在只用淀粉充當(dāng)碳源的選擇培養(yǎng)基中,只有能產(chǎn)生淀粉酶利用淀粉的菌體能成為優(yōu)勢(shì)菌種,從而得到富集,實(shí)驗(yàn)原理,在已確定的芽孢桿菌情況下,在菌落處滴加碘夜來觀察透明圈情況
2、。,細(xì)菌富集一段時(shí)間后,生長環(huán)境不利,會(huì)產(chǎn)生芽孢,再在80-90 溫度下殺死菌體,可使芽孢得到富集,配無菌水,并將其分裝 到7個(gè)試管中,每只9ml。(7個(gè)管),目的菌株的富集,1、取10g土壤加入250ml燒杯中,再加入90ml無菌水,充分震蕩,制成土壤混懸液。 2、在37攝氏度搖床(200r/min)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)23個(gè)小時(shí),使菌體充分?jǐn)U散到無菌水中。 3、在80 水浴鍋中加熱1015分鐘,殺滅菌體,使芽孢得到富集. 4、靜置,取上清至富集培養(yǎng)基的錐形瓶中。在37攝氏度搖床(200r/min)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一天,使菌體富集且產(chǎn)生大量芽孢。,將富集后的芽孢菌液上清分別稀釋 101、102、103、104、105 、106、107倍,分別取102 、104 、105 、106、107菌液0.1ml均勻涂布在10個(gè)淀粉培養(yǎng)基上,在37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)2天,平板培養(yǎng)基表面便形成了若干分散的單菌落。,選擇性分離,在單菌落處滴加碘液,挑取有透明圈的單菌落劃線分離,在37的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天。,初篩,鑒定,1、將單菌落點(diǎn)種落接到淀粉平板上純培養(yǎng),
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