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文檔簡介
1、一、實驗?zāi)康牧私飧祷盍Φ臏y定方法和原理,掌握TTC法測定根系活力的方法二、實驗原理氯化三苯四唑(TTC )為氧化還原色素,水溶液為無色,被根系細胞中的琥珀酸脫氫酶還原,紅色不溶于水的三苯甲基(TTF ) 三、實驗器材和試劑1、實驗儀器燒杯、分光光度修正、容量瓶、恒溫槽、石英砂、研缽、量筒、三角燒瓶、刻度試管2、實驗試劑乙酸乙烯酯、亞硫酸鈉、1TTC (正確地說,取1.00 g TTC,邊攪拌邊裝入蒸餾水500 ml的燒杯取出琥珀酸0.4 mol/L (琥珀酸4.72g,溶于水,定容為100ml )、磷酸緩沖液66mmol/l(ph7.0。 a液:將11.876 g na2hpo 42 h2o
2、溶解于蒸餾水中,定容為1000 mL。 b液:將KH2PO4 9.078g溶解于蒸餾水中,定容為1000 mL。 時取a液60mL,b液40mL混合) 3,實驗材料:植物根系,4,實驗步驟1,定性觀察(1)反應(yīng)液的制備:1TTC溶液,0.4 mol/L琥珀酸和66 mmol/L磷酸緩沖液(2)待測對象根系洗凈后,仔細清洗,翻譯液2 .定量測定(1)TTC還原量的測定:取出12g根樣品,浸漬在加入了0.4TTc和66 mmol/L的磷酸緩沖液(pH7.0)等兩種混合液10 mL的燒杯中,用37保溫3 h后,加入1mol/L硫酸2取出根,充分擦拭水分后用乙酸乙酯3-5mL和少量石英砂器在研磨缽中仔細研磨,提取甲基,過濾后,將紅色的提取液轉(zhuǎn)移到容量瓶中,最后將乙酸乙酯補充到刻度,用分光光度修正485 nm比較顏色,以空白試驗(先加入硫酸,再加入根樣品)為參考比較OS (3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:制備濃度0、0.04、0.03、0.02、0.01、0.005的TTC溶液,將各5mL放入刻度試管中,取乙酸乙酯5mL和少量的Na2S2O4(約2 mg上層乙酸乙酯液,以空白為參照比,以分光光度修正,各溶液的注意
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