實驗三細(xì)菌的分布與外界因素對細(xì)菌的影響.ppt

1、細(xì)菌的分布與外界因素對細(xì)菌的影響,右江民族醫(yī)學(xué)院微生物與免疫學(xué)教研室,實驗?zāi)康?.掌握皮膚消毒方法 .掌握標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（）的原理、操作方法、結(jié)果的判讀與解釋及臨床意義 .掌握紙片擴(kuò)散法的質(zhì)量控制方法 .熟悉人體皮膚、咽喉部細(xì)菌檢查方法 .熟悉紫外線滅菌方法 .了解空氣、水中細(xì)菌的檢查方法 .了解高壓蒸汽滅菌方法,試驗內(nèi)容,一、細(xì)菌的分布檢查 .空氣中細(xì)菌的檢查 .水中細(xì)菌的檢查 .皮膚消毒試驗 .飛沫中細(xì)菌的檢查,二、外界因素對細(xì)菌的影響 .高壓蒸汽滅菌法 .紫外線殺菌試驗 .藥物敏感試驗,一、細(xì)菌的分布檢查,了解微生物在自然界及正常人體的分布，對于在醫(yī)療實踐及某些科學(xué)實驗中樹立無菌觀念有著

2、重要的意義。,材料,普通瓊脂平板 血瓊脂平板 MH瓊脂平板 溫箱 無菌棉簽等,普通瓊脂平板,血瓊脂平板,空氣中細(xì)菌的檢查（示教）,左邊培養(yǎng)皿菌落是未被過濾空氣中的細(xì)菌，右邊是經(jīng)過濾空氣中留有的少量細(xì)菌,水中細(xì)菌的檢查（示教）,取水樣1ml 注入無菌空平皿內(nèi) 加15mL已融化并冷卻至約45的培養(yǎng)基混勻 倒置于溫箱培養(yǎng)18-h后觀察結(jié)果,1.分區(qū)標(biāo)記 2.接種 3.培養(yǎng),皮膚細(xì)菌的檢查：,常用的皮膚消毒劑,飛沫中細(xì)菌的檢查,用咳碟法將咽喉部細(xì)菌接種于血平板,二、外界因素對細(xì)菌的影響,當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生巨大改變，可導(dǎo)致微生物的主要代謝活動發(fā)生障礙，生長停頓，甚至死亡。,1.高壓蒸汽滅菌法（示教）,原

3、理：利用密閉的金屬鍋，密閉加熱使鍋內(nèi)蒸汽壓力增大，溫度隨之升高，殺菌力增強(qiáng)。,高壓蒸汽滅菌器,手提式高壓蒸汽滅菌器,高壓蒸汽滅菌器,構(gòu)造：高壓蒸汽滅菌器是一個雙層的金屬圓筒，兩層之間盛水，外層堅厚，其上方或前方有金屬厚蓋。蓋旁附有螺旋，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽壓力升高，其溫度亦相應(yīng)的增高。,1.加水至外筒內(nèi)，被滅菌物品放入內(nèi)筒。 2.蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。 3.加熱，同時打開排氣閥門，排凈其中冷空氣，關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(103.4kPa,121.3)，保持壓力和溫度維持1530min。 4.待壓力自行降至零時，慢慢打開排氣閥，排除余氣，開蓋

4、取物。切不可在壓力尚未降低為零時突然打開排氣閥門，以免瓶內(nèi)液體等沖出外溢。,使用方法,用 途,凡耐高溫和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應(yīng)用本法滅菌。,2、紫外線殺菌試驗,原理：通過紫外線的照射，破壞及改變微生物的DNA結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖后代，達(dá)到殺菌的目的。,優(yōu)點(diǎn) 簡單便捷、廣譜高效、無二次污染、便于治理和實現(xiàn)自動化等優(yōu)點(diǎn)。,缺點(diǎn) 穿透能力弱,特 點(diǎn),材 料,普通瓊脂平板 18-24h細(xì)菌培養(yǎng)物 紫外線燈等,方 法,細(xì)菌接種于普通瓊脂平板上 打開皿蓋，放置于紫外燈下約30cm處，用蓋子蓋住半邊做對照，照射半小時后蓋好蓋子。 培養(yǎng),

5、藥物敏感試驗,目前臨床微生物實驗室進(jìn)行藥敏試驗的方法主要有紙片擴(kuò)散法、稀釋法、抗生素濃度法、自動化儀器等,標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（）,原理：將含有定量抗生素的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散，隨著擴(kuò)散距離的增加抗生素的濃度呈對數(shù)減少,在藥物濃度到達(dá)的范圍內(nèi)對此藥敏感的細(xì)菌不能生長而形成透明的抑菌圈，不同細(xì)菌形成的抑菌圈各不相同，抑菌圈的大小反映了測試菌對該藥的敏感程度，并與該藥物對測試菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)。,材 料,菌種：葡萄球菌、大腸桿菌菌液 培養(yǎng)基：水解酪蛋白瓊脂（MH瓊脂） 試劑：各種抗菌藥物紙片（PEN、GEN、STR、CHL),方 法,用滅菌棉試蘸取試驗菌涂抹在MH培養(yǎng)基表面，要均勻涂抹3次，室溫下待干燥 以無菌鑷子(燒灼滅菌，注意鑷子要冷卻）取各抗生素紙片貼于表面 培養(yǎng),各紙片中心距24mm,紙片距平板邊緣