《動物細胞核移植》PPT課件.ppt

1、,目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常在10代以內(nèi)，為什么？,保存10代以內(nèi)的細胞，因為其生物學特性未發(fā)生大的變化，最接近于體內(nèi)組織或細胞的生長特性，很適合用于藥物測試、基因表達等實驗研究。,點擊此處添加標題文字,問題10：為什么對動物細胞進行培養(yǎng)時通常要添加血清？,血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種，是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，其中有些氨基酸動物細胞本身不能合成（稱為必需氨基酸），必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子（如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、類胰島素生長因子等）；血清還含有多種未知的促細胞生長因子、促貼附因

2、子及其他活性物質(zhì)，能促進細胞的生長、增殖和貼附。因此，細胞培養(yǎng)時，要保證細胞能夠順利生長和增殖，一般需添加10%20%的血清。,專題一：,專題,2,動物體細胞核移植技術 和克隆動物,隨著細胞分化程度的提高而逐漸受到限制，全能性表達很難，但細胞核內(nèi)仍含有該物種所需的全套遺傳基因，具有發(fā)育成完整個體的潛能，即細胞核仍具有全能性 條件：只有動物的細胞核是不行的，必須提供促進細胞核表達全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件，去核的卵母細胞是最合適的細胞，因為卵母細胞體積大、易操作，含有促進促進細胞核表達全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件,動物細胞全能性的特點？,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,2.原理:,1.概念：將動物的一

3、個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。,細胞核的全能性,3.核移植種類,（難度高）,受體細胞：M期的卵母細胞,細胞分化程度低，恢復全能性容易,什么是克隆?,就是無性繁殖，具體的說，是指從一個共同的祖先，通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細胞或個體。,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物,細胞質(zhì),細胞核,細胞核移植,多莉羊的培育過程,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,（1）動物的克隆與植物克隆一樣嗎？,（2）用動物體細胞進行克隆的過程,其實際操作過程是什么？,

4、動物克隆過程的實際是細胞核移植,（3）簡述高產(chǎn)牛體細胞核移植過程,思考,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,供體細胞培養(yǎng),（M卵母細胞）,減數(shù)第二次分裂中期,去核的卵母細胞,供體細胞注入去核卵母細胞,受體細胞激活，完成分裂、發(fā)育,胚胎移植,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,供體細胞（供核）,細胞培養(yǎng),體細胞,卵巢卵母細胞（M中期：供質(zhì)）,去核,無核卵母細胞,注入,細胞融合,重組細胞,構(gòu)建重組胚胎,胚胎移植,代孕母體,生出與供體奶牛遺傳基礎相同的犢牛,4.體細胞核移植過程,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,歸納:,（1）共分成兩大階段：,（2）移植過程用到的生物技術：,核移植和胚胎移植,動物

5、細胞培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等,（3）嚴格來說新個體具有兩個親本的性狀,據(jù)上圖思考下列問題：,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細胞的核？,提示：為使核移植的胚胎或動物的遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價值的動物提供的體細胞，在供體細胞的細胞核移至受體細胞之前，必須將受體細胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，想一想，這是為什么？,提示：培養(yǎng)的動物細胞一般當傳代至1050代左右時，部分細胞核型可能會發(fā)生變化，其細胞遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生突變，而10

6、代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細胞核移植中，為了保證供體細胞正常的遺傳基礎，通常采用傳代10代以內(nèi)的細胞。,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,你認為用上述體細胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？,提示：克隆動物絕大部分DNA來自于供體細胞核，但其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細胞。用教材中所述的方法克隆的動物不是供核動物完全相同的復制。此外，即便動物的遺傳基礎完全相同，但動物的一些行為、習性的形成與所處環(huán)境有很大關系，核供體動物生活的環(huán)境與克隆動物所生活的環(huán)境不會完全相同，其形成的行為、習性也不可能和核供

7、體動物完全相同，從這一角度看，克隆動物不會是核供體動物100%的復制。,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,動物克隆實例很多，為何多莉就舉世聞名呢？,在1997年2月英國羅斯林研究所維爾穆特博士科研組公布體細胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎細胞核移植技術已經(jīng)有了很大的發(fā)展。實際上，“多莉”的克隆在核移植技術上沿襲了胚胎細胞核移植的全部過程，但這并不能減低“多莉”的重大意義，因為它是世界上第一例經(jīng)體細胞核移植出生的動物，是克隆技術領域研究的巨大突破。這一巨大進展意味著：在理論上證明了，同植物細胞一樣，分化了的動物細胞核也具有全能性,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,對比多莉羊和課本高產(chǎn)奶牛的

8、克隆過程，找出操作過程的不同點？,多莉克隆過程的受體細胞是去核卵細胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程的受體細胞是去核卵母細胞；多莉克隆過程是將供體細胞核注入受體細胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程是將供體細胞注入受體細胞。,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,討論分析上述哪一種措施更科學？并說明理由？,卵母細胞當中的細胞周期蛋白含量、活性比卵細胞高，用它作受體更容易成功,將供體細胞注入受體細胞，使克隆動物更像供體動物，操作也方便,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,5、體細胞核移植技術的應用前景：,在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進程，促進優(yōu)良畜群的繁育。,在保護瀕危物種方面，可望利用體細胞核移植技術增加動物的存

9、活量。,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,醫(yī)藥衛(wèi)生領域可作為生物反應器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)。,在治療人類疾病時，轉(zhuǎn)基因克隆動物細胞、組織和器官可作為異種移植的供體；人的核移植胚胎干細胞經(jīng)誘導分化，形成相應的組織、器官后，可用于器官移植。,醫(yī)藥衛(wèi)生領域可作為生物反應器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)。,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,1、在動物細胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細胞是 -（ ） A細胞系 B細胞株 C原代細胞 D傳代細胞,2、動物細胞工程技術的基礎是 -（ ） A.動物細胞融合 B.單克隆抗體 C.胚胎移植 D.動物細胞培養(yǎng),A,D,二、動物體細胞核移植技術和克隆

10、動物,3、用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細胞 （ ）A.容易產(chǎn)生各種變異 B具有更強的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力強,D,4、下列屬于動物細胞工程中的工具是（ ） A限制性內(nèi)切酶 BDNA連接酶 C胰蛋白酶 D果膠酶,C,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,5、在動物細胞培養(yǎng)的有關敘述中，正確的是（ ） A動物細胞培養(yǎng)的目的就是為了獲得大量的細胞分泌蛋白 B動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細胞分散 C細胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中 D培養(yǎng)至50代后繼續(xù)傳代的細胞是細胞株,B,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物

11、,6、在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱之為（ ） A原代培養(yǎng) B傳代培養(yǎng) C細胞株 D細胞系,D,7、動物細胞培養(yǎng)的正確過程是（ ） A. 原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞系 B. 原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞系細胞株 C. 傳代培養(yǎng)細胞系原代培養(yǎng)細胞株 D. 原代培養(yǎng)細胞系傳代培養(yǎng)細胞株,A,二、動物體細胞核移植技術和克隆動物,8、下列與動物細胞培養(yǎng)有關的表述中，不正確的是（ ） A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清 B原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯 C動物細胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 D動物細胞培養(yǎng)

12、可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細胞,C,動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng) 基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。 右圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影 響的實驗結(jié)果。從該圖提供的信息可以 獲得的正確結(jié)論有( ) A正常細胞與癌細胞的增殖速率相同 B有無血清對正常細胞培養(yǎng)的影響不同 C培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細胞的 培養(yǎng) D培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞的培 養(yǎng)影響不大,BCD,9、07年江蘇高考題,10、下圖是動物細胞培養(yǎng)的過程示意圖。據(jù)此圖回答。,(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自_。 (2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是_，然后用 酶處理，這是為了使細胞分散開來。這樣做的目的是_. (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行。瓶中的培養(yǎng)基成分有 _ _等。在此瓶中培