帕金森動物模型-推薦課件

1、1,2,3,帕金森及動物模型簡介,帕金森動物模型制備,模型效果評價,目錄,4,帕金森及動物模型簡介,帕金森動物模型制備,模型效果評價,目錄,第一部分,簡介,總體概況,5,帕金森簡介,調(diào)研方法,第一部分,帕金森是繼阿耳茨海默?。ɡ夏臧V呆癥）后第二大普遍的老化大腦的神經(jīng)系統(tǒng)退行性病。 1817年James parkinson描述為震顫麻痹。 引起該疾病運動癥狀主要是因為紋狀體內(nèi)多巴胺減少從而導致黑質(zhì)密致部實質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元逐步衰退。,6,病理,第一部分,PD的癥狀是黑質(zhì)密致部區(qū)域的染色多巴胺分泌細胞減少繼發(fā)分泌的黑色素減少產(chǎn)生的結(jié)果。 PS： 黑質(zhì): 在大腦腳底與中腦被蓋之間有一大的灰質(zhì)團塊是黑

2、質(zhì)，見于中腦全長。黑質(zhì)細胞富含黑 色素，是腦內(nèi)合成多巴胺的主要核團。黑質(zhì)主要與端腦的新紋狀體(尾狀核和殼核)有往返纖維聯(lián)系。由于某些原因使黑質(zhì)細胞變性，多巴胺合成減少，是引起震顫麻痹 (Parkinson病)的主要病因。在正常生理狀態(tài)下，黑質(zhì)是調(diào)節(jié)運動的重要中樞。,7,黑質(zhì)紋狀體,調(diào)研方法,第一部分,紋狀體：殼核和尾狀核通過大量條紋狀細胞橋互相連接，所以得名紋狀體。根據(jù)發(fā)生的早晚可分為新、舊紋狀體，新紋狀體指豆狀核的殼和尾狀核，舊紋狀體指蒼白球，紋狀體屬錐體外系的結(jié)構(gòu)，與骨骼肌的活動有關(guān)。,新紋狀體： 在發(fā)生學上比較年輕，包括尾狀核及殼核，它們起源于端腦。在這兩個神經(jīng)細胞團中，含有大量的小細胞

3、和較少的大細胞。小細胞接受來自大腦皮層各部以及來自丘腦的神經(jīng)，因此，新紋狀體直接受到大腦皮層的影響，而且還間接地受到通過丘腦傳來的小腦以及其它錐體外系的影響。大細胞發(fā)出的傳出纖維到達同側(cè)的蒼白球。目前已知，新紋狀體與維持機體的固定姿勢有關(guān)。大量的臨床病理資料證明，尾狀核頭部的變性、萎縮，可出現(xiàn)舞蹈樣動作（如慢性進行性舞蹈?。粴ず说牟∽儎t與臨床所見的手足徐動癥、肝豆狀核變性、扭轉(zhuǎn)痙攣、舞蹈病等不自主運動有關(guān)。 舊紋狀體： 系指蒼白球。它起源于間腦，進化上比較古老，內(nèi)含大細胞，除接受同側(cè)新紋狀體來的纖維以外，還接受來自丘腦和從大腦皮層來的纖維。由它發(fā)出的纖維主要是蒼白球丘丘腦束，一部分纖維分別向

4、下傳到丘腦底核、黑質(zhì)。舊紋狀體被視為錐體外系中的一個重要傳出中間站。已經(jīng)證明，蒼白球的功能與肢體的肌張力姿勢反射有關(guān)。帕金森病患者到了中晚期幾乎都有蒼白球的變性。,8,癥狀,調(diào)研方法,第一部分,PD可見兩種癥狀 1、非運動癥狀 情緒障礙 認識障礙 睡眠障礙 感覺障礙,2、運動癥狀 震顫 僵直 運動過慢/運動不能 姿勢不穩(wěn)定 其他癥狀包括 步態(tài)和姿勢障礙 拖著腳走 慌張步態(tài) 步態(tài)凍結(jié)（無法移動） 語言和吞咽障礙 發(fā)聲過弱 語言倉促 流涎 吞咽困難,9,帕金森模型簡介,調(diào)研方法,第一部分,帕金森動物模型分類 魚藤酮 優(yōu)點：1、發(fā)病因素與流行病學相符 2、復制了PD患者大多數(shù)LB的形成運動及病理特征

5、 缺點：1、非特異性損傷及外周器官毒性 2、存活率低 機制：氧化損傷 方法：大鼠顱內(nèi)注射12ug/只（黑質(zhì)） MPTP 缺點：1、制劑依賴型可逆模型 2、必須依賴左旋多巴存活 機制：MPTP在黒質(zhì)細胞內(nèi)脫氫生成MPP+離子， 這種離子抑制線粒體復合酶，使該細胞死亡 6-OHDA 機制：引起特異性幾茶酚胺能神經(jīng)元退行性變 方法：1、雙側(cè)注射： 優(yōu)點：成功率高 缺點：往往因吞咽障礙、缺乏渴感、運動不能而死亡 2、單側(cè)注射： 成功率：16ug8ug Bregma向后3.7mm和4.4mm, 中線往右1.7mm和1.2mm，Bregma向下7.5mm； 3、利用定位儀找到要注射6-OHDA的位置，用M

6、arker筆或定位針在顱骨上做好標記； 4、小心地用顱骨鉆頭（或牙科鉆）在注射位點處輕磨顱骨，將顱骨慢慢打薄，當顱骨出現(xiàn)裂縫的時候（至硬腦膜），用醫(yī)用注射器的針頭小心挑破，防止損傷，如果在此過程中有出血，可以用很小的醫(yī)藥棉球拉成長條形將血吸走，鉆孔時一定要控制好，否則很容易在鉆通顱骨后一不小心鉆頭進入腦組織，造成嚴重損傷,6-OHDA注射,第二部分,6. 6-OHDA注射 1) 用PBS沖洗微量注射器(5l規(guī)格)3-5次； 2) 4ug/ul 6-OHDA溶解于0.2%Vc（必須當天配置）， 3) 將微量注射泵，微量注射器組裝好，置于鉆好的孔上方，針尖與顱骨平行(Z=0)，微調(diào)注射器位置使之與

7、之前鉆孔時位置相同； 4) 根據(jù)定好的深度將注射針緩慢下降 以0.05l/min的速度注射6-OHDA，每點注射3ul 注射完畢后，將注射針停留在注射位置5min待6-OHDA擴散，然后緩慢提針4mm，繼續(xù)留針5min后緩慢退針 7) 用PBS清洗微量注射器5次備用； 8) 注意注射過程中若有出血立刻用棉簽吸走，以免帶出6-OHDA,縫合抗感染,第二部分,7、縫合 定位注射后縫合頭皮，即可完成腦立體定位注射。 8、術(shù)后抗感染 先鋒v50mg/kg 肌肉注射或慶大霉素2ml，兌100ml鹽水中，每只大鼠0.5m,22,模型制作,第二部分,模型 效果評價,第三部分,建議總結(jié),Proposals,23,效果評價,第