儀器分析法：紫外可見(jiàn)分光光度法.ppt

1、儀器分析法紫外可見(jiàn)分光光度法,Contents：,概述generalization,光的吸收定律朗伯比爾定律,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),分光光度法分析條件的選擇,4,1,2,3,2.1 概述generalization,分光光度法是基于物質(zhì)分子對(duì)光的選擇性吸收而建立起來(lái)的分析方法。按物質(zhì)吸收光的波長(zhǎng)不同，可分為可見(jiàn)分光光度法、紫外分光光度法及紅外分光光度法。 特點(diǎn)： *靈敏度較高，適用于微量組分的測(cè)定。但相對(duì)誤差較大。 *具有操作方便、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、靈敏度和選擇性較好等優(yōu)點(diǎn)，為常規(guī)的儀器分析方法。,紫外可見(jiàn)分光光度法的局限性: (Disadvantage of UV-Vis Spectrophoto

2、meters) 有些有機(jī)化合物在紫外可見(jiàn)光區(qū)沒(méi)有吸收譜帶,更有個(gè)別的化合物紫外可見(jiàn)吸收光譜圖大致相似。所以根據(jù)紫外可見(jiàn)光譜圖不能完全決定這些物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)。,一分子吸收光譜 (molecular absorption spectrum) 在分子中存在著電子的運(yùn)動(dòng)，以及組成分子的各原子間的振動(dòng)和分子作為整體的轉(zhuǎn)動(dòng)。分子的總能量可以認(rèn)為等于這三種運(yùn)動(dòng)能量之和。即： E分子= E電子+ E振動(dòng)+ E轉(zhuǎn)動(dòng) 如果用 E電子， E振動(dòng)以及E轉(zhuǎn)動(dòng)表示各能級(jí)差，則： E電子 E振動(dòng)E轉(zhuǎn)動(dòng),由分子中的電子能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷產(chǎn)生的光譜分別稱(chēng)為電子光譜、振動(dòng)光譜和轉(zhuǎn)動(dòng)光譜。其對(duì)應(yīng)的波譜區(qū)范圍如下： Ee

3、Ev Er 電子光譜 振動(dòng)光譜 轉(zhuǎn)動(dòng)光譜 紫外可見(jiàn)光 近紅外、中紅外區(qū) 遠(yuǎn)紅外、微波區(qū),由于分子選擇性的吸收了某些波長(zhǎng)的光，所以這些光的能量就會(huì)降低，將這些波長(zhǎng)的光及其所吸收的能量按一定順序排列起來(lái)，就得到了分子的吸收光譜。,了解紫外可見(jiàn)吸收光譜圖： 最大吸收峰： 最大吸收波長(zhǎng) 次峰： 最小吸收波長(zhǎng) 末端吸收,二有機(jī)化合物的紫外可見(jiàn)吸收光譜 UV-Vis absorption spectrum of organic compounds 與紫外-可見(jiàn)吸收光譜有關(guān)的電子有三種，即形成單鍵的電子、形成雙鍵的電子以及未參與成鍵的n電子(孤對(duì)電子）。 躍遷類(lèi)型有： *、n * 、 *、 n * 四種。,

4、有機(jī)分子能級(jí)躍遷 有機(jī)分子包括: 成鍵軌道 、 ； 反鍵軌道 *、* 非鍵軌道 n 例如 CH2O分子的軌道：,1、飽合有機(jī)化合物的電子躍遷類(lèi)型為*，躍遷所需的能量最大，吸收峰一般出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)，吸收峰低于200nm，實(shí)際應(yīng)用價(jià)值不大。如乙烷的最大吸收峰在135nm處。,2、n* 躍遷，所需的能量比*躍遷所需的能量少，吸收光譜的波長(zhǎng)一般在150250nm處。一般發(fā)生在有機(jī)化合物中的H被雜原子取代后的產(chǎn)物中，如碘代乙烷的吸收峰在259nm處。 這種能使吸收峰向長(zhǎng)波方向移動(dòng)而產(chǎn)生紅移現(xiàn)象的原子團(tuán)稱(chēng)為助色團(tuán)。 紅移與藍(lán)移在有機(jī)化合物中，常常由于取代基的變更或溶劑的改變，使化合物的最大吸收包產(chǎn)發(fā)生移動(dòng)

5、，向長(zhǎng)波方向移動(dòng)稱(chēng)為紅移動(dòng)，向短波方向移動(dòng)稱(chēng)為藍(lán)移。,3、不飽和有機(jī)化合物的電子躍遷類(lèi)型為n*，* 躍遷，所需的能量較低，吸收峰一般大于200nm。 這兩類(lèi)躍遷都要求有機(jī)化合物的分子中含有不飽和鍵的官能團(tuán)，這種含有不飽和鍵的基團(tuán)稱(chēng)為生色團(tuán)。,在以上幾種躍遷中，只有-*和n-*兩種躍遷的能量小，相應(yīng)波長(zhǎng)出現(xiàn)在近紫外區(qū)甚至可見(jiàn)光區(qū)，且對(duì)光的吸收強(qiáng)烈，是我們研究的重點(diǎn)。,4.無(wú)機(jī)化合物的紫外-可見(jiàn)吸收光譜 主要有兩種方式： （1）電荷遷移躍遷 電荷在配合物的中心離子與配位體之間進(jìn)行躍遷（及配合物內(nèi)在的氧化還原反應(yīng)）。 （2）配位場(chǎng)躍遷對(duì)于過(guò)渡金屬元素而言，核外層的電子可以在不同的能級(jí)軌道間躍遷，如f

6、-f;d-d躍遷。,5.影響紫外可見(jiàn)吸收光譜的因素 影響：譜帶位移；譜帶強(qiáng)度的變化等。 譜帶位移：表現(xiàn)為物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)發(fā)生移動(dòng)，包括有紅移和藍(lán)移。 譜帶強(qiáng)度的變化：包括增色效應(yīng)（吸收強(qiáng)度增加）與減色效應(yīng)（吸收強(qiáng)度減?。?。,影響的因素： （1）共軛效應(yīng)的影響 A：電子共軛體系增大，最大吸收波長(zhǎng)紅移，吸收強(qiáng)度也增加。這是由于共軛效應(yīng)，使得電子離域到多個(gè)原子之間，導(dǎo)致-*躍遷能量降低。同時(shí)躍遷的幾率也增大，則吸收強(qiáng)度也隨之增大。 B 空間阻礙使共軛體系破壞，最大吸收波長(zhǎng)藍(lán)移，吸收強(qiáng)度減小。,（2）取代基的影響 （3）溶劑的影響 A 溶劑的極性不同往往會(huì)引起某些化合物吸收光譜的紅移或藍(lán)移。 B 溶

7、劑的酸度影響 對(duì)于具有酸堿性的被測(cè)物質(zhì)，溶劑的pH變化，則溶質(zhì)的存在形式也發(fā)生變化，使分子中共軛效應(yīng)發(fā)生改變，則使吸收紅移或藍(lán)移。,C 極限波長(zhǎng) 作為溶劑，在遠(yuǎn)紫外區(qū)都有吸收，而測(cè)量通常是在近紫外和可見(jiàn)區(qū)，所以溶劑的吸收對(duì)溶質(zhì)不產(chǎn)生影響，但如果測(cè)定是在溶劑的極限波長(zhǎng)以下，則溶劑本身的吸收將影響測(cè)定。因此，測(cè)定只能在溶劑的極限波長(zhǎng)以上進(jìn)行。,2.2 光的吸收定律Lambert-beer定律 Light absorption law- Lambert-beer law,光的選擇性吸收與物質(zhì)顏色的關(guān)系： 1可見(jiàn)光的顏色和互補(bǔ)色： 在可見(jiàn)光范圍內(nèi)，不同波長(zhǎng)的光的顏色是不同的。平常所見(jiàn)的白光（日光、白熾

8、燈光等）是一種復(fù)合光，它是由各種顏色的光按一定比例混合而得的。利用棱鏡等分光器可將它分解成紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等不同顏色的單色光。,白光除了可由所有波長(zhǎng)的可見(jiàn)光復(fù)合得到外，還可由適當(dāng)?shù)膬煞N顏色的光按一定比例復(fù)合得到。能復(fù)合成白光的兩種顏色的光叫互補(bǔ)色光。 2、物質(zhì)的顏色與吸收光的關(guān)系：當(dāng)白光照射到物質(zhì)上時(shí)，如果物質(zhì)對(duì)白光中某種顏色的光產(chǎn)生了選擇性的吸收，則物質(zhì)就會(huì)顯示出一定的顏色。物質(zhì)所顯示的顏色是吸收光的互補(bǔ)色。,物質(zhì)的顏色與光的關(guān)系,完全吸收,完全透過(guò),吸收黃色光,光譜示意,表觀現(xiàn)象示意,復(fù)合光,黑色,白色,藍(lán)色,單色光(monochromatic light)只具有一種波長(zhǎng)的光。

9、混合光 由兩種以上波長(zhǎng)組成的光。 白光 是由紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等各種色光按一定比例混合而成的。 物質(zhì)的顏色 是由于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光具有選擇性的吸收作用而產(chǎn)生的。,一、朗伯比爾定律Lambert-beer law,透光率 （透射比）Transmittance,透光率定義：,T 取值為0.0 % 100.0 %,全部吸收,T = 0.0 %,全部透射,T = 100.0 %,透光度、吸光度與溶液濃度及液層寬度的關(guān)系 （2-2） 溶液濃度與寬度的乘積與吸光度成正比，以上兩式中k是比例系數(shù)，與入射光波長(zhǎng)、溶液的性質(zhì)及溫度有關(guān)。,朗伯-比爾定律(A=Kbc)中的系數(shù)(K)因濃度(c)所取的單位

10、不同，有兩種表示方式：,當(dāng)c的單位為gL-1 b的單位為cm時(shí)，k以a表示，稱(chēng)為吸光系數(shù)(absorption coefficient)，其單位為L(zhǎng)g-1cm-1，此時(shí)式（2-2）變?yōu)?c的單位為molL-1 b的單位為cm 這時(shí)k常用 表示。稱(chēng)為摩爾吸光系數(shù)(molar absorptivity)，其單位為L(zhǎng)mol-1cm-1 A=bc,例 題：,用鄰二氮菲分光光度法測(cè)鐵。已知溶液中Fe2+的濃度為500 g L-1 ，液層厚度為2cm，在508nm處測(cè)得透射比為0.645。 計(jì)算：吸光系數(shù) a、摩爾吸收系數(shù) (MFe=55.85 g mol-1),解：,A= - lgT= - lg0.64

11、5 = 0.190（三位有效數(shù)字） c = 500 g L-1 =5.0010-4 g L-1 b=2cm,定量分析時(shí)，通常液層厚度是相同的，按照比爾定律，濃度與吸光度之間的關(guān)系應(yīng)該是一條通過(guò)直角坐標(biāo)原點(diǎn)的直線(xiàn)。但在實(shí)際工作中，往往會(huì)偏離線(xiàn)性而發(fā)生彎曲。若在彎曲部分進(jìn)行定量，將產(chǎn)生較大的測(cè)定誤差,二 偏離朗伯一比爾定律的因素,朗伯一比爾定律只對(duì)一定波長(zhǎng)的單色光才能成立，但在實(shí)際工作中，即使質(zhì)量較好的分光光度計(jì)所得的入射光，仍然具有一定波長(zhǎng)范圍的波帶寬度。在這種情況下，吸光度與濃度并不完全成直線(xiàn)關(guān)系，因而導(dǎo)致了對(duì)朗伯一比爾定律的偏離。所得入射光的波長(zhǎng)范圍越窄，即“單色光”越純，則偏離越小。,（一

12、）非單色光所引起的偏離,（二）非吸收作用引起的偏離,非吸收作用引起的對(duì)朗伯一比爾定律的偏離，主要有散射效應(yīng)和熒光效應(yīng)，一般情況下熒光效應(yīng)對(duì)分光光度法產(chǎn)生的影響較小。 散射效應(yīng)：朗伯一比爾定律只適用于十分均勻的吸收體系。當(dāng)待測(cè)液的體系不是很均勻時(shí)，入射光通過(guò)待測(cè)液后將產(chǎn)生光的散射而損失，導(dǎo)致吸收體系的透過(guò)率減小，造成實(shí)測(cè)吸光值增加,朗伯比爾定律是建立在均勻、非散射的溶液這個(gè)基礎(chǔ)上的。如果介質(zhì)不均勻，呈膠體、乳濁、懸浮狀態(tài)，則入射光除了被吸收外，還會(huì)有反射、散射的損失，因而實(shí)際測(cè)得的吸光度增大，導(dǎo)致對(duì)朗伯比爾定律的偏離,熒光效應(yīng): 當(dāng)入射光通過(guò)待測(cè)液，若吸光物質(zhì)分子吸收輻射能后所產(chǎn)生的激發(fā)態(tài)分子以

13、發(fā)射輻射能的方式回到基態(tài)而發(fā)射熒光，結(jié)果必然使待測(cè)液的透光率相對(duì)增大，造成實(shí)測(cè)吸光值減小。,溶質(zhì)的離解、締合、互變異構(gòu)及化學(xué)變化也會(huì)引起偏離。其中有色化合物的離解是偏離朗伯比爾定律的主要化學(xué)因素。例如，顯色劑KSCN與Fe3+形成紅色配合物Fe(SCN)3，存在下列平衡： Fe(SCN)3 Fe3+3SCN,（三）化學(xué)反應(yīng)引起的偏離,溶液稀釋時(shí)，上述平衡向右，離解度增大。所以當(dāng)溶液體積增大一倍時(shí)，F(xiàn)e(SCN)3的濃度不止降低一半，故吸光度降低一半以上，導(dǎo)致偏離朗伯比爾定律。,2.3 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) UV-Vis Spectrophotometers,一、基本組成 general proc

14、ess,光源,單色器,樣品室,檢測(cè)器,顯示,1. 光源 在整個(gè)紫外光區(qū)或可見(jiàn)光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的使用壽命。,可見(jiàn)光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長(zhǎng)范圍在3202500 nm。 紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射180375 nm的連續(xù)光譜。,2.單色器,將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng)。 入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器； 準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束 色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡或光柵 聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫； 出射狹縫。,3.樣品室,樣品室放置各種類(lèi)型的吸收池（比色皿）

15、和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見(jiàn)區(qū)一般用玻璃池。 4.檢測(cè)器 利用光電效應(yīng)將透過(guò)吸收池的光信號(hào)變成可測(cè)的電信號(hào)，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。,5. 結(jié)果顯示記錄系統(tǒng) 檢流計(jì)、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理,二、分光光度計(jì)的類(lèi)型 types of spectrometer,1.單光束 簡(jiǎn)單，價(jià)廉，適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性。,2.雙光束 自動(dòng)記錄，快速全波段掃描?？上庠床环€(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價(jià)格較高。,三、儀器的主要性

16、能指標(biāo),1、光度的準(zhǔn)確度：是指樣品在最大吸收波長(zhǎng)處吸光度的測(cè)量值與真實(shí)值間的偏差，該偏差越小，說(shuō)明儀器的準(zhǔn)確度越高。 國(guó)際上通常采用吸光度的準(zhǔn)確度來(lái)表示儀器的光度準(zhǔn)確度，常用酸性重鉻酸鉀法進(jìn)行檢測(cè)。 2、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度：是指儀器指示器上所指示的波長(zhǎng)與實(shí)際所輸入的波長(zhǎng)值之間的符合程度，常用波長(zhǎng)誤差來(lái)表示。 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度常用稀土玻璃進(jìn)行檢測(cè)。,3、雜散光：是分光光度法測(cè)量中的主要誤差來(lái)源。 4、分辨率：指儀器對(duì)相鄰兩吸收帶可分辨的最小波長(zhǎng)的間隔能力。 5、光譜帶寬：是指從單色器射出的單色光最大強(qiáng)度的1/2處的譜帶寬度。 6、基線(xiàn)穩(wěn)定度與平直度：指儀器在不放置樣品時(shí)掃描100%T線(xiàn)和0%T線(xiàn)時(shí)讀數(shù)偏離的程

17、度或基線(xiàn)彎曲的程度。,2.4 紫外可見(jiàn)分光光度法分析條件的選擇,一、溶劑選擇的原則： 1、不與被測(cè)組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng) 2、所選溶劑在測(cè)定波長(zhǎng)范圍內(nèi)無(wú)明顯吸收 3、對(duì)被測(cè)組分有較好的溶解能力 4、被測(cè)組分在所選的溶劑中有較好的峰形,二、測(cè)量條件的選擇 1、入射波長(zhǎng)的選擇：通常是根據(jù)被測(cè)組分的吸收光譜，選擇最強(qiáng)吸收帶的最大吸收波長(zhǎng)為入射波長(zhǎng)。當(dāng)最強(qiáng)吸收峰的峰形比較尖銳時(shí)，往往選用吸收稍低，峰形稍平坦的次強(qiáng)峰進(jìn)行測(cè)定。 2、狹縫寬度的選擇：為了選擇合適的狹縫寬度，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)試樣的吸光度不再增加為準(zhǔn)。一般來(lái)說(shuō)，狹縫寬度大約是試樣吸收峰半寬度的十分之一。,3、吸光度測(cè)量范圍的選擇： 由朗伯-比爾定

18、律可知： A=lg1/T=cl 微分后得： dlgT=0.4343dT/T= -ldc 或 0.4343T/T= -lc 代入朗伯-比爾定律有： c/c=0.4343T/TlgT 要使測(cè)定的相對(duì)誤差c/c最小，求導(dǎo)取極小得出： lgT=-0.4343=A 即當(dāng)A=0.4343時(shí)，吸光度測(cè)量誤差最小。 最適宜的測(cè)量范圍為0.20.8之間。,4、參比溶液的選擇： 測(cè)定試樣溶液的吸光度，需先用參比溶液調(diào)節(jié)透光度（吸光度為0）為100%，以消除其它成分及吸光池和溶劑等對(duì)光的反射和吸收帶來(lái)的測(cè)定誤差。 參比溶液的選擇視分析體系而定，具體有： （1）溶劑參比 試樣簡(jiǎn)單、共存其它成分對(duì)測(cè)定波長(zhǎng)吸收弱，只考慮

19、消除溶劑與吸收池等因素； （2）試樣參比 如果試樣基體溶液在測(cè)定波長(zhǎng)有吸收，而顯色劑不與試樣基體顯色時(shí)，可按與顯色反應(yīng)相同的條件處理試樣，只是不加入顯色劑。,（3）試劑參比 如果顯色劑或其它試劑在測(cè)定波長(zhǎng)有吸收，按顯色反應(yīng)相同的條件，不加入試樣，同樣加入試劑和溶劑作為參比溶液。 （4）平行操作參比 用不含被測(cè)組分的試樣，在相同的條件下與被測(cè)試樣同時(shí)進(jìn)行處理，由此得到平行操作參比溶液。,三、反應(yīng)條件的選擇： 對(duì)多種物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，常利用顯色反應(yīng)將被測(cè)組分轉(zhuǎn)變?yōu)樵谝欢úㄩL(zhǎng)范圍有吸收的物質(zhì)。常見(jiàn)的顯色反應(yīng)有配位反應(yīng)、氧化還原反應(yīng)等。,顯色劑,這種被測(cè)元素在某種試劑的作用下，轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)叫顯色

20、反應(yīng)（color reaction），所加入試劑稱(chēng)為顯色劑(color reagent)。,（一）、選擇顯色劑的一般原則： 選擇性好 所用的顯色劑僅與被測(cè)組分顯色而與其它共存組分不顯色，或其它組分干擾少。 靈敏度要足夠高 有色化合物有大的摩爾吸光系數(shù)，一般應(yīng)有104105數(shù)量級(jí)。 有色配合物的組成要恒定 顯色劑與被測(cè)物質(zhì)的反應(yīng)要定量進(jìn)行，生成有色配合物的組成要恒定。,生成的有色配合物穩(wěn)定性好 即要求配合物有較大的穩(wěn)定常數(shù)，有色配合物不易受外界環(huán)境條件的影響，亦不受溶液中其它化學(xué)因素的影響。有較好的重現(xiàn)性，結(jié)果才準(zhǔn)確 色差大 有色配合物與顯色劑之間的顏色差別要大，這樣試劑空白小，顯色時(shí)顏色變化才

21、明顯。,（二）、顯色反應(yīng)條件的選擇 溶液的酸度 許多顯色劑都是有機(jī)弱酸或有機(jī)弱堿，溶液的酸度會(huì)直接影響顯色劑的解離程度。（例如二甲酚橙） 對(duì)某些能形成逐級(jí)配合物的顯色反應(yīng)，產(chǎn)物的組成會(huì)隨介質(zhì)酸度的改變而改變，從而影響溶液的顏色。 另外，某些金屬離子會(huì)隨著溶液酸度的降低而發(fā)生水解，甚至產(chǎn)生沉淀，使穩(wěn)定性較低的有色配合物的解離。,顯色溫度 有些反應(yīng)需要加熱。有些顯色劑或有色配合物在較高溫度下易分解褪色。此外溫度對(duì)光的吸收及顏色深淺也有影響，要求標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測(cè)溶液在測(cè)定過(guò)程中溫度一致。 顯色時(shí)間 顯色反應(yīng)有快慢，有的有色配合物容易褪色，因此不同的顯色反應(yīng)需放置不同的時(shí)間，并在一定的時(shí)間范圍內(nèi)進(jìn)行比色

22、測(cè)定。,四、干擾及消除方法 常用的消除干擾的方法： 1、控制酸度：提高反應(yīng)的選擇性 2、加入掩蔽劑：使其只與干擾離子反應(yīng)生成不干擾測(cè)定的配合物。 3、改變干擾離子的價(jià)態(tài)：消除共存組分的干擾 4、改變測(cè)定波長(zhǎng) 5、分離干擾離子,2.5 測(cè)定方法及其應(yīng)用,一、一般定性分析及應(yīng)用 （一）、有機(jī)化合物的鑒定 先掃描未知化合物的吸收光譜，然后根據(jù)其吸收光譜的特征（吸收峰的數(shù)目、形狀、位置、相對(duì)強(qiáng)度）與相同條件下掃描得到的已知純化合物的吸收光譜進(jìn)行比較而定性。 （二）、有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)的分析 先將化合物的紫外可見(jiàn)吸收光譜掃描出來(lái)，然后根據(jù)其吸收譜帶及最大吸收波長(zhǎng)處吸收值的大小，可推斷出該化合物的主要基團(tuán)及其所在位置。,（三）、化合物純度的檢驗(yàn) 將純化合物的吸收光譜與含雜質(zhì)化合物的吸收光譜進(jìn)行比較，根據(jù)兩者吸收光譜的差異進(jìn)行純度檢驗(yàn)。對(duì)雜質(zhì)檢驗(yàn)的靈敏度取決于化合物與雜質(zhì)間吸收系數(shù)的差異。,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法 其方法是先配制一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用選定的顯色劑進(jìn)行顯色，在一定波長(zhǎng)下分別測(cè)定它們的吸光度A。以A為縱坐標(biāo)，濃度c為橫坐標(biāo)，繪制A-c曲線(xiàn)，若符合朗伯比爾定律，則得到一條通過(guò)原點(diǎn)的直線(xiàn)，稱(chēng)為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。然后用完全相同的方法和步驟測(cè)定被測(cè)溶液的吸光度，便可從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上找出對(duì)應(yīng)的被測(cè)溶液濃度或含量，這就是標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)