口腔生物學重點

1、第一章 口腔微生物學（4T）1. 生態(tài)系及其建立的中心原則。（p1）生態(tài)系定義：生物之間、生物與其環(huán)境之間的相互關系稱為生態(tài)系（ ecosystem ）生態(tài)系建立的中心原則是生物體對其賴以生存環(huán)境有影響，例如：最先定植的菌種為先鋒菌，先鋒菌定植后改變了環(huán)境，給后繼定制的細菌創(chuàng)造了定植的條件，是只能存活于新的環(huán)境中。（先鋒菌定植環(huán)境改變12h后二次細菌定植達到動態(tài)平衡形成新的生態(tài)系）（環(huán)境變化物種影響適者生存環(huán)境變化） 不適者淘汰2. 正常菌叢對機體的雙重作用。（p2）（有益）在一定環(huán)境中，當機體與正常菌叢之間保持著相互平衡的狀態(tài)時，正常菌叢顯示對宿主起著有益的作用；（有害）但當環(huán)境中的某些因素

2、干擾了這個平衡狀態(tài)時，如放射線照射，過量激素的應用，抗生素的長期使用等而導致菌群失調(diào)，這就為正常菌群提供了顯示其有害作用的機會，這些原來無致病性的或毒力很弱的細菌，遂成為機會致病菌而引起內(nèi)源性感染疾病，如：長期服用抗生素所致的葡萄球菌假膜腸炎，口腔中的念珠菌病。3. 口腔生態(tài)系的決定因素。（p2）口腔生態(tài)系決定因素定義：決定不同微生物能在不同口腔生態(tài)系中生存的因素稱為（一）物理化學因素a溫度一般細菌可在-5 55 環(huán)境中生存口腔食品溫度變化幅度 60 嗜冷菌 45 嗜溫菌 25 37 b氧張力絕對需氧菌Obligate aerobes 兼性厭氧菌facultative anaerobes絕對厭

3、氧菌Obligate anaerobes 耐氧厭氧菌aerotolerant anaerobes微嗜氧菌microaerophiles dpH：氫離子濃度反映為pH值口腔pH以唾液為代表5.08.0 e營養(yǎng)物質的利用唾液 齦溝液 血素(hemin) 牙齦卟啉菌生長酶類 透明質酸酶，蛋白酶等（二） 宿主因素（唾液和齦溝液）a 抗體 唾液中主要為sIgA 齦溝液中主要為IgG b 蛋白質 糖蛋白 粘蛋白 富脯蛋白 富酪蛋白 過氧化物酶 乳鐵蛋白溶菌酶（唾液功能：潤滑 維持口腔粘膜完整性 軟組織修復 維持生態(tài)平衡 凝集作用 抗菌作用）（三） 細菌因素a 細菌附著（鈣橋學說，識別系統(tǒng)學說） 1. 粘附

4、(attachment) 2. 細菌間作用 聚集（aggregation） 共聚集（co-aggregation）b細菌間作用（四）宿主可控制因素飲食習慣：糖消耗頻率、量、消耗方式口腔衛(wèi)生：機械去除及自身口腔衛(wèi)生4. 與口腔疾病相關的兩種主要菌種的生物學特征和致病性?？谇痪鷮伲浩咸亚蚓鷮?Staphylococcus) 口腔球菌屬(Stomatococcus)鏈球菌屬(Streptococcus) 奈瑟球菌屬(Neisseria) 韋榮球菌屬(Veillonella) 放線菌屬(Actinomyces) 消化球菌屬(Peptococcus)和消化鏈球菌屬(Peptostreptococcus)

5、 優(yōu)桿菌屬(Eubacterium) 丙酸桿菌屬(Propionibacterium)舉例：變形鏈球菌群（1）生物學特性：直徑0.61.0m，G+球菌，鏈狀排列，屬微需氧菌或兼性厭氧菌，人類口腔為變鏈菌和遠緣鏈球菌。（2）致病性：A、胞壁表面物質利于細菌粘附；B、菌群產(chǎn)酶在糖代謝中起主導作用；C、菌群產(chǎn)酸可使釉質脫礦。因此認為是主要致齲菌。 血鏈球菌：（1）生物學特性:直徑0.81.2m，球形G+球菌，呈長鏈狀排列，多為溶血型，能產(chǎn)生過氧化氫（2）致病性：取初定植在牙菌斑中先鋒菌，能利用蔗糖合成胞外多糖，對細菌生態(tài)連續(xù)起重要作用。第二章 口腔生物化學（4T）1. 唾液的診斷作用（簡述）。（p5

6、4）A.1-診斷口腔疾?。簭桶l(fā)性腮腺炎、齲病、牙周病2-全身性疾?。篠jogren、糖尿病、乙肝、甲肝、HIV、口腔癌、細菌性陰道病、乳腺癌3-藥物監(jiān)測：酒精、咖啡因、苯丙胺、鴉片類4-測定激素水平：類固醇激素分析5-體內(nèi)環(huán)境毒物：汞、鉛中毒 2. 試述菌斑牙面礦物質轉換與PH的關系。（p69）（菌斑與牙面間礦物質轉換是在菌斑液中進行的菌斑礦物質高于唾液 1、菌斑是一種離子屏障，阻擋離子擴散 2、菌斑中礦物質與蛋白質結合 3、菌斑細菌可結合一些離子 4、菌斑中礦物質多以磷酸鹽形式存在 如：羥磷灰石、氟磷灰石，PH值可調(diào)節(jié)磷酸鹽存在形式）A菌斑pH與齲病ph降低牙釉質溶解上升ph上升牙釉質溶解下

7、降在菌斑釉質界面，隨著PH的變化不斷進行磷灰石溶解，再沉積，如：長期的PH值低狀態(tài)，即長期受到酸的攻擊，則溶解再沉積不再完全可逆，導致鈣、磷流失，最后表層破壞，細菌入侵最后形成齲病。 B. 菌斑pH與牙結石 菌斑內(nèi)磷灰石晶體的溶解性變化可歸納為： 正常穩(wěn)定 ph降低磷灰石溶解上升ph上升磷灰石溶解下降 牙石形成機制尚不清楚，唾液和齦溝液礦物質是菌斑無機物的主要來源，菌斑基質可濃縮唾液的鈣磷，在高PH時形成磷酸鈣晶體，導致菌斑鈣化，形成牙石，分為齦上牙石，齦下牙石。3. 試述氟對牙齒發(fā)育的影響。（p75）A.氟在生物礦化中的作用(增加晶體結構的穩(wěn)定性)降低牙釉質的溶解性增加晶體結構的穩(wěn)定性 改善

8、牙的形態(tài)發(fā)育增強釉質晶體的防齲能力 促進牙釉質再礦化 影響發(fā)育期釉質晶體的礦化B.氟對釉質晶體形成影響: 1、影響基質蛋白的合成、分泌2、阻礙釉原蛋白的移除3、干擾釉質晶體礦化 氟本身可加速鈣離子向釉質晶體沉積，但過量的氟，使局部釉質晶體出現(xiàn)過度礦化,在過度礦化區(qū)周圍，鈣離子顯著降低，基質礦化停滯，晶體形態(tài)異常。而且過度礦化不可逆轉。不能形成正常釉柱，排列方向異常.4. 試述口腔生物化學研究中鈣測定方法及原則。(p77)A. 方法：1MTB（甲基麝香草酚藍法）原理：甲基麝香草酚藍與鈣形成深藍色甲基麝香草酚藍鈣復合物，可用比色計直接測定 (在試劑中加入8-羥基奎寧以去除鎂的干擾，同時試劑中加入少

9、量的EDTA作掩蔽劑，消除試驗器皿和試劑中的鎂污染。試劑（顯色基礎液、MTB試劑、反應液、鈣標準存儲液、鈣標準應用液） 測定步驟 5葡萄糖代謝的四種途徑比較：第三章 口腔疾病分子生物學(6T)（重點基因表達這部分）1. 聚合酶鏈反應（PCR）的原理是什么？（p104）聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction , PCR）是體外擴增DNA序列的技術。原理：DNA的合成是以一股DNA單鏈為模板，在引物（primer）的存在下，DNA多聚酶沿模板以53方向延伸引物的過程。PCR是利用DNA合成的原理，合成兩個與靶DNA兩側序列互補的引物，在體外進行靶DNA的重復合成。PCR

10、擴增包括三個步驟：1、 DNA變性 ：通過加熱使靶DNA雙鏈解離成兩條單鏈。2、 引物與靶DNA退火：降低溫度至適當水平，促使兩個引物根據(jù)堿基互補的原理分別結合至靶DNA兩條鏈的3末端。3、 引物延伸： 在DNA聚合酶催化下，引物沿著靶DNA 3末端向 5末端延伸。 2. 哪些基因突變可引起釉質發(fā)育不全和牙本質發(fā)育不全？ （p109）釉質發(fā)育不全：AMEL基因。ENAM基因，MMP20 KLK4。 牙本質發(fā)育不全：DPP與DSP，DSPP（牙本質涎磷蛋白基因）：牙本質基質蛋白（DMP1）骨涎蛋白（BSP）骨鈣素 多組織非特異性蛋白（PGs、OPN）3. 乳光牙本質的致病基因情況（p125）牙本

11、質發(fā)育不全（DGI）DGI-I：全身廣泛的I型膠原突變DGI-：傳統(tǒng)所指遺傳性乳光牙本質DGI-：特殊遺傳乳光牙本質 型牙本質發(fā)育不全，為獨立發(fā)生在牙本質的發(fā)育異常，患牙表現(xiàn)為不透明的灰蘭色，表層釉質由于缺乏內(nèi)層牙本質支持，易折斷脫落，牙本質也很快磨損，牙冠變短，髓腔變窄或閉塞，X線顯示根管變窄或消失，易發(fā)根折或根尖周炎。是染色體4q21附近DSPP基因突變引起的，這種病變可同時伴有漸進性高頻耳聾。4. 牙本質有機成分中膠原和非膠原蛋白的特點是什么？（p112）牙本質有機物分類膠原 牙本質特異性蛋白（牙本質磷蛋白，牙本質涎蛋白） 成牙本質細胞源性 礦化組織特異性蛋白（骨涎蛋白，骨鈣素，牙本質基

12、質蛋白1） 非膠原蛋白 多組織非特異性蛋白（骨橋素，糖胺多糖） 非成牙本質細胞源性 IgG，白蛋白，a2HS糖蛋白A 膠原由成牙本質細胞分泌，新分泌的膠原為未礦化蛋白，緊貼成牙本質細胞層，隨著細胞不斷分泌基質，成牙本質細胞不斷后退，數(shù)小時后膠原已距牙本質細胞層約1015m.并開始礦化。因此牙本制裁的形成過程就是新生牙本質不斷形成、不斷礦化過程。在新生牙本質基質中型膠原纖維以型為核心交聯(lián)成網(wǎng)狀，纖維間隙較大，為基質礦化提供所需的支架和空間。膠原在牙本質形成中的另一個作用是在牙本質基質礦化前沿與牙本質非膠原蛋折結合，形成大分子多聚體，改變分子的表面構型，有利于板狀羥磷灰石的形成和生長。B a.牙本

13、質非膠原蛋白1、牙本質磷蛋白(DPP)特性 （1）高度磷酸化（2）強陰離子特性（3）對鈣有高度親和力 （4）促進和抑制礦化雙重作用（5）對型膠原有高度親和力（6）合成后可快速聚于礦化前沿2.牙本質涎蛋白（DSP） （1）、分子量53KD的糖蛋白（2）、存在于成牙本質細胞及牙本質中（3）、在前釉細胞中有短暫表達（4）、能促進羥磷灰石晶體生長（5）、可能與牙胚發(fā)育的信號傳遞及調(diào)節(jié)有關 5. 名詞解釋Southern hybrilization（southern雜交）(P104) 是指先用凝膠電泳分離經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶消化的DNA片段，然后在原位將DNA片段轉移至固相基質如硝酸纖維素膜上，經(jīng)變性及干

14、烤固定，用核酸探針進行雜交，經(jīng)放射自顯影顯示雜交效果。southern雜交最大優(yōu)點： 能根據(jù)雜交帶的位置判斷待測樣品中與探針雜交的DNA片段的分子量。6. 談談你對Dolly的看法（補充材料）D. 多莉成功的理論意義: 多莉的誕生證明高度分化成熟的哺乳動物乳腺細胞，仍具有全能性，還能像胚胎細胞一樣完整地保存遺傳信息，這些遺傳信息在母體發(fā)育過程中并沒有發(fā)生不可回復的改變，還能完全恢復到早期胚胎細胞狀態(tài)。最終仍能發(fā)育成與供體成體完全相同的個體。以往的遺傳學認為，哺乳動物體細胞的功能是高度分化了的，不可能重新發(fā)育成新個體。與這一理論相反，多莉終于被克隆出來了。它的誕生推翻了形成了上百年的上述理論，實

15、現(xiàn)了遺傳學的重大突破 成功地找到了供體核與受體卵細胞質更加相容的方法。過去對高度分化細胞的核移植不能成功的原因，是供體核與受體卵細胞周期的不兼容性，因而發(fā)生染色體異常、細胞核可能發(fā)生額外的DNA復制和早熟染色體聚合成非整倍體或者發(fā)生異常。克隆多莉的實驗解決了高度分化了的體細胞核移植成功的關鍵性技術 以往用于基因移植的方法比較原始的，僅能插入一個基因并且很不精確。而克隆多莉方法可使移植的細胞在成為核供體之前誘發(fā)精確的遺傳變化，又能精確地植入基因。然后選擇技術幫助準確地挑選出那些產(chǎn)生令人滿意變化的母細胞來作為核供體，這樣就能用同一個體的許多細胞繁殖出遺傳表現(xiàn)完全相同的動物個體。 E.克隆技術成功的

16、實踐意義: 應用克隆技術，繁殖優(yōu)良物種。常規(guī)育種周期長還無法保證100的純度；用克隆這種無性繁殖，就能從同一個體中復制出大量完全相同的純正品種，且花時少、選育的品種性狀穩(wěn)定，不再分離。建造動物藥廠，制造藥物蛋白。利用轉基因技術將藥物蛋白基因轉移到動物中并使之在乳腺中表達，產(chǎn)生含有藥物蛋白的乳汁，并利用克隆技術繁殖這種轉基因動物，大量制造藥物蛋白。建立實驗動物模型，探索人類發(fā)病規(guī)律?？寺‘惙N純系動物，提供移植器官。采用克隆技術，可先把人體相關基因轉移到純系豬中，再用克隆技術把帶有人類基因的特種豬大量繁殖產(chǎn)生大量適用器官，且能同時改變器官的細胞表面攜帶人體蛋白和糖分特性，當豬的器官植入病人體內(nèi)時，

17、免疫排異反應減弱，成功率提高，用起來也更加安全。拯救瀕危動物，保護生態(tài)平衡。克隆技術的應用可望人為地調(diào)節(jié)自然動物群體的興衰，使之達到平衡發(fā)展。 F.如果出論述題，可自己發(fā)揮增加一些關于克隆的負面評論，例如：對倫理學的阻礙第四章 口腔免疫學（9T）（重點p129-134）1. 唾液中非特異防御物質主要有哪些？其作用是什么？（p129）A 非特異性物質：粘蛋白、溶菌酶、唾液過氧化物酶、富組蛋白等。B 粘蛋白（mucin）產(chǎn)生： 頜下腺 小唾液腺 舌下腺 粘液細胞作用： 抗干燥 防損傷 抵御微生物粘蛋白有兩種：一是高分子量的MG。與口腔粘膜緊密聯(lián)結，能捕捉唾液防御物質，如SIGA，構成一種屏障，抵御

18、毒素（如免疫缺陷病毒、皰疹病毒）、水解酶酸及致癌物穿通。因此可保護粘膜，免受某些病毒感染。一是低分子量的MG，可阻止某些細菌定植，同時可與MGI參與牙面獲得性膜的形成。 C溶菌酶 (Lysozyme) 溶菌酶是一種低分子量蛋白質，存在于多種組織細胞、血清、淚液、鼻腔液、唾液及齦溝液等外分泌液中。通過水解G+菌胞壁中的糖苷鍵，導致細菌溶解?？梢詺缈谇怀Ｒ姷腉+、G-菌，如葡萄球菌，奈瑟菌等。還可以不依賴酶解活性殺傷口腔真菌。 D富組蛋白 Histidim-rich proteins HRPS HRPs：是一組由唾液腺上皮細胞產(chǎn)生的堿性富含組氨酸的螺旋多肽， 對白念和變鏈有殺傷作用 富脯蛋白 P

19、roline-rich proteins PRPS PRPs：有抑制牙齦卟啉單胞菌蛋白酶作用，改變微生物粘附E. 唾液過氧化物酶：是由唾液腺上皮細胞產(chǎn)生的亞鐵血紅素酶，與唾液中過氧化氫和硫氰酸鹽構成有效的抗菌系統(tǒng)。利用細菌產(chǎn)生的H2O2將SCN-氧化成OSCN-（次硫氰酸鹽） 通過次硫氰酸鹽起作用 1、氧化細菌蛋白的巰基抑制細菌生長 2、增加細菌對其他抗菌成分的敏感性3、 增強氟化物對變鏈菌的抗菌活性4.減少H2O2對粘膜的損傷作用F乳鐵蛋白(Lactoferrin)產(chǎn)生：漿液細胞 中性粒細胞作用：抗菌 2.口腔非特異免疫系統(tǒng)的組成和作用 A非特異免疫系統(tǒng)：又稱天然免疫或固有免疫。是人類在漫長

20、進化過程中獲得的一種遺傳特性，是人一生下來就具有能力。 包括： 組織屏障（皮膚和黏膜系統(tǒng)、血腦屏障、胎盤屏障等）； 固有免疫細胞（吞噬細胞、殺傷細胞、樹突狀細胞等）； 固有免疫分子（補體、細胞因子、酶類物質等）。 B發(fā)揮保護功能的幾道屏障首先是外圍屏障。皮膚粘膜是機體第一道防線，包括：皮膚粘膜的機械阻擋作用和附屬物（如纖毛）的清除作用；皮膚粘膜分泌物（如汗腺分泌的乳酸、胃粘膜分泌的胃酸等）的殺菌作用；體表和與外界相通的腔道中寄居的正常微生物叢對入侵微生物的拮抗作用等。其次是內(nèi)部屏障?？乖镔|一旦突破第一道防線進入機體后，即遭到機體內(nèi)部屏障的清除，包括：淋巴和單核吞噬細胞系統(tǒng)屏障；正常體液中的一

21、些非特異性殺菌物質；血腦屏障和胎盤屏障等。 淋巴和單核吞噬細胞系統(tǒng)是機體的第二道防線。微生物進入機體組織以后，多數(shù)沿組織細胞間隙的淋巴液經(jīng)淋巴管到達淋巴結，但淋巴結內(nèi)的巨噬細胞會消滅它們，阻止它們在機體內(nèi)擴散，這就是淋巴屏障作用。如果微生物數(shù)量大，毒力強，就有可能沖破淋巴屏障，進入血液循環(huán)，擴散到組織器官中去。這時，它們會受到單核吞噬細胞系統(tǒng)屏障的阻擋。這是一類大的吞噬細胞。機體內(nèi)還有一類較小的吞噬細胞，其中主要的是中性粒細胞和嗜酸性粒細胞。它們不屬于單核吞噬細胞系統(tǒng)，但與單核吞噬細胞系統(tǒng)一樣，分布于全身，對入侵的微生物和大分子物質有吞噬、消化和消除的作用。在正常體液中的一些非特異性殺菌物質，

22、如補體、調(diào)理素、溶菌酶、干擾素、乙型溶素、吞噬細胞殺菌素等，也與淋巴和單核吞噬細胞系統(tǒng)屏障一樣，是機體的第二道防線，有助于消滅入侵的微生物 血腦屏障主要是由軟腦膜、脈絡膜和腦毛細管組成，可以阻止微生物等侵入腦脊髓和腦膜內(nèi)，從而保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)不受損害。血腦屏障隨個體發(fā)育而逐漸成熟，嬰幼兒容易發(fā)生腦脊髓膜炎和腦炎，就是血腦屏障發(fā)育不完善的緣故。胎盤屏障是由母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜和胎兒絨毛膜滋養(yǎng)層細胞共同組成的。這個屏障既不妨礙母子間的物質交換，又能防止母體內(nèi)的病原微生物入侵胎兒，從而保護胎兒的正常發(fā)育。 3.口腔免疫反應的特點（p133） 1、有菌環(huán)境2、與粘膜完整性密切相關（口腔的健康與粘膜和皮

23、膚，尤其是口腔粘膜的完整性密切相關，它構成了阻擋細菌分侵的物理屏障，不僅使口腔，也使機體免遭細菌的入侵 ）3、口腔分泌液有重要作用（4、免疫應答以局部為主5、在牙髓及根尖周病變以控制局部為主4.特異性SigA的形成過程及其生物學特性是什么？(p130)？ SIgA分子結構 SIgA雙聚體分子 SC 分子：由唾液腺導管上皮和腺泡上皮細胞合成的分泌成分 能增加SIgA分子穩(wěn)定性，還能幫助SIgA通過腺上皮或粘膜表面 J 鏈分子：是由漿細胞合成的，當Ig分泌時將兩個IgA單體連接成IgA雙聚體類型 1- IgA1 2- IgA2來源： 腸相關淋巴樣組織的漿細胞SIgA裝配： 1、漿細胞合成H鏈、L鏈

24、、J鏈2、J 鏈將兩個IgA連接成雙聚體IgA 3、雙聚體IgA通過固有層間隙到達上皮細胞間隙4、SC與之結合成小泡，經(jīng)胞飲作用攝入胞內(nèi)5、結合為穩(wěn)定的S IgA分子6、經(jīng)胞吐作用排入口腔 SIgA功能：（p131） 粘膜免疫抗原調(diào)節(jié)，免疫排除口腔耐受介導抗原分泌5. 免疫防齲的概念和分類（p136）（一）自動免疫：人工接種方法給機體輸入抗原，刺激機體產(chǎn)生免疫應答，增強抗病力，是當前齲病免疫的主要方法 （二） 被動免疫：給機體輸入其他個體產(chǎn)生免疫效應物質，非自身產(chǎn)生，易被清除，持6.牙周病的免疫學發(fā)病原理（p142） 現(xiàn)已公認，牙周病是牙周病原菌和宿主免疫防御長期相互作用所致，中性粒細胞、肥大

25、細胞、淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞在此過程中起著重要作用. 簡而言之： 急性相炎細胞中性粒細胞 保護作用，控制齦溝內(nèi)牙周微生態(tài)慢性相炎細胞淋巴細胞和巨噬細胞 破壞作用切斷和隔離局部感染，避免 引起全身感染和威脅生命7.口腔頜面部腫瘤的生物治療及新進展（p149）生物治療（BMR）：目的：調(diào)整失調(diào)免疫狀態(tài)，控制腫瘤生長生物治療生物反應調(diào)節(jié)劑，是一種新興的免疫學治療手段，包括：免疫興奮劑、免疫加強劑、免疫調(diào)節(jié)劑。 可以作用于單核-巨噬細胞、T細胞、NK細胞目前研究熱點： （IL-2、IFN、TNF等生物調(diào)節(jié)劑開發(fā) LAK和DNL等過繼性免疫治療及基因治療 單克隆抗體及腫瘤疫苗應用）1.細胞因子抗癌

26、機制（1、對腫瘤細胞毒性作用2、激發(fā)宿主抗癌免疫作用3、調(diào)節(jié)細胞的生長和分化4、作用于腫瘤營養(yǎng)血管5、促進骨髓造血功能）2.過繼性免疫治療IL-2（可獲得大量高活性抗腫瘤細胞，可強化抗癌細胞群對腫瘤殺傷）3.單克隆藥物美羅華（ 治療頭頸部非霍奇金淋巴瘤CD20）4.腫瘤疫苗（指將自體或異體腫瘤細胞經(jīng)過物理、化學、生物或基因工程處理后，再對患者行免疫接種，以激發(fā)患者機體對腫瘤的特異性免疫反應，達到消除腫瘤目的。1、腫瘤細胞疫苗 將腫瘤細胞經(jīng)鈷60處理后消除其生長能力，保留其免疫原性，再接種患者，產(chǎn)生免疫應答。2、腫瘤基因工程疫苗 將目的基因通過基因轉染導入受體細胞制備而成，目前目的基因有：IL-

27、2、IL-6、TNF等 3、肽疫苗和核酸疫苗由癌基因和抑癌基因突變肽制備的肽疫苗4、抗獨特性抗體疫苗具有模擬抗原及免疫調(diào)節(jié)的雙重作用，主要針對惡黑、B細胞淋巴瘤5、安柯瑞重組人5型腺病毒注射液 是我國第一個擁有知識產(chǎn)權新型腫瘤生物治療藥，能特異識別腫瘤細胞，并在腫瘤細胞中復制、釋放，最終導致癌細胞裂解，達到對腫瘤的連續(xù)殺傷作用；同時還可調(diào)動機體的免疫系統(tǒng)以殺傷腫瘤。主要針對頭頸部腫瘤、非小細胞肺癌、軟骨肉瘤）8.口腔頜面組織移植的新進展（p154） A牙移植：自體牙移植；同種異體牙移植（牙根吸收？）原因： 根周炎癥及牙骨質脫礦 機體免疫應答 致敏淋巴細胞引起免疫反應 牙根進一步脫礦，加劇免疫反

28、應，導致牙根吸收 B骨移植：自體骨移植 單純游離骨移植 成形性松質骨移植 帶肌蒂骨移植 血管吻合游離骨移植同種異體骨移植異種異體骨移植 免疫反應出現(xiàn)在同種異體骨移植，到目前為止，這種方法仍然是不成功的同種異體移植的免疫反應主要以T細胞依賴細胞免疫反應為主。由于HLA分型及配型應用，術后免疫反應較少出現(xiàn)。 原因：1、由于HAL分型及配型，提高的骨移植成功率。2、此種骨移植大多為顆粒型組織，可為機體吸收，在人體時間不長，引起免疫反應小。3、經(jīng)冰凍處理后，組織的免疫原性大大降低，但仍能刺激機體產(chǎn)生新的骨組織。 C面部軟組織的異體移植：2005年11月世界首例狗咬傷患者面部移植在法國完成，2006年4

29、月我國西安面部異體移植成功。自體組織移植同種異體面部復合組織移植 免疫排斥倫理9.Oral non-specific immune system（筆記）？ 非特異性免疫：又稱天然免疫或固有免疫。是人類在漫長進化過程中獲得的一種遺傳特性，是人一生下來就具有能力。包括：組織屏障（皮膚和黏膜系統(tǒng)、血腦屏障、胎盤屏障等）； 固有免疫細胞（吞噬細胞、殺傷細胞、樹突狀細胞等）； 固有免疫分子（補體、細胞因子、酶類物質等）?？谇环翘禺愋悦庖呦到y(tǒng)： 唾液防御非特異性免疫成分 粘蛋白 乳鐵蛋白 過氧化物酶 溶菌酶 細胞因子 口腔黏膜防御 口腔淋巴組織？第五章 口腔骨組織生物學（10T）（重點整章 生長因子）1.

30、 簡述成骨細胞與破骨細胞的關系(p168)a. 成骨細胞參與破骨細胞在骨表面附著的調(diào)節(jié)b. 成骨細胞合成破骨細胞骨吸收刺激因子：c. c成骨細胞參與破骨細胞分化成熟的調(diào)節(jié)： 2. Describe the functions of BMPs（骨形成蛋白類）（p163）骨形成蛋白類(BMPs) 是轉化生長因子( TGF) 家族的成員,屬于二硫鍵交聯(lián)的生長和分化因子。骨形成蛋白2 (BMP2) 是其中的一種,對骨組織形成、生長和修復有促進作用,是已知的所有生長因子中對骨的形成作用最強的生長因子BMP目前已知的唯一可以獨立在體內(nèi)異位成骨的生長因子BMP-2、BMP-4在牽引成骨初期表達增強BMP-7

31、在牽引期呈下降趨勢3. Osteoblast（成骨細胞）在骨改建中的作用（p164）1、合成膜結合型堿性磷酸酶 -與骨基質礦化有關2、合成骨基質分子 -型膠原 -非膠原蛋白4. PG在骨吸收、骨生成中的作用（p169）PG與骨吸收關系： 1、促進破骨細胞產(chǎn)生和骨組織改建2、是機械力引起細胞代謝變化的重要介質3、是其他細胞激肽、生長因子引起骨吸收的中間介質PG與骨形成關系： PG受體存在于成骨細胞表面其作用與濃度有關 低濃度促進成骨細胞DNA合成、細胞復制 高濃度抑制細胞分化 促進快速擴弓后骨組織沉積 5. 簡述力在骨改建中的作用（p172）一、 機械力對組織細胞生物學行為影響：負重可增加骨密度

32、，失重使骨密度降低二、 機械力對細胞骨架作用：三、 機械力引起骨吸收四、機械力致基因表達改變：6. 體外培養(yǎng)成骨細胞的獲得及鑒定方法（p179）獲得： 1、直接從骨組織中分離 保留活體組織特點；包含多種細胞2、利用已建立的成骨細胞株 細胞表型特點及骨生成能力低體外培養(yǎng)成骨細胞鑒定： 1、生化鑒定 2、形態(tài)學觀察 3、骨形成能力鑒定7. 從臨床角度骨牽張成骨術分為哪五個階段？每個階段有何生物學特點？（p175）1、 骨切開術骨組織分成兩段或數(shù)段骨完整性及連續(xù)性中斷生物學變化成骨細胞聚集斷端形成血痂2、 間歇期或潛伏期 血管斷裂，形成血腫骨斷端出現(xiàn)細胞壞死新生血管長入血凝塊被成纖維細胞、膠原、毛細

33、血管替代成骨細胞前體在血管周圍聚集成纖維細胞形成纖維樣組織3、 牽張期與骨折愈合比較表現(xiàn)為： 生長刺激：刺激生物活性物質釋放，增加成纖維細胞的平殖和生物合成 塑形刺激：改變成纖維細胞形態(tài)，發(fā)生極化，形成膠原，并沿施力方向排列牽張第2周，成骨細胞聚集明顯，排列整齊，分泌 類骨質。血管可見斷裂，血細胞滲出，編織骨 形成2周末，類骨質開始礦化纖維組織膜內(nèi)成骨軟骨組織軟骨內(nèi)成骨4、 固定期指停止牽張至去除牽引器這段期間成骨細胞仍然可呈雙層或多層排列，排列未見按施力方向排列，繼續(xù)分泌骨基質，組織間隙已無血細胞新生骨繼續(xù)鈣化，直至成熟骨5、改建期 骨組織行使功能，以完成新骨改建 骨皮質及骨髓腔恢復，哈佛系

34、統(tǒng)形成，完全改建完成約需1年8. 骨改建的調(diào)節(jié)因子（p171）1.血小板衍生的生長因子： 2.腫瘤壞死因子3.干擾素：4.IL（白細胞介素）：。 5.牙周韌帶細胞的調(diào)節(jié)因子：6.轉化生長因子-17.胰島素樣生長因子對骨組織的作用： 8.成纖維細胞生長因子對骨組織的作用： 9. 牽張成骨與骨折愈合的比較（相同都斷了；不同一個有外力，一個無外力）相同都斷了，骨組織分成兩段或數(shù)段骨完整性及連續(xù)性中斷 不同牽張成骨經(jīng)歷五個階段，每個階段施以不同的處理，是有外力的， 骨折愈合是沒有外力的。 （結合本章第七題）10. 顱面骨組織變化研究的主要方法（p177）一、生長發(fā)育預測：1、X線頭影測量分析 2、手腕

35、骨X線片，3、頸椎X線影像分析，二、臨床指標檢測：1、血液生化指標2、X線片3、齦溝液炎性介質分析（重量、體積，放射免疫法，酶聯(lián)免疫法） 三、各種骨細胞培養(yǎng)：（一）骨髓細胞培養(yǎng) （二）成牙本質細胞培養(yǎng) （三）各種骨細胞體外培養(yǎng) 四、離體狀態(tài)骨吸收評價：（一）器官培養(yǎng)觀察45Ca釋放方法 （二）骨顆粒檢測法（三）骨吸收陷窩檢測 第六章 口腔細胞培養(yǎng)及其應用（7T）1. 細胞培養(yǎng)取材有哪些基本要點（要求）（p188）取材的基本注意事項有以下幾點：（1） 取材部位準確（2） 嚴格無菌操作（3） 盡快培養(yǎng) （4） 減小損傷（盡量采用銳器對組織進行剪切分離，避免撕扯，以減小對組織細胞的損傷）（5） 避免

36、干燥（在修剪時可將組織浸泡于培養(yǎng)液中）（6） 制備標本（以便準確鑒別培養(yǎng)組織的來源，制備組織學與電鏡標本）2. 體外細胞培養(yǎng)微生物污染有哪些主要途徑？如何預防？（p189）微生物污染途徑：空氣：主要途徑場所器材：嚴格消毒操作：無菌觀念試劑：用前檢查組織標本：取材3. 口腔鱗癌細胞體外培養(yǎng)生物學特性有哪些？（p199）為多角形上皮樣細胞，鑲嵌狀排列，核大，圓形，核漿比高，核仁清，56個，核分裂象多，細胞成堆生長，無接觸抑制明顯惡性細胞特征。細胞貼壁率高，增殖迅速，裸鼠移植率高，具有鱗癌組織學特點，電鏡下見胞質內(nèi)含張力原纖維，細胞間可見橋粒及半橋粒，證明為上皮來源。細胞增殖迅速，裸鼠移植成瘤率很高

37、，瘤組織具有鱗癌組織學特點，與原發(fā)灶組織學相符。4. 細胞培養(yǎng)的外界環(huán)境（p184）（1）無污染環(huán)境：因此無任何污染和及時清除代謝物是細胞體處生存的基本條件（2） 基質：除造血細胞、腹水細胞等細胞外，絕大多數(shù)細胞需要附著在適宜底物上才能生長（3）氣體環(huán)境和氫離子濃度CO2: 5%大多數(shù)細胞適宜PH為7.27.4； （4） 液相環(huán)境：a水和平衡鹽溶液b天然培養(yǎng) 基： c合成培養(yǎng)基： d無血清培養(yǎng)基：（5） 溫度維持：細胞增殖生長必須有適宜溫度，般情況下溫度為36.50.5度，細胞對高溫更敏感，細胞在4度仍可生存，若加入保護劑，可長期在液氮中保存。然在4143度中將多數(shù)死亡。（6） 滲透壓：滲透壓

38、對細胞來說有一定耐受性，按培養(yǎng)基說明書其基本滲透壓可保證。5。傳代培養(yǎng)的過程（p183） 傳代培養(yǎng)：細胞在培養(yǎng)器皿中生長一定時間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中。初代培養(yǎng)細胞一經(jīng)傳代后便改稱做細胞系。在全生命期中此期的持續(xù)時間最長。在培養(yǎng)條件較好情況下，細胞增殖旺盛，并能維持二倍體核型，呈二倍體核型的細胞稱二倍體細胞系。為保持二倍體細胞性質，細胞應在初代培養(yǎng)期或傳代后早期凍存。反復傳代就有可能導致細胞失掉二倍體性質或發(fā)生轉化。一般情況下當傳代1050次左右，細胞增殖逐漸緩慢，以至完全停止，細胞進入第三期。6How to differential a cell as a odontoblast（成牙本質細胞） histologically？ 在組織學上，如何鑒別成牙本質細胞？（p192）？ 分析：結合組織病理學課本回答的，鑒于成牙本質細胞的所在部位，主要鑒別其與牙髓細胞（成纖維細胞、組織細胞和未分化間充質細胞） A成牙本質細胞特點：成牙本質細胞體是位于牙髓周圍緊接前期牙本質排列成的一層細胞，細胞呈柱狀，核卵圓形，位于細胞的基底部，細胞頂端有一細長的突起深入牙本質小管