實(shí)驗(yàn)6細(xì)菌的培養(yǎng)法.ppt

實(shí) 驗(yàn) 5,細(xì)菌培養(yǎng)法,目的要求,1、學(xué)習(xí)和掌握細(xì)菌分離與培養(yǎng)的各種基本技術(shù)； 2、進(jìn)一步熟悉和掌握無菌操作技術(shù)。,實(shí)驗(yàn)材料,標(biāo)本和菌種：大腸桿菌培養(yǎng)物、葡萄球菌培養(yǎng)物、變形桿菌培養(yǎng)物、枯草桿菌培養(yǎng)物； 實(shí)驗(yàn)器材：接種環(huán)、接種針、酒精燈； 培養(yǎng)基：普通瓊脂平板、試管斜面、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；,常用的有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等（見圖6）。,圖6,接種工具,細(xì)菌接種的基本程序,滅菌接種環(huán),沾取標(biāo)本,接種,滅菌接種環(huán),殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本,殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境,（一）細(xì)菌的分離方法,培養(yǎng)基：固體平板培養(yǎng)基 分離方法：劃線分離法 意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細(xì)菌在瓊脂表面分散開，使單個(gè)細(xì)菌能固定在某一點(diǎn)，生長(zhǎng)繁殖后形成單個(gè)菌落，以達(dá)到分離純種的目的。,細(xì)菌的分離培養(yǎng)方法,微生物的分離平板劃線法,1.分區(qū)劃線法： 2.連續(xù)劃線法：,微生物的分離平板劃線法,分區(qū)劃線法,第一區(qū)劃線,滅菌接種環(huán),第二區(qū)劃線,滅菌接種環(huán),第三區(qū)劃線,滅菌接種環(huán),連續(xù)劃線法,（二）細(xì)菌的接種法,當(dāng)細(xì)菌分離成純種后，常需要接種到相關(guān)的培養(yǎng)基中，以測(cè)試其各種生物學(xué)性狀。一般可用斜面、半固體、液體培養(yǎng)基來檢驗(yàn)細(xì)菌的培養(yǎng)特性，相應(yīng)培養(yǎng)基的接種方法有三種。,斜面接種法,培養(yǎng)基：斜面固體培養(yǎng)基； 接種方法：斜面培養(yǎng)基接種法； 用途：擴(kuò)增細(xì)菌、保存菌種；或用于觀察其某些生化特性。,瓊脂斜面培養(yǎng)基接種法,穿刺接種,半固體培養(yǎng)基： 接種方法：穿刺接種法。用接種針垂直地穿入培養(yǎng)基中心至底部 然后沿著原接種線將針拔出 用途：檢驗(yàn)細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性或觀察細(xì)菌的生化反應(yīng)。,液體培養(yǎng)基接種法,培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基 接種方法：液體接種法 從斜面菌種接入液體培養(yǎng)液 從液體培養(yǎng)液接入液體培養(yǎng)液 用途：擴(kuò)增細(xì)菌，用于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)特性或測(cè)定其生化特性。,細(xì)菌培養(yǎng)法,一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）： 培養(yǎng)溫度：37（采用恒溫培養(yǎng)箱） 培養(yǎng)時(shí)間：1824h 二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱 厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等,細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象,菌落： 定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，形成單一肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。 菌落特征：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性 菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M） 菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。,菌 落,菌落與菌苔,細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象,混濁：多見于兼性厭氧菌 沉淀：多見于厭氧菌 菌膜：多見于專性需氧菌,液體培養(yǎng)基的細(xì)菌生長(zhǎng),細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象,有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線邊緣模糊。 無鞭毛細(xì)菌：只沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線邊緣清晰。,穿刺接種生長(zhǎng)現(xiàn)象,結(jié)