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文檔簡介

掌握操作技術(shù),解答微生物的利用試題一、單項選擇題1下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯誤的是()A將接種環(huán)放在火焰上灼燒B將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液C蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連2在涂布平板操作時錯誤的是()A將涂布器在酒精燈火焰上灼燒,直到燒紅B取少量菌液滴加在培養(yǎng)基表面C將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后,冷卻810 s再用D涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿,使涂布均勻3平板冷凝后要將平板倒置,其原因是()A接種時再拿起來方便B在皿底上標(biāo)記日期等方便C正著放置容易破碎D防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染4高溫滅菌的原理是()A每種微生物生長的最適溫度是一定的B每種微生物對高溫環(huán)境都不適應(yīng)C高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動D高溫降低了環(huán)境中氧的濃度5欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌,下列實驗操作中不正確的是()A將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)最多涂布三個平板C可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照D可用顯微鏡觀察計數(shù)來測量尿素分解菌的數(shù)量6下列有關(guān)平板劃線操作的敘述中,不正確的是()A第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B每次劃線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種C在第二區(qū)域內(nèi)劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液D劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者7用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,其結(jié)果與實際值相比()A比實際值高B比實際值低C和實際值一致D可能比實際值高,也可能比實際值低8在做分離分解纖維素的細(xì)菌實驗中,加入剛果紅應(yīng)該在()制備培養(yǎng)基時梯度稀釋時倒平板時涂布時長出菌落時A BC D二、多項選擇題9下列生物學(xué)實驗操作,能夠順利達(dá)到實驗?zāi)康牡氖?)A在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋的大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落B在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無菌空氣制作果酒C土壤浸出液接種于以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選分解尿素的細(xì)菌D在分離土壤中的尿素分解菌實驗中,采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后,可以用于制取土壤稀釋液10某學(xué)者欲研究被石油污染過的土壤中細(xì)菌數(shù)量,并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯誤的是()A利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)B以石油為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選C采用稀釋涂布平板法分離菌種D稱取和稀釋土壤樣品時應(yīng)在火焰旁三、非選擇題11(2016鎮(zhèn)江丹徒模擬)大腸桿菌是一種兼性厭氧菌,在無氧條件下,發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)換成多種有機(jī)酸并生成二氧化碳,某研究機(jī)構(gòu)利用“濾膜法”對受污染的河流水體進(jìn)行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測定?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)研究人員向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍(lán)水溶液后,裝入圖甲所示的試管中,再將污水樣滴加進(jìn)去震蕩搖勻,適宜條件下培養(yǎng)一段時間后可觀察到溶液顏色的變化為_。(2)圖乙濾膜的孔徑應(yīng)_(填“大于”“小于”或“等于”)大腸桿菌。(3)制備圖乙中牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時,培養(yǎng)基的滅菌方法是_,待培養(yǎng)基冷卻至_左右時進(jìn)行倒平板。(4)為了鑒別大腸桿菌菌落,可向培養(yǎng)基中加入_染料,該研究機(jī)構(gòu)通過統(tǒng)計_色菌落的數(shù)目,計算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。理論上他們的統(tǒng)計值要比實際值_(填“偏高”“偏低”或“相等”)理由是_。12(2017南通調(diào)研)牛、山羊等反芻動物的瘤胃中生活著多種厭氧微生物。為了分離出高效的纖維素分解菌,科學(xué)家從牛瘤胃中獲取內(nèi)容物,經(jīng)過選擇培養(yǎng)后,接種在鑒別培養(yǎng)基上初篩分離得到5個菌株,觀察結(jié)果如下:菌株編號透明圈直徑R菌株直徑rR/r10.40.31.321.10.61.732.00.82.542.10.92.350.550.31.8回答下列問題:(1)將選擇培養(yǎng)后的菌種接種在經(jīng)_法滅菌的鑒別培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基成分中的纖維素能與_形成紅色復(fù)合物,該培養(yǎng)基屬于_(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基。(2)據(jù)表分析,_號菌株最可能具有較高產(chǎn)纖維素酶的能力且酶活性也較高,理由是_。為確定此結(jié)論可繼續(xù)進(jìn)行實驗,對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的_進(jìn)行定量測定。13從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件,使其群落的數(shù)量大大增加,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。(1)接種前要對培養(yǎng)基進(jìn)行_處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)過程中,一定要注意在_條件下進(jìn)行。(2)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從_的環(huán)境中采集。(3)從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制_培養(yǎng)基(按用途分類),該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的_。(4)經(jīng)過梯度稀釋后,要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上,在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是_,當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生_來篩選纖維素分解菌。某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片,最可能的原因是_。答案精析1D2A將蘸過酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃,然后在酒精燈火焰旁冷卻,A錯誤;取少量菌液滴加在培養(yǎng)基表面,B正確;涂布器滅菌時,將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后,冷卻810 s再用,C正確;涂布時,涂布器可以不動,可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿,使涂布均勻,D正確。3D微生物實驗室培養(yǎng)的關(guān)鍵在于防止雜菌污染,平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染,故選D。4C蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔(dān)者,遺傳物質(zhì)DNA控制蛋白質(zhì)的合成,高溫會破壞蛋白質(zhì)和核酸的空間結(jié)構(gòu),使它們變性失活,因此高溫滅菌的原理是:破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動,C項正確。5B為防止土壤浸出液濃度過高,不能獲得單菌落,要將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋,A正確;同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板,防止偶然因素對實驗結(jié)果的影響,B錯誤;可以將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照,以判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底,C正確;可以用顯微鏡觀察計數(shù)來測量尿素分解菌的數(shù)量,D正確。6C7B用稀釋涂布平板法對樣品中活菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計,只是一種估測,根據(jù)此方法的實驗過程可知,在某一稀釋度下涂布的平板菌體數(shù)具有一定的偶然性,并不是絕對均勻的,所以取若干個平板菌落數(shù)量的平均值比較接近樣品中菌體數(shù)的真實值。用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目有可能幾個細(xì)菌同時在一起,當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,而樣品稀釋度無論多高都很難使其中的細(xì)菌都單個分布于培養(yǎng)基上,故計數(shù)結(jié)果比實際值低。8C常用的剛果紅染色法有兩種:一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng);另一種是在倒平板時就加入剛果紅。綜上所述,C項正確。9AC10AB分離菌種常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,但對活菌進(jìn)行計數(shù)常用稀釋涂布平板法而不能用平板劃線法,所以A項錯誤。閱讀題干可知實驗?zāi)康氖呛Y選出能分解石油的細(xì)菌,培養(yǎng)基的配方應(yīng)以石油為唯一碳源,所以B項錯誤。對微生物進(jìn)行分離和計數(shù),應(yīng)該用稀釋涂布平板法,所以C項正確。微生物的分離和培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是無菌技術(shù),因此在微生物的分離和培養(yǎng)的過程中稱取和稀釋土壤等活動要在火焰旁進(jìn)行,所以D項正確。11(1)藍(lán)色綠色黃色(2)小于(3)高壓蒸汽滅菌50(4)伊紅美藍(lán)黑偏低兩個或多個大腸桿菌連在一起時,平板上只能觀察到1個菌落解析(1)大腸桿菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的二氧化碳?xì)怏w可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。(2)圖乙濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌,否則大腸桿菌會漏掉。(3)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌法,滅菌后一定要等冷卻到50左右時才能倒平板。(4)為了鑒別大腸桿菌菌落,可向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)染料,可以將大腸桿菌菌落染成黑色。由于多個菌落連在一起時會出現(xiàn)重疊現(xiàn)象,所以統(tǒng)計值比真實值要小。12(1)高壓蒸汽滅菌剛果紅固體(2)33號菌株R/r的值較大葡萄糖解析(1)微生物的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌。培養(yǎng)基成分中的纖維素能與剛果紅形成紅色復(fù)合物,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。(2)據(jù)表分析,3號菌株R/r的值較大,其最可能具有較高產(chǎn)纖維素酶的能力且酶活性也較高。13(1)高壓蒸汽滅菌無菌(2)富含纖維素(3)選擇碳源(4)剛果紅透明圈菌液濃度過高(土壤溶液稀釋不夠)解析(1)按照微生物的需求配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,取菌種的接種環(huán)要進(jìn)行灼燒滅菌、操作要在酒精燈的火焰附近進(jìn)行,培養(yǎng)要在無菌的恒溫箱

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