DB53T186-2014地理標(biāo)志產(chǎn)品程海螺旋藻.pdf

DB53/T 1862014 代替 DB53/ 1862007 地理標(biāo)志產(chǎn)品 程海螺旋藻 2014 - 03 - 26 發(fā)布 2014 - 06 - 01 實(shí)施 ICS 67.120.30 X 20 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督 檢驗(yàn)檢疫總局備案號：41959-2014 云南省地方標(biāo)準(zhǔn) 云南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā) 布 DB53/T 1862014 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 DB53186-2007地理標(biāo)志產(chǎn)品 程海螺旋藻 ，與 DB53186-2007 相比主要技術(shù)變化 如下： 刪除了螺旋藻膠囊。 理化指標(biāo)中水分、蛋白質(zhì)、灰分、葉綠素、藻藍(lán)素的指標(biāo)要求更加嚴(yán)格； 安全指標(biāo)增加了應(yīng)符合食品安全相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定， 還增加了日落黃及其鋁色淀、 檸檬黃及 其鋁色淀、亮藍(lán)及其鋁色淀 3 個指標(biāo)控制要求； 修改了螺旋藻中螺旋藻多糖的檢測方法。 本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)規(guī)定(國家質(zhì)檢總局第 78 號令)和 GB17924原產(chǎn)地域產(chǎn)品通用 要求以及 GB/T1.1 給出的規(guī)則起草。 本標(biāo)準(zhǔn)由永勝縣程海螺旋藻地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)申報委員會提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由云南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：永勝縣人民政府、永勝縣質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局、麗江市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局、云南綠 A 生物產(chǎn)業(yè)園有限公司、永勝縣工業(yè)經(jīng)貿(mào)和信息化局、麗江程海保爾生物開發(fā)有限公司。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：高仕倫、陳元文、楊曉勇、張迎春、杜偉春、左仕陸、歐陽宗琴、譚應(yīng)宏、徐 青山。 本標(biāo)準(zhǔn)于2007年9月首次發(fā)布。 DB53/T 1862014 1 地理標(biāo)志產(chǎn)品 程海螺旋藻 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了程海螺旋藻的術(shù)語和定義、要求、試驗(yàn)方法、標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸及貯存要求。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于永勝縣人民政府劃定的特定地域養(yǎng)殖生產(chǎn)的鈍頂螺旋藻和在特定地域經(jīng)縣人民政府 批準(zhǔn)經(jīng)有關(guān)部門審核認(rèn)定的以程海生產(chǎn)的鈍頂螺旋藻為主要原料， 在特定地域內(nèi)加工的螺旋藻地理標(biāo)志 保護(hù)產(chǎn)品。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 僅所注日期的版本適用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 GB 191 包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志 GB 1887 食品添加劑 碳酸氫鈉 GB 2760 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.2 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定 GB 4789.3 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計數(shù) GB 4789.4 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn) GB 4789.7 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn) GB 4789.10 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) GB 4789.15 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母菌計數(shù) GB 5009.3 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測定 GB 5009.4 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測定 GB 5009.5 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定 GB/T 5009.11 食品中總砷及無機(jī)砷的測定 GB 5009.12 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉛的測定 GB/T 5009.14 食品中鋅的測定 GB/T 5009.15 食品中鎘的測定 GB/T 5009.17 食品中總汞及有機(jī)汞的測定 GB/T 5009.35 食品中合成著色劑的測定 GB/T 5009.90 食品中鐵的測定 GB/T 5009.92 食品中鈣的測定 GB 5461 食用鹽 GB 7718 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則 GB 9687 食品包裝用聚乙烯成型衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) GB 9688 食品包裝用聚丙烯成型衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) SN/T 1113 進(jìn)出口螺旋藻粉中藻藍(lán)蛋白 葉綠素的測定方法 JJF 1070 定量包裝商品凈含量計量檢驗(yàn)規(guī)則 DB53/T 1862014 2 國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局75號令 定量包裝商品計量監(jiān)督規(guī)定 3 術(shù)語和定義 下列術(shù)語和定義適用于本文件。 3.1 程海螺旋藻 在程海螺旋藻地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍內(nèi)特定的自然生態(tài)環(huán)境條件下， 利用程海湖水養(yǎng)殖生產(chǎn)的鈍頂 螺旋藻及其制品（如螺旋藻粉、螺旋藻片等）。 4 程海螺旋藻地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍 4.1 程海螺旋藻的地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍僅限于永勝縣人民政府根據(jù) 地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)規(guī)定 (國家 質(zhì)檢總局第 78 號令) 提出的關(guān)于對申請出具程海螺旋藻地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)地域界定文件和范圍圖的 批復(fù)（永政報200564 號）的范圍，見附錄 A。 4.2 在永勝縣程海鎮(zhèn)范圍內(nèi)以程海湖水為生產(chǎn)養(yǎng)殖用水養(yǎng)殖生產(chǎn)的鈍頂螺旋藻。 4.3 以上述特定范圍內(nèi)生產(chǎn)的鈍頂螺旋藻為主要原料在特定地域內(nèi)加工的螺旋藻產(chǎn)品。 5 程海螺旋藻的養(yǎng)殖環(huán)境 5.1 其養(yǎng)殖環(huán)境為程海湖獨(dú)特的地理、氣候和水質(zhì)所決定。 5.2 地理 程海湖位于云南省麗江市永勝縣境內(nèi)金沙江上游河谷地區(qū)，東經(jīng)90389041北緯2672 2638的崇山峻嶺之中，湖長20km，南北走向，平均湖寬4km，湖水面積77.218km 2，平均水深25.736m。 是云南省內(nèi)九大高原湖泊之一。 5.3 氣候 程海湖屬“金沙江干熱區(qū)”，氣候溫暖，干熱，5月9月平均氣溫在2528之間。日照充足， 年平均日照2 600h2 900h，屬中亞熱帶氣候類型。 5.4 水質(zhì) 程海為天然堿水湖，pH 值 9.09.4。礦化程度屬中性，碳源豐富，HCO3 大于 550mg/L, CO 3 2-大于 100mg/L。 6 程海螺旋藻的生產(chǎn)工藝 DB53/T 1862014 3 注：虛框表示此框內(nèi)工藝段由一個生產(chǎn)部門或車間完成，序號表示工藝段，工藝段為螺旋藻粉生產(chǎn)工藝 段。 圖1 程海螺旋藻的生產(chǎn)工藝圖 7 程海螺旋藻的生產(chǎn)技術(shù) 7.1 藻種 程海螺旋藻生產(chǎn)用藻種須采用適宜于程海地區(qū)的氣候及水質(zhì)的鈍頂螺旋藻（SpiruLina pLatensis）。 7.2 培養(yǎng)基 以程海湖水為生產(chǎn)養(yǎng)殖用水，以Zarrouk螺旋藻培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加碳酸氫鈉、食鹽等配制生產(chǎn)用 培養(yǎng)基。 7.3 養(yǎng)殖 7.3.1 養(yǎng)殖池 采用跑道式半封閉培養(yǎng)池為養(yǎng)殖池，做到防蠅、防蟲、防災(zāi)害的要求。 培養(yǎng)池 單 體 程海水 營養(yǎng)補(bǔ)充 原料 采 收 濾 液 藻 泥 廢水處理 噴霧干燥 (或冷凍干燥) 藻 粉 混合粉碎過篩 包 裝 成 品 漂洗 室內(nèi)藻種 擴(kuò)大培養(yǎng) 室外藻種 擴(kuò)大培養(yǎng) DB53/T 1862014 4 7.3.2 培養(yǎng)過程中藻體濃度控制 為保證生產(chǎn)藻粉的色素含量,正常情況下須將培養(yǎng)濃度(培養(yǎng)液中的生物量)控制在0.3(以光密度 OD560計)以上。 7.3.3 中期營養(yǎng)源添加 養(yǎng)殖過程中以初配培養(yǎng)基各營養(yǎng)源含量為參考， 視程海螺旋藻生長量和培養(yǎng)基營養(yǎng)源檢測結(jié)果為依 據(jù)，適時補(bǔ)充營養(yǎng)源。 7.3.4 生物污染防治 以“生物防治”為原則，對養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)的浮游動物污染、雜藻污染等，不得使用任何農(nóng)藥進(jìn)行 防治，須通過調(diào)整培養(yǎng)基鹽度和調(diào)控種群密度等方法來預(yù)防控制。 7.4 采收 采用重力斜篩濾布過濾方式采收，采收過程嚴(yán)格漂洗。 7.5 干燥 為保證產(chǎn)品質(zhì)量，須采用噴霧干燥，干燥過程要求嚴(yán)格控制干燥溫度，干燥塔進(jìn)風(fēng)溫度180， 出風(fēng)溫度80。有條件的可采用低溫冷凍干燥。 7.6 其它要求 7.6.1 培養(yǎng)基主要原料要求 7.6.1.1 碳酸氫鈉，應(yīng)符合 GB 1887 的規(guī)定。 7.6.1.2 食鹽, 應(yīng)符合 GB 5461 的規(guī)定。 7.6.1.3 生產(chǎn)養(yǎng)殖用水,采用程海湖水,表 1 所列指標(biāo)為引用標(biāo)準(zhǔn)，各項指標(biāo)會因季節(jié)、采樣地點(diǎn)不同 而不盡相同,有一定的波動范圍。 表1 程海螺旋藻生產(chǎn)養(yǎng)殖用水指標(biāo)要求 項 目 指 標(biāo) 項 目 指 標(biāo) 色、臭、味 無異臭味 總磷（以 P 計） ，mg/L 0.20 漂浮物質(zhì) 水面不得出現(xiàn)油膜或浮沫 K +，mg/L 712 懸浮物，mg/L 50 Na +，mg/L 160200 pH 9.09.4 Ca 2+，mg/L 310 HCO3 -，mg/L 400650 Mg 2+，mg/L 4070 CO3 2-，mg/ L 80180 總 Fe，mg/L 0.10 CL -，mg/ L 1535 總重金屬（以 Pb 計） ，mg/L 0.02 SO4 2-，mg/L 312 總大腸菌群，個/mL 5 000 總氮（以計） ，mg/L 1.0 7.6.1.4 生產(chǎn)用水應(yīng)符合 GB5749 規(guī)定。 8 程海螺旋藻的品質(zhì)要求 DB53/T 1862014 5 8.1 感官要求 程海螺旋藻感官應(yīng)符合表2的規(guī)定。 表2 程海螺旋藻的感官要求 項 目 要 求 色澤 藍(lán)綠色至墨綠色 滋味和氣味 無異味，略帶海藻腥鮮味 雜質(zhì) 無肉眼可見外來雜質(zhì) 外觀（僅限于螺旋藻粉） 螺旋藻粉應(yīng)為均勻粉末，在顯微鏡下應(yīng)呈分散、綠色的藻絲體，不得 有明顯異物 8.2 理化指標(biāo) 程海螺旋藻理化指標(biāo)符合表的規(guī)定。 表3 程海螺旋藻的理化指標(biāo) 項 目 要 求 細(xì)度，五號篩篩孔內(nèi)徑（1807.6）m 全部通過 水分， g/100g 8.0 蛋白質(zhì)，g/100g 64.0 灰分，g/100g 8.0 螺旋藻多糖， g/100g 3.0 葉綠素， mg/100g 750.0 藻藍(lán)素， mg/100g 3 500 總類胡蘿卜素，mg/100g 150.0 鐵， mg/100g 20.0 鋅， mg/100g 1.0 鈣 mg/100g 20.0 注：細(xì)度僅限螺旋藻粉。 8.3 安全指標(biāo) 程海螺旋藻的安全指標(biāo)應(yīng)符合相關(guān)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，并應(yīng)符合表4 的要求。 DB53/T 1862014 6 表4 程海螺旋藻的安全指標(biāo) 項 目 指標(biāo) 鉛（以 Pb 計），mg/kg 20 鎘（以 Cd 計），mg/kg 0.5 總砷（以 As 計），mg/kg 0.5 總汞（以 Hg 計），mg/kg 0.1 菌落總數(shù) ，CFU/g 3104 大腸菌群，MPN/g 0.90 霉菌，cfu/g 25 酵母菌，cfu/g 25 沙門氏菌 副溶血性弧菌 致病菌 金黃色葡萄球菌 0/25g 日落黃及其鋁色淀，g/kg 不得檢出 檸檬黃及其鋁色淀，g/kg 不得檢出 亮藍(lán)及其鋁色淀，g/kg 不得檢出 8.4 食品添加劑 8.4.1 食品添加劑的品種和使用量應(yīng)符合 GB 2760 的規(guī)定。 8.5 凈含量 凈含量允許偏差符合國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局75號令定量包裝商品計量監(jiān)督規(guī)定的規(guī)定。 9 試驗(yàn)方法 9.1 感官檢驗(yàn) 9.1.1 滋味和氣味：品嘗與嗅覺檢驗(yàn)。 9.1.2 色澤、外觀：自然光下目測。 9.1.3 雜質(zhì)：自然光下目測。 9.1.4 外觀 9.1.4.1 自然光下目測。 9.1.4.2 取樣品適量置于小燒杯中，加 10 倍蒸餾水搖勻；取一滴于載玻片上蓋上蓋玻片，將載玻片置 于顯微鏡上，先用低倍鏡（100 倍），再用高倍鏡（200400 倍）觀察，至少觀察 4 個視野。螺旋藻在 顯微鏡下為螺旋形或環(huán)形的單個或幾個細(xì)胞相連的短絲體。 9.2 理化檢驗(yàn) 9.2.1 細(xì)度 DB53/T 1862014 7 9.2.1.1 儀器與設(shè)備：五號篩篩孔內(nèi)徑（1807.6）m。 9.2.1.2 操作步驟：取試樣少許，置于標(biāo)準(zhǔn)篩內(nèi)，反復(fù)振蕩后，試樣全部通過。 9.2.2 水分按照 GB 5009.3 規(guī)定的方法測定。 9.2.3 蛋白質(zhì)按照 GB 5009.5 規(guī)定的方法測定。 9.2.4 灰分按照 GB 5009.4 規(guī)定的方法測定。 9.2.5 螺旋藻多糖按照本標(biāo)準(zhǔn)附錄 B 中規(guī)定的方法測定。 9.2.6 藻藍(lán)素（既藻藍(lán)蛋白）按照 SN/T 1113 規(guī)定的方法測定。 9.2.7 葉綠素按照 SN/T 1113 規(guī)定的方法測定。 9.2.8 類胡蘿卜素按照本標(biāo)準(zhǔn)附錄 C 中規(guī)定的方法測定。 9.2.9 鐵按照 GB/T 5009.90 規(guī)定的方法測定。 9.2.10 鋅按照 GB/T 5009.14 規(guī)定的方法測定。 9.2.11 鈣按照 GB/T 5009.92 規(guī)定的方法測定。 9.3 重金屬檢驗(yàn) 9.3.1 總砷按 GB/T 5009.10 規(guī)定的方法測定。 9.3.2 鉛按 GB 5009.12 規(guī)定的方法測定。 9.3.3 鎘按 GB/T 5009.15 規(guī)定的方法測定。 9.3.4 總汞按 GB/T 5009.17 規(guī)定的方法測定。 9.4 微生物學(xué)檢驗(yàn) 9.4.1 菌落總數(shù)按照 GB 4789.2 規(guī)定的方法測定。 9.4.2 大腸菌群按照 GB 4789.3 規(guī)定的方法測定。 9.4.3 霉菌、酵母菌按照 GB 4789.15 規(guī)定的方法測定。 9.4.4 致病菌按照 GB4789.4，GB/T4789.7， GB 4789.10 第二法規(guī)定的方法測定。 9.4.5 日落黃及其鋁色淀、檸檬黃及其鋁色淀、亮藍(lán)及其鋁色淀按照 GB/T 5009.35 規(guī)定的方法測定。 9.5 凈含量檢驗(yàn) 凈含量：按JJF1070規(guī)定的方法測定。 10 檢驗(yàn)規(guī)則 10.1 組批 以同一批投料、同一工藝、同一包裝規(guī)格的產(chǎn)品為一批。 DB53/T 1862014 8 10.2 抽樣方法及數(shù)量 每批產(chǎn)品中隨機(jī)抽取10個定量包裝產(chǎn)品，抽樣總量不低于800g的樣品，分為兩份,一份用于檢驗(yàn), 一份作為留樣。 10.3 出廠檢驗(yàn) 10.3.1 每批產(chǎn)品中隨機(jī)抽取 10 個定量包裝產(chǎn)品，抽樣總量不低于 800g 的樣品，分為兩份,一份用于 檢驗(yàn),一份作為留樣。 10.3.2 出廠檢驗(yàn)項目 產(chǎn)品須經(jīng)出廠檢驗(yàn)合格并附有產(chǎn)品質(zhì)量合格證明后方可出廠銷售。 出廠檢驗(yàn)項目為感官、 蛋白質(zhì)、 類胡蘿卜素、葉綠素、藍(lán)藻素、水分、灰分、菌落總數(shù)、大腸菌數(shù)、凈含量。 10.4 型式檢驗(yàn) 10.4.1 每半年進(jìn)行一次型式檢驗(yàn)。有下列情況之一時，亦應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)： a) 更換主要生產(chǎn)設(shè)備或更改生產(chǎn)主要工藝； b) 長期停產(chǎn)再恢復(fù)生產(chǎn)時； c) 出廠檢驗(yàn)結(jié)果與上次型式檢驗(yàn)有較大差異時； d) 國家質(zhì)量監(jiān)督機(jī)構(gòu)進(jìn)行抽查時。 10.4.2 型式檢驗(yàn)項目 為本標(biāo)準(zhǔn)8.18.5規(guī)定的所有項目。 10.5 判定規(guī)則 10.5.1 出廠檢驗(yàn)判定 安全指標(biāo)中有一項不符合本標(biāo)準(zhǔn)，則判為不合格品；感官要求、水分、凈含量允差指標(biāo)若有一項不 符合本標(biāo)準(zhǔn)，可加倍抽樣復(fù)驗(yàn)，以復(fù)驗(yàn)結(jié)果判定。 10.5.2 型式檢驗(yàn)判定 檢驗(yàn)結(jié)果的全部項目均符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的要求，判定為合格；檢驗(yàn)結(jié)果中有任一項不合格時，則判 定為不合格。 對檢驗(yàn)結(jié)果有異議時，可進(jìn)行復(fù)檢。劣變、有污染、有異味和微生物指標(biāo)不合格的產(chǎn)品，均不得復(fù) 檢；其余項目不合格時，可對備樣進(jìn)行復(fù)檢，以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)。 11 標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯存 11.1 標(biāo)簽 地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品標(biāo)簽的內(nèi)容除符合國家有關(guān)規(guī)定產(chǎn)品的標(biāo)志（GB 7718、GB 28050和GB 16740） 的要求外，還應(yīng)規(guī)定特殊標(biāo)注的內(nèi)容，如地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品名稱、原材料的名稱和地域，獲得批準(zhǔn)的企 業(yè)，應(yīng)在其產(chǎn)品外包裝上貼使用地理標(biāo)志產(chǎn)品專用標(biāo)志。 11.2 包裝 DB53/T 1862014 9 程海螺旋藻應(yīng)采用塑料瓶或純鋁塑復(fù)合袋包裝。塑料瓶應(yīng)符合 GB 9687 和 GB 9688 的要求：鋁塑 復(fù)合袋應(yīng)潔凈、平整、無破損、包裝牢固、封口嚴(yán)密。外包裝材料采用瓦楞紙制成。 11.3 運(yùn)輸、貯存 產(chǎn)品應(yīng)存放于避光、干燥、陰涼的食品倉庫中，產(chǎn)品離墻50cm，離地20cm，不得與有害、有毒、易 污染的物品混貯、混運(yùn)。防止日曬雨淋。運(yùn)輸時嚴(yán)格防雨、防潮、防曬。 11.4 保質(zhì)期 符合11.3條的規(guī)定時，程海螺旋藻的保質(zhì)期為36個月。 DB53/T 1862014 10 A A 附 錄 A （規(guī)范性附錄） 程海螺旋藻地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍圖 永勝縣人民政府永勝縣人民政府 注 1：程海螺旋藻保護(hù)范圍限于永勝縣程海鎮(zhèn)養(yǎng)殖、加工區(qū)和永勝縣永北鎮(zhèn)深加工區(qū)。 DB53/T 1862014 11 附 錄 B （規(guī)范性附錄） 螺旋藻中螺旋藻多糖的檢測方法 B B.1 適用范圍 本方法適用于螺旋藻多糖的測定。 B.2 原理 用80%乙醇提取以去除單糖、低聚糖等干擾性成分，然后用水提取其中所含的多糖類成分。提取的 螺旋藻多糖在H2SO4作用下， 先水解成單糖， 并迅速脫水生成糖醛衍生物， 然后與苯酚縮合成有色化合物， 用分光光度法于適當(dāng)波長處（490nm）測定其吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出以單糖表示的多糖含量。 B.3 儀器 B.3.1 分析天平 感量0.0001g。 B.3.2 分光光度計 用10mm比色杯，可在490nm下測吸光度。 B.3.3 玻璃回流裝置 B.3.4 電熱恒溫水浴鍋 B.3.5 玻璃儀器 250mL容量瓶、各規(guī)格移液管、25mL具塞試管。 B.4 試劑及配制 B.4.1 硫酸 分析純。 B.4.2 苯酚液 取苯酚100g，加鋁片0.1g與碳酸氫鈉0.05g，蒸餾收集172餾分，稱取此餾分10g，加水150mL，置 于棕色瓶中即得。 B.4.3 葡萄糖 分析純。 B.4.4 無水乙醇 分析純。 B.4.5 濾紙 中速定性濾紙。 B.5 測定步驟 DB53/T 1862014 12 B.5.1 樣品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取待測藻粉樣品0.12g（精確到0.0001g） ，置于圓底燒瓶中，加80%乙醇溶液200mL，回流提 取1小時，趁熱過濾，殘渣用80%熱乙醇溶液洗滌（約10mL5） ，殘渣連同濾紙（撕成小碎片）置于燒瓶 中，加蒸餾水100mL，加熱回流提取1小時，趁熱過濾，殘渣和濾紙碎片用熱蒸餾水充分洗滌（約10mL 10） ，洗液并入濾液，冷卻后移入250mL容量瓶中，用水定容，待測。 B.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 準(zhǔn)確稱取105下干燥至恒重的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖0.1g（精確到0.0001g），加水溶解并定容至1000mL容量 瓶即可。精密吸取此標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分別置于具塞試管中，各加蒸餾水使 體積為2mL，再各加苯酚液1.0mL，搖勻，迅速滴加硫酸5.0mL，搖勻后放置5min，置沸水浴中加熱15min， 取出冷卻至室溫；另以蒸餾水2mL加本酚液和硫酸，同上操作為空白對照。于490nm波長處測定吸收度， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 B.5.3 試樣的測定 準(zhǔn)確吸取待測液2mL， 以下操作按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制下的方法測定吸光度， 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出測定液 （顯 色液）中葡萄糖含量。 B.6 測定結(jié)果的計算 B.6.1 計算公式 見式（B.1）。 X250 W 100 （B.1） MV10 6 式中：W以葡萄糖表示的螺旋藻多糖百分含量，%； X測定液（顯色液）中葡萄糖的含量，g；