GB5009.256-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多種磷酸鹽的測定.pdf

中 華 人 民 共 和 國 國 家 標(biāo) 準(zhǔn)G B5 0 0 9.2 5 62 0 1 6食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多種磷酸鹽的測定2 0 1 6 - 0 8 - 3 1發(fā)布2 0 1 7 - 0 3 - 0 1實施中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會發(fā) 布G B5 0 0 9.2 5 62 0 1 61 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多種磷酸鹽的測定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中多種磷酸鹽的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中磷酸鹽、 焦磷酸鹽、 六偏磷酸鹽、 三偏磷酸鹽、 三聚磷酸鹽的測定。2 原理試樣采用相應(yīng)的方法提取和凈化, 以氫氧化鉀溶液為淋洗液, 陰離子交換柱分離, 電導(dǎo)檢測器檢測。以保留時間定性, 外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說明, 本方法所用試劑均為優(yōu)級純, 水為G B/T6 6 8 2規(guī)定的一級水。3.1 試劑3.1.1 氫氧化鈉(N a OH) 。3.1.2 氫氧化鉀(KOH) 。3.1.3 甲醇(CH3OH) , 色譜純。3.2 試劑配制3.2.1 氫氧化鈉溶液(1 0mm o l/L) : 稱取0.4g氫氧化鈉, 溶于水并稀釋定容至10 0 0m L。3.2.2 氫氧化鈉溶液(5 0mm o l/L) : 稱取2.0g氫氧化鈉, 溶于水并稀釋定容至10 0 0m L。3.3 標(biāo)準(zhǔn)品3.3.1 磷酸鈉(N a3P O4) 標(biāo)準(zhǔn)溶液(10 0 0m g/L, 水基體) 。3.3.2 焦磷酸鈉(N a4P2O7) 標(biāo)準(zhǔn)溶液(10 0 0m g/L, 水基體) 。3.3.3 六偏磷酸鈉 (N a P O3)6 標(biāo)準(zhǔn)溶液(10 0 0m g/L, 水基體) 。3.3.4 三偏磷酸鈉 (N a P O3)3 標(biāo)準(zhǔn)品: 純度9 8%。3.3.5 三聚磷酸鈉(N a5P3O1 0) 標(biāo)準(zhǔn)品: 純度9 8%。3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.4.1 磷酸根標(biāo)準(zhǔn)中間( 貯備) 溶液(1 0 0m g/L) : 吸取磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1 7.3m L于1 0 0m L容量瓶中,用1 0mm o l/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度, 此溶液每1L含磷酸根0.1g。3.4.2 焦磷酸根標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(1 0 0m g/L) : 吸取焦磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1 5.3m L于1 0 0m L容量瓶中, 用1 0mm o l/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度, 此溶液每1L含焦磷酸根0.1g。3.4.3 六偏磷酸根標(biāo)準(zhǔn)中間( 貯備) 溶液(1 0 0m g/L) : 吸取六偏磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1 2.9m L于1 0 0m L容G B5 0 0 9.2 5 62 0 1 62 量瓶中, 用1 0mm o l/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度, 此溶液每1L含六偏磷酸根0.1g。3.4.4 三偏磷酸根標(biāo)準(zhǔn)中間( 貯備) 溶液(10 0 0m g/L) : 將三偏磷酸鈉在1 0 32烘箱中干燥3h,在干燥器中冷卻至室溫后, 準(zhǔn)確稱取三偏磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品0.1 3 2g( 精確至0.0 0 01g) , 用1 0mm o l/L氫氧化鈉溶液稀釋至1 0 0m L, 此溶液每1L含三偏磷酸根1.0g。3.4.5 三聚磷酸根標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(10 0 0m g/L) : 將三聚磷酸鈉在1 0 32烘箱中干燥3h, 在干燥器中冷卻至室溫后, 準(zhǔn)確稱取三聚磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品0.1 4 8g( 精確至0.0 0 01g) , 用1 0mm o l/L氫氧化鈉溶液稀釋至1 0 0m L, 此溶液每1L含三聚磷酸根1.0g。3.4.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線工作溶液: 吸取五種不同磷酸根標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液, 用1 0mm o l/L氫氧化鈉溶液稀釋, 制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液, 五種不同磷酸根的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度見表1。表1 五種不同磷酸根的標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度單位為毫克每升標(biāo)準(zhǔn)曲線系列12345正磷酸根0.0 00.3 0 01.0 05.0 01 0.0焦磷酸根0.0 00.3 0 01.0 05.0 01 0.0三偏磷酸根0.0 00.3 0 01.0 05.0 01 0.0三聚磷酸根0.0 00.3 0 01.0 05.0 01 0.0六偏磷酸根0.0 01.0 03.0 01 5.03 0.04 儀器和設(shè)備4.1 離子色譜儀: 包括電導(dǎo)檢測器, 配有抑制器, 帶梯度泵或淋洗液發(fā)生器, 高容量陰離子交換柱,1 0 0L定量環(huán)。4.2 食物粉碎機。4.3 超聲波清洗器: 可進(jìn)行8 0控溫,6 0H z。4.4 天平: 感量為0.1m g和1m g。4.5 離心機: 轉(zhuǎn)速80 0 0r/m i n, 溫度可調(diào)到4。4.6 0.4 5m水性濾膜( 帶針頭過濾器) 。4.7 凈化柱: 包括O n G u a r d R P柱、A g柱和N a柱1), 或等效柱。1) 給出這一信息是為了方便本標(biāo)準(zhǔn)的使用者, 并不表示對該產(chǎn)品的認(rèn)可, 如果其他等效產(chǎn)品具有相同的效果, 則可使用這些等效的產(chǎn)品。4.8 注射器:1.0m L和5.0m L。注:所有玻璃器皿使用前均需要依次用2m o l/L氫氧化鉀溶液和水分別浸泡4h, 然后用水沖洗3次5次, 晾干備用。5 分析步驟5.1 試樣制備5.1.1 魚、 肉類及其制品: 取5 0 0g魚、 肉或其制品的可食部分, 搗碎混勻。冷凍保存。5.1.2 蔬菜、 水果: 取可食部分5 0 0g, 洗凈、 晾干、 切碎、 混勻, 用組織攪拌機制成勻漿備用。5.1.3 奶粉、 乳制品飲料或飲料類: 通過反復(fù)搖晃和顛倒容器使樣品充分混勻直到使樣品均一化。G B5 0 0 9.2 5 62 0 1 63 5.1.4 固體油脂、 脂肪等樣品: 取5 0 0g的樣品研磨成均勻的泥漿狀。為避免水分損失, 研磨過程中應(yīng)避免產(chǎn)生過多的熱量。5.1.5 雜糧、 小麥粉及其制品、 果凍、 巧克力、 糖果、 膨化食品、 熟制堅果與籽類: 取5 0 0g可食部分用食物粉碎機攪勻備用。5.1.6 調(diào)味料: 粉末狀調(diào)味料通過反復(fù)搖晃和顛倒容器使樣品充分混勻; 固體大顆粒狀調(diào)味料取5 0 0g用食物粉碎機攪勻備用。5.1.7 谷類和淀粉類甜品、 米粉、 嬰幼兒配方食品及輔助食品: 通過反復(fù)搖晃和顛倒容器使樣品充分混勻直到使樣品均一化。注:在試樣制備過程中, 應(yīng)防止樣品受到污染。5.2 樣品前處理5.2.1 樣品的提取5.2.1.1 蔬菜、 水果、 果凍、 巧克力及糖果、 雜糧、 小麥粉及其制品、 奶粉、 乳制品飲料或飲料類: 稱取2.5g( 精確至0.0 0 1g, 可適當(dāng)調(diào)整試樣的取樣量) 試樣, 用5 0mm o l/L氫氧化鈉溶液洗入5 0m L比色管中混勻定容至刻度,8 0超聲提取3 0m i n, 每隔5m i n振搖一次, 保持固定相完全分散。冷卻至室溫后, 溶液經(jīng)濾紙過濾; 取濾液于4下,80 0 0r/m i n離心1 0m i n, 取上清液備用。5.2.1.2 膨化食品、 熟制堅果與籽類、 谷類和淀粉類甜品、 米粉、 嬰幼兒配方食品及輔助食品: 稱取2.5g( 精確至0.0 0 1g, 可適當(dāng)調(diào)整試樣的取樣量) 試樣, 用5 0mm o l/L氫氧化鈉溶液洗入2 5m L比色管中混勻定容至刻度,8 0超聲提取3 0m i n, 每隔5m i n振搖一次, 保持固定相完全分散。冷卻至室溫后, 溶液經(jīng)濾紙過濾; 取濾液于4下,80 0 0r/m i n離心1 0m i n, 取上清液備用。5.2.1.3 油脂、 脂肪、 調(diào)味料: 稱取1g( 精確至0.0 0 1g, 可適當(dāng)調(diào)整試樣的取樣量) 試樣, 用5 0mm o l/L氫氧化鈉溶液洗入5 0m L比色管中混勻定容至刻度,8 0超聲提取3 0m i n, 每隔5m i n振搖一次, 保持固定相完全分散。冷卻至室溫后, 溶液經(jīng)濾紙過濾; 取濾液于4下,80 0 0r/m i n離心1 0m i n, 取水相清液備用。5.2.1.4 魚、 肉類及其制品: 稱取2.5g( 精確至0.0 0 1g, 可適當(dāng)調(diào)整試樣的取樣量) 試樣, 用5 0mm o l/L氫氧化鈉溶液洗入1 0 0m L比色管中混勻定容至刻度,8 0超聲提取3 0m i n, 每隔5m i n振搖一次, 保持固定相完全分散。冷卻至室溫后, 溶液經(jīng)濾紙過濾; 取濾液于4下,80 0 0r/m i n離心1 0m i n, 取上清液備用。5.2.2 樣品的凈化取5.2.1中處理完成后的上清液約1 5m L, 通過0.4 5m水性濾膜針頭過濾器、O n G u a r d R P, 棄去前面3 m L( 如果氯離子大于1 0 0 m g/L, 則需要依次通過針頭過濾器、O n G u a r d R P、A g柱和N a柱, 棄去前7m L) , 收集后面洗脫液待測。測定前應(yīng)根據(jù)樣品含量對待測液進(jìn)行適當(dāng)稀釋。固相萃取柱使用前需進(jìn)行活化, 如使用O n G u a r d R P柱(1.0m L) 、O n G u a r d A g柱(1.0m L)和O n G u a r d N a柱(1.0m L) , 其活化過程為:O n G u a r d R P柱(1.0m L) 使用前依次用1 0m L甲醇、1 5m L水通過, 靜置活化3 0m i n。O n G u a r d A g柱(1.0m L) 和O n G u a r d N a柱(1.0m L) 用1 0m L水通過, 靜置活化3 0m i n。5.3 參考色譜條件5.3.1 色譜柱: 氫氧化物選擇性, 可兼容梯度洗脫的高容量陰離子交換柱, 如D i o n e xI o n p a cA S 1 1 - HC4mm2 5 0mm( 帶I o n p a cAG 1 1 - HC型保護(hù)柱4mm5 0mm) , 或性能相當(dāng)?shù)碾x子色譜柱。5.3.2 淋洗液: 氫氧化鉀溶液, 梯度淋洗時間及氫氧化鉀濃度見表2; 流速1.0m L/m i n。G B5 0 0 9.2 5 62 0 1 64 表2 梯度淋洗的時間及氫氧化鉀的濃度時間m i n氫氧化鉀濃度mm o l/L曲率(C u r v e)02 052 22 052 55 054 55 055 57 555 72 056 02 055.3.3 抑制器: 連續(xù)自動再生膜陰離子抑制器或等效抑制裝置。5.3.4 檢測器: 電導(dǎo)檢測器。5.3.5 柱溫箱: 柱溫箱溫度為3 0。5.3.6 進(jìn)樣體積:1 0 0L( 可根據(jù)試樣中被測離子含量進(jìn)行調(diào)整) 。5.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液從低濃度到高濃度依次進(jìn)樣, 測定相應(yīng)的電導(dǎo)檢測器的信號值, 得到各濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖。以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度(m g/L) 為橫坐標(biāo), 以峰面積(s) 或峰高為縱坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并計算線性回歸方程。參考色譜圖及保留時間見附錄B。5.5 試樣溶液的測定將試樣溶液在相同工作條件下注入離子色譜儀中, 記錄色譜圖, 以保留時間定性, 測定樣品的峰面積(s) 或峰高, 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測液中被測組份的濃度。5.6 空白試驗空白試驗系指除不加試樣外, 采用完全相同的分析步驟、 試劑和用量, 進(jìn)行平行操作。6 分析結(jié)果的表述試樣中磷酸根含量按式(1) 計算:Xi=(i-0i)V10 0 0m10 0 0(1) 式中:Xi 樣品中第i個磷酸根含量, 單位為毫克每千克(m g/k g) ;i 樣液中第i個磷酸根測定值, 單位為毫克每升(m g/L) ;0i 樣品空白液中第i個磷酸根測定值, 單位為毫克每升(m g/L) ;V 樣品提取液定容體積, 單位為毫升(m L) ;m 樣品稱樣量, 單位為克(g) ;10 0 0 換算系數(shù)。計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示, 結(jié)果保留三位有效數(shù)字。G B5 0 0 9.2 5 62 0 1 65 若分析結(jié)果需要以正磷酸根含量表示, 則見附錄A將聚磷酸根含量乘以換算系數(shù)F。樣品中總多聚磷酸根為各種多聚磷酸根換算的正磷酸根的總和。7 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的1 5%。8 其他本標(biāo)準(zhǔn)的檢出限和定量限如下:a) 膨化食品、 熟制堅果與籽類谷類和淀粉類甜品、 米粉、 嬰幼兒配方食品及輔助食品: 取樣2.5g,定容5 0m L, 測定前再稀釋2.5倍, 測定各多聚磷酸根的檢出限分別為正磷酸根1.5m g/k g, 焦磷酸根1.4m g/k g, 三聚磷酸根1.5m g/k g, 三偏磷酸根1.6m g/k g, 六偏磷酸根4.8m g/k g, 定量限分別為正磷酸根5.0m g/k g, 焦磷酸根5.0m g/k g, 三聚磷酸根5.0m g/k g, 三偏磷酸根5.0m g/k g, 六偏磷酸根1 5m g/k g。b) 蔬菜、 水果、 果凍、 巧克力及糖果、 雜糧、 小麥粉及其制品、 奶粉、 乳制品飲料或飲料類: 取樣2.5g, 定容5 0m L, 測定前再稀釋5倍, 測定各多聚磷酸根的檢出限分別為正磷酸根3 .0m g/k g,焦磷酸根2.8m g/k g, 三聚磷酸根3.0m g/k g, 三偏磷酸根3.2m g/k g, 六偏磷酸根9.6m g/k g,定量限分別為正磷酸根1 0m g/k g, 焦磷酸根1 0m g/k g, 三聚磷酸根1 0m g/k g, 三偏磷酸根1 0m g/k g, 六偏磷酸根3 0m g/k g。c) 油脂、 脂肪、 調(diào)味料: 取樣1.0g, 定容5 0m L, 魚、 肉類 取樣2.5g, 定容1 0 0m L, 測定前再稀釋2.5倍, 測