GB5009.27-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并（a）芘的測(cè)定.pdf

中 華 人 民 共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)G B5 0 0 9 .2 72 0 1 6食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并(a) 芘的測(cè)定2 0 1 6 - 1 2 - 2 3發(fā)布2 0 1 7 - 0 6 - 2 3實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)國(guó) 家 食 品 藥 品 監(jiān) 督 管 理 總 局發(fā) 布G B5 0 0 9.2 72 0 1 6 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替G B/T5 0 0 9.2 72 0 0 3 食品中苯并(a) 芘的測(cè)定 、G B/T2 2 5 0 92 0 0 8 動(dòng)植物油脂 苯并(a) 芘的測(cè)定 反相高效液相色譜法 、S C/T3 0 4 12 0 0 8 水產(chǎn)品中苯并(a) 芘的測(cè)定 高效液相色譜法 和NY/T1 6 6 62 0 0 8 肉制品中苯并(a) 芘的測(cè)定 高效液相色譜法 。本標(biāo)準(zhǔn)與G B/T5 0 0 9.2 72 0 0 3、G B/T2 2 5 0 92 0 0 8、S C/T3 0 4 12 0 0 8和NY/T1 6 6 62 0 0 8相比, 主要變化如下: 標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“ 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并(a) 芘的測(cè)定” ; 修改了方法的適用范圍; 修改了樣品前處理方法; 刪除了熒光分光光度法與目測(cè)比色法。G B5 0 0 9.2 72 0 1 61 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并(a) 芘的測(cè)定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中苯并(a) 芘的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物及其制品( 稻谷、 糙米、 大米、 小麥、 小麥粉、 玉米、 玉米面、 玉米渣、 玉米片) 、 肉及肉制品( 熏、 燒、 烤肉類) 、 水產(chǎn)動(dòng)物及其制品( 熏、 烤水產(chǎn)品) 、 油脂及其制品中苯并(a) 芘的測(cè)定。2 原理試樣經(jīng)過有機(jī)溶劑提取, 中性氧化鋁或分子印跡小柱凈化, 濃縮至干, 乙腈溶解, 反相液相色譜分離, 熒光檢測(cè)器檢測(cè), 根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間定性, 外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說明, 本方法所用試劑均為分析純, 水為G B/T6 6 8 2規(guī)定的一級(jí)水。3.1 試劑3.1.1 甲苯(C7H8) : 色譜純。3.1.2 乙腈(CH3C N) : 色譜純。3.1.3 正己烷(C6H1 4) : 色譜純。3.1.4 二氯甲烷(CH2C l2) : 色譜純。3.2 標(biāo)準(zhǔn)品苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)品(C2 0H1 2,C A S號(hào):5 0 - 3 2 - 8) : 純度9 9.0%, 或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。警告 苯并(a) 芘是一種已知的致癌物質(zhì), 測(cè)定時(shí)應(yīng)特別注意安全防護(hù)! 測(cè)定應(yīng)在通風(fēng)柜中進(jìn)行并戴手套, 盡量減少暴露。如已污染了皮膚, 應(yīng)采用1 0%次氯酸鈉水溶液浸泡和洗刷, 在紫外光下觀察皮膚上有無藍(lán)紫色斑點(diǎn), 一直洗到藍(lán)色斑點(diǎn)消失為止。3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.3.1 苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 0 0g/m L) : 準(zhǔn)確稱取苯并(a) 芘1m g( 精確到0.0 1m g) 于1 0m L容量瓶中, 用甲苯溶解, 定容。避光保存在05的冰箱中, 保存期1年。3.3.2 苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)中間液(1 .0g/m L) : 吸取0 .1 0m L苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 0 0g/m L) , 用乙腈定容到1 0m L。避光保存在05的冰箱中, 保存期1個(gè)月。3.3.3 苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)工作液: 把苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)中間液(1 .0g/m L) 用乙腈稀釋得到0 .5n g/m L、1 .0n g/m L、5 .0n g/m L、1 0 .0n g/m L、2 0.0n g/m L的校準(zhǔn)曲線溶液, 臨用現(xiàn)配。G B5 0 0 9.2 72 0 1 62 3.4 材料3.4.1 中性氧化鋁柱: 填料粒徑7 5m1 5 0m,2 2g,6 0m L。注:空氣中水分對(duì)其性能影響很大, 打開柱子包裝后應(yīng)立即使用或密閉避光保存。由于不同品牌氧化鋁活性存在差異, 建議對(duì)質(zhì)控樣品進(jìn)行測(cè)試, 或做加標(biāo)回收試驗(yàn), 以驗(yàn)證氧化鋁活性是否滿足回收率要求。3.4.2 苯并(a) 芘分子印跡柱:5 0 0m g,6m L。注:由于不同品牌分子印跡柱質(zhì)量存在差異, 建議對(duì)質(zhì)控樣品進(jìn)行測(cè)試, 或做加標(biāo)回收試驗(yàn), 以驗(yàn)證是否滿足要求。3.4.3 微孔濾膜:0.4 5m。4 儀器和設(shè)備4.1 液相色譜儀: 配有熒光檢測(cè)器。4.2 分析天平: 感量為0.0 1m g和1m g。4.3 粉碎機(jī)。4.4 組織勻漿機(jī)。4.5 離心機(jī): 轉(zhuǎn)速40 0 0r/m i n。4.6 渦旋振蕩器。4.7 超聲波振蕩器。4.8 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或氮?dú)獯蹈裳b置。4.9 固相萃取裝置。5 分析步驟5.1 試樣制備、 提取及凈化5.1.1 谷物及其制品預(yù)處理: 去除雜質(zhì), 磨碎成均勻的樣品, 儲(chǔ)于潔凈的樣品瓶中, 并標(biāo)明標(biāo)記, 于室溫下或按產(chǎn)品包裝要求的保存條件保存?zhèn)溆?。提? 稱取1g( 精確到0.0 0 1g) 試樣, 加入5m L正己烷, 旋渦混合0.5m i n,4 0 下超聲提取1 0m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 轉(zhuǎn)移出上清液。再加入5m L正己烷重復(fù)提取一次。合并上清液, 用下列2種凈化方法之一進(jìn)行凈化。凈化方法1: 采用中性氧化鋁柱, 用3 0m L正己烷活化柱子, 待液面降至柱床時(shí), 關(guān)閉底部旋塞。將待凈化液轉(zhuǎn)移進(jìn)柱子, 打開旋塞, 以1m L/m i n的速度收集凈化液到茄形瓶, 再轉(zhuǎn)入5 0m L正己烷洗脫, 繼續(xù)收集凈化液。將凈化液在4 0下旋轉(zhuǎn)蒸至約1m L, 轉(zhuǎn)移至色譜儀進(jìn)樣小瓶, 在4 0氮?dú)饬飨聺饪s至近干。用1m L正己烷清洗茄形瓶, 將洗滌液再次轉(zhuǎn)移至色譜儀進(jìn)樣小瓶并濃縮至干。準(zhǔn)確吸取1m L乙腈到色譜儀進(jìn)樣小瓶, 渦旋復(fù)溶0.5m i n, 過微孔濾膜后供液相色譜測(cè)定。凈化方法2: 采用苯并(a) 芘分子印跡柱, 依次用5m L二氯甲烷及5m L正己烷活化柱子。將待凈化液轉(zhuǎn)移進(jìn)柱子, 待液面降至柱床時(shí), 用6m L正己烷淋洗柱子, 棄去流出液。用6m L二氯甲烷洗脫并收集凈化液到試管中。將凈化液在4 0下氮?dú)獯蹈? 準(zhǔn)確吸取1m L乙腈渦旋復(fù)溶0.5m i n, 過微孔濾膜后供液相色譜測(cè)定。5.1.2 熏、 燒、 烤肉類及熏、 烤水產(chǎn)品預(yù)處理: 肉去骨、 魚去刺、 貝去殼, 把可食部分絞碎均勻, 儲(chǔ)于潔凈的樣品瓶中, 并標(biāo)明標(biāo)記, 于G B5 0 0 9.2 72 0 1 63 -1 6-1 8冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｌ崛? 同5.1.1中提取部分。凈化方法1: 除了正己烷洗脫液體積為7 0m L外, 其余操作同5.1.1中凈化方法1。凈化方法2: 操作同5.1.1中凈化方法2。5.1.3 油脂及其制品提取: 稱取0.4g( 精確到0.0 0 1g) 試樣, 加入5m L正己烷, 旋渦混合0.5m i n, 待凈化。注:若樣品為人造黃油等含水油脂制品, 則會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象, 需要40 0 0r/m i n離心5m i n, 轉(zhuǎn)移出正己烷層待凈化。凈化方法1: 除了最后用0.4m L乙腈渦旋復(fù)溶試樣外, 其余操作同5.1.1中的凈化方法1。凈化方法2: 除了最后用0.4m L乙腈渦旋復(fù)溶試樣外, 其余操作同5.1.1中的凈化方法2。試樣制備時(shí), 不同試樣的前處理需要同時(shí)做試樣空白試驗(yàn)。5.2 儀器參考條件a) 色譜柱:C1 8, 柱長(zhǎng)2 5 0mm, 內(nèi)徑4.6mm, 粒徑5m, 或性能相當(dāng)者;b) 流動(dòng)相: 乙腈+水=8 8+1 2;c) 流速:1.0m L/m i n;d) 熒光檢測(cè)器: 激發(fā)波長(zhǎng)3 8 4n m, 發(fā)射波長(zhǎng)4 0 6n m;e) 柱溫:3 5;f) 進(jìn)樣量:2 0L。5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別注入液相色譜中, 測(cè)定相應(yīng)的色譜峰, 以標(biāo)準(zhǔn)系列工作液的濃度為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo), 得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖見圖A.1。5.4 試樣溶液的測(cè)定將待測(cè)液進(jìn)樣測(cè)定, 得到苯并(a) 芘色譜峰面積。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算試樣溶液中苯并(a)芘的濃度。6 分析結(jié)果的表述試樣中苯并(a) 芘的含量按式(1) 計(jì)算:X=Vm10 0 010 0 0(1) 式中:X 試樣中苯并(a) 芘含量, 單位為微克每千克(g/k g) ; 由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣品凈化溶液濃度, 單位為納克每毫升(n g/m L) ;V 試樣最終定容體積, 單位為毫升(m L) ;m 試樣質(zhì)量, 單位為克(g) ;10 0 0 由n g/g換算成g/k g的換算因子。結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后一位。7 精密