GB-T17099-1997兒童少年血紅蛋白篩檢.pdf

I C S 1 1 . 0 2 0C 5 6巧旨中 華 人 民 共 和 國 國 家 標(biāo) 準(zhǔn)G B / T 1 7 0 9 9 一 1 9 9 7兒童少年血紅蛋白篩檢S c r e e n i n g o f h e m o g l o b in f o r c h il d r e n a n d a d o l e s c e n t s1 9 9 7 一 1 1 一 1 1 發(fā)布19 9 8 一 1 2 一 0 1實 施國家技術(shù)監(jiān)督局，*中 華 人 民 共 和 國 衛(wèi) 生 部“一 GB / T 17 099 一 1 997前言 貧血是兒童少年比較常見的營養(yǎng)問題， 主要是由缺鐵所致。貧血對兒童少年生長發(fā)育不利。 特別是對其體力， 智力和免疫力等發(fā)育產(chǎn)生不良影響。防治貧血是兒童少年保健工作的重要任務(wù)之一。 由于各種類型的貧血最終必然導(dǎo)致血紅蛋白濃度下降， 血紅蛋白值測定是篩檢和診斷貧血最重要的指標(biāo)， 確定血紅蛋白正常值標(biāo)準(zhǔn)對篩檢貧血和評價防治效果十分重要。 某些國家和地區(qū)只有血紅蛋白推薦值， 國內(nèi)外尚無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。 我國多年來多采用 WH O1 9 7 2年提出的推薦值， 但是， 近年不少國內(nèi)外學(xué)者指出該推薦標(biāo)準(zhǔn)比較粗， 不符合兒童少年生長發(fā)育規(guī)律， 呼吁作出改進。 因此， 制定適合我國兒童少年實際情況的血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)實屬必要。 本標(biāo)準(zhǔn)從 1 9 9 8年 1 2 月 1日 起實施， 1 9 9 8 年 1 2月1日 起有關(guān)兒童少年血紅蛋白篩檢工作， 均應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由北京醫(yī)科大學(xué)兒童青少年衛(wèi)生研究所、 河北省衛(wèi)生防疫站、 山木省衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)起草。 本標(biāo)準(zhǔn)的主要起草人: 謝華麗、 楊育林、 霍卓平、 劉繡云。 本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托技術(shù)歸口單位中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院負(fù)責(zé)解釋。中 華 人 民 共 和 國 國 家 標(biāo) 準(zhǔn)兒童少年血紅蛋白篩檢c B / T 1 7 0 9 9 一1 9 9 7S c r e e n i n g o f h e mo g l o b i n f o r c h i l d r e n a n d a d o l e s c e n t s范 圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了兒童少年貧血篩檢的血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)和血紅蛋白測定方法. 本標(biāo)準(zhǔn)適用于海拔1 0 0 0 m以下地區(qū)6 1 7歲漢族兒童少年的貧血篩檢。 對于海拔高于1 0 0 0 m的地區(qū)， 可參照每增加 1 0 0 0 m血紅蛋白正常值下限在本標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上增加 4 。少數(shù)民族兒童可參照使用。2定義 本標(biāo)準(zhǔn)采 用下 列定 義。2 . 1 貧血a n a e mia 指外周血中單位容積內(nèi)血紅蛋白濃度、 紅細(xì)胞計數(shù)及( 或) 紅細(xì)胞壓積低于相同年齡、 性別和地區(qū)的正常標(biāo)準(zhǔn)。血紅蛋白濃度是篩檢貧血最簡單最有意義的指標(biāo)。2 , 2 血紅蛋白濃度正常 值下限 l o w l i m i t o f n o r m a l c o n c e n t r a t io n o f h e m o g l o b in 血紅蛋白濃度正常值是一個范圍值。通常將健康及營養(yǎng)狀況良 好人群血紅蛋白濃度的第三或者第五百分位數(shù)作為血紅蛋白正常值下限.3兒1 k少年血紅蛋 白正常值下 限兒童少年血紅蛋白正常值下限見表1 : 表1 兒童少年血紅蛋臼正常值 下限年 歲1性別血 紅 ， 白 正 常 值 下 限 .g / L110120115130120:二男 、 女1 5 - 1 9 】女健康檢查中發(fā)現(xiàn)血紅蛋白濃度低于此正常值下限者初篩為貧血。男女男3 . 24血紅蛋 白側(cè)定方法 ( 見附錄 A)國家技術(shù)監(jiān)份局 1 9 9 7 一 1 1 一 ， 1 批準(zhǔn)19 98 一 12 一 01實施cB/ T 170 99 一 1 997 附錄A ( 標(biāo)準(zhǔn)的附錄)血紅蛋 白測定方法4 l 取血 方法 毛細(xì)管采 血。A l . ， 器材 7 5 0 o 的酒精棉球， 消毒的干棉球和三棱針， 經(jīng)水銀標(biāo)定合格的血紅蛋自吸骨或定量毛細(xì)管。A l . 2 采血部位 左手無名指末端。不能采耳垂血， 耳垂血的血紅蛋白濃度高于指血A l . 3 針刺準(zhǔn)備 用溫水洗手， 擦干后， 用酒精棉球消毒， 待干后始可刺針， 以避免殘余酒精稀釋血樣A l . 4 針刺程序 用三棱針向無名指末端垂直穿刺， 深約 2 -3 m m， 使血流出. 如血液不易流出， 可在局部稍加壓力，但不能用力擠壓。 用干棉球擦去第一滴血， 然后用血紅蛋白吸管吸取需要的血量。 取血后用干棉球壓針孔， 直到出血停止。針刺后2 h內(nèi)， 保護針孔不受污染。A l . 5 注意事項 采血前勿劇烈運動， 因劇烈運動后血紅蛋白濃度增加。勿大量飲水， 大量飲水可使血紅蛋白濃度暫時下降。A 2 血紅蛋白測定方法 氰化 高鐵 血紅蛋白法 。A2 . 1原理 在溶液中， 血紅蛋白的兩價鐵原子經(jīng)高鐵獻化鉀氧化為三價鐵， 形成高鐵血紅蛋白。高鐵血紅蛋白與叔化鉀的佩離子起反應(yīng)， 生成氰化高鐵血紅蛋白。氛化高鐵血紅蛋白極為穩(wěn)定， 在波長 5 4 0 n m處， 其吸光度和濃度成正比， 用光電比色計或分光光度計測定吸光度， 然后從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可查得血紅蛋白值。 加人非離子表面活化劑可增快紅細(xì)胞溶解， 并使由于血脂蛋白沉淀所致的混濁減少到最低限度。A 2 . 2 試劑和氰化高鐵血紅蛋白稀釋液的配制 所用試劑均需分析純 。精確稱取 : 氰化鉀( K C N ) ( 劇毒) 0 . 0 5 g , 高鐵氰化鉀 K , F e ( C N )0 . 2 0 0 g , 磷酸 二氫鉀( K H 2 P O , ) O . 1 4 0 g , 以上試劑用2 0 0 - 3 0 0 mt燕餾水溶解， 轉(zhuǎn)人1 1容量瓶中， 加人 1 m L非離子表面恬化劑( T r it o n X -1 0 0 ) ， 然后用燕餾水稀釋至 i f ， 混勻后儲存在棕色玻璃瓶中。避光。 本稀釋液應(yīng)清晰透明， 呈淡黃色， p H值在 7 . 0 -7 . 4之問。本試液在 5 4 0 n m波長處， 以蒸餾水作空白校零. 吸光度應(yīng)為零。 在密閉棕色瓶中， 試液可保存一個月， 但如出現(xiàn)混濁應(yīng)棄去勿用。 稀釋液不得冷凍， 冷凍可使高鐵氰化鉀破壞分解， 溶液退色A 2 . 3 儀器 光電 比色 計或分光光度計 。 每次測定血紅蛋白以前均需用氰化高鐵血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液校正， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 為保證電壓的穩(wěn)定應(yīng)加穩(wěn)壓器% 2 - 4操作程序 a )于 I O mI帶塞 比色管 中加 5 M氰化鐵血紅蛋 白稀釋 液c B / T 1 7 0 9 9 一1 9 9 7 切 用血紅蛋 白吸管準(zhǔn)確吸取 0 . 0 2 m1血樣 ， 管內(nèi)不得有氣泡 ， 擦 去管外血液。發(fā)現(xiàn)管 內(nèi)有細(xì)微血絲者 ， 說 明血液凝 固應(yīng)棄去洗凈重采。 c )置吸管于稀釋液中， 使管尖在液面下， 輕輕自管中推出血液， 用稀釋液沖洗吸管三次， 蓋緊比色管塞， 顛倒或旋轉(zhuǎn)混勻5 6 次， 使血紅蛋白與稀釋液充分混勻。 d )將血紅蛋白溶液放置 1 0 min以上， 使其反應(yīng)完全。溶液不應(yīng)混濁或有沉淀。 e )用分光光度計或光電比色計， 于 5 4 0 n m波長處， 以稀釋液為空白， 測定樣品吸光度， 查標(biāo)準(zhǔn)曲線得結(jié)果; 或分別測定已知濃度血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液和待測樣品的吸光度. 然后按下列公式計算結(jié)果。 f ) 計算公式 A( g / L ) =B / C X D式中: A 待測樣品血紅蛋白的濃度， 9 / L; B 已知濃度血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度; C 待測樣品的吸光度; D血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液濃度. g / L ,A 2 . 5 當(dāng)測試大量樣品時， 每小時應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液測試一次， 以檢查儀器的穩(wěn)定性。A 2 . 6 血樣放人稀釋液后， 應(yīng)將蓋塞緊， 置暗處， 可存放 1 2 h 。如需儲存超過 1 2 h ， 應(yīng)放在4 -1 0 C冰箱中， 但不宜超過一周。自冰箱中取出后， 應(yīng)使管內(nèi)溶液升至室溫. 搖勻后測定。A 2 . 7 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 a ) 佩化高鐵血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液 應(yīng)采用血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化國際委員會鑒定合格的標(biāo)準(zhǔn)液。 此標(biāo)準(zhǔn)液顏色穩(wěn)定， 在 4 C 左右冰箱中放置一年， 吸光度無任何改變. 但不可冰凍。 b )常用的標(biāo)準(zhǔn)液有兩種， 一種可直接測得吸光度， 另一種則需稀釋， 稀釋