TSLC1與星形細胞腫瘤生物學行為及預后關(guān)系研究.doc

tslc1 與星形細胞腫瘤生物學行為及預后關(guān)系研究胡泉，張建生，李強，楊初蔚 蘭州大學第二醫(yī)院神經(jīng)外科,蘭州（730030） e-mail: 摘要：目的：探討 tslc1 與星形細胞腫瘤生物學行為及與患者預后的關(guān)系，同時研究其與其它因子（n-鈣粘素和 ki67）的關(guān)系。方法應用免疫組化 sp 法檢測 71 例星形細胞腫 瘤組織中 tslc1、n-cd 和 ki67 的表達。結(jié)果：、級星形細胞腫瘤較-級，tslc1 和 n-cd 的平均光密度小，差異有統(tǒng)計學(p0.01)；而 ki67 平均光密度相反，差異有統(tǒng)計學 (p0.01)。在級與級之間比較 ki67 的表達有統(tǒng)計學意義(p0.05)。tslc1 與 n-cd 二者 之間的表達呈正相關(guān)(rs=0.601,p0.01)，與 ki67 呈負相關(guān)(rs=-0.460,p0.05)。在級、級 星形細胞腫瘤中，tslc1 陽性表達較陰性表達患者中位生存期長，差異有統(tǒng)計學意義（p=0.0093）。結(jié)論：tslc1,n-cd 和 ki67 在星形細胞腫瘤的進展過程中起重要作用，對評 估星形細胞腫瘤的惡性度及預后有重要意義。關(guān)鍵詞：tslc1; n-鈣粘素; ki67; 星形細胞腫瘤; 免疫組化星形細胞腫瘤是顱內(nèi)最常見的腫瘤1，對于其發(fā)生發(fā)展機理以及治療的研究仍然是當前 研究的一個熱點。本試驗采用免疫組化檢測不同腫瘤學分級星形細胞腫瘤中肺癌腫瘤阻抑基 因（tumor suppressor in lung cancer-1，tslc1）、n-鈣粘素（neural-cadherin，n-cd）和 ki67 的表達，探討三者和人腦星形細胞腫瘤惡性度及預后的關(guān)系，以期為星形細胞腫瘤的診斷及 預后提供理論基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1臨床資料收集 2002 年 3 月至 2007 年 2 月 71 例手術(shù)切除標本。其中男性 40 例，女性 31 例，年 齡 1868 歲，所有患者術(shù)前均未行放療或化療。根據(jù) 2000 年 who 中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類 和分級標準2:級毛細胞型星形細胞瘤 3 例；級彌漫型星形細胞瘤 25 例；級間變型星 形細胞瘤 15 例；級膠質(zhì)母細胞瘤 28 例。1.2方法標本經(jīng)中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，采用免疫組化 sp 法，檢測 tslc1、 n-鈣粘素和 ki67 的表達。tslc1 定位于胞質(zhì)、胞漿或胞膜；n-cd 定位在細胞膜；ki67 陽 性定位在細胞核，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。每張切片在放大 400 倍鏡下隨機讀取 1000 個細 胞，陽性細胞5% 為陽性表達。采用 hpias-1000 多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對 tslc-1、n-cd 和 ki67 蛋白染色結(jié)果進行定量觀察。每張切片隨機挑選不相重疊的 5 個視野（400），描繪出目標細胞，獲得平均光密度值，以反映 tslc1、n-cd 和 ki67 表達相對含 量。1.3統(tǒng)計學方法選用 spss13.0 軟件進行單因素方差分析、spearman 等級相關(guān)分析，應用 kaplan-meier法進行生存分析。2 結(jié)果2.1tslc1、n-cd、ki67 的表達- 4 -tslc1、n-cd 表達的平均光密度（mod）值隨病理學分級升高而遞減，而 ki67 相反。級、級星形細胞腫瘤與-級比較，差異有統(tǒng)計學(p0.01)；tslc1、n-cd 的表達在 級與級之間比較無統(tǒng)計學意義，而 ki67 的表達有統(tǒng)計學意義(p0.05)。tslc1 與 n-cd 二者之間的表達呈正相關(guān)(rs=0.601,p0.01)，與 ki67 呈負相關(guān)(rs=0.460,p0.05)(見表)。表 1 tslc1、n-cd 和 ki67 在星形細胞腫瘤組織中表達（ x s ）組別例數(shù)tslc1n-cdki67-280.27060.0130.31820.0160.36070.072150.23160.010*0.26550.007*0.47320.073*280.21850.018*0.23670.006*0.53080.022* 與組-比較，p0.01； 與組比較，p0.052.2 生存分析結(jié)果tslc1 在級、級星形細胞腫瘤中陽性表達患者中位生存期為 20（8.6,21.5）月，陰 性表達患者中位生存期為 10(3.25,11.75)月，兩者比較，差異有統(tǒng)計學意義（p=0.0093）。(見 圖)1.0.8生存.率6.4 tslc1(-).2tslc1(+)0.0010 2030 40 50 60生存時間（月）星形細胞腫瘤-級中tslc1陽性與陰性表達的生存率比較圖 1 星形細胞腫瘤-級中 tslc1 陽性與陰性表達的生存率比較3 討論星形細胞腫瘤來源于神經(jīng)上皮的腫瘤，是顱內(nèi)最常見的腫瘤。其多呈浸潤或侵襲性生長， 其侵襲性生長的特點給臨床治療帶來了很大困難，同時它也是臨床難以治療的最根本原因之一1。在星形細胞腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中大多數(shù)含有粘附分子或其培基的變化,粘附分子可以介 導瘤細胞和內(nèi)皮細胞相互識別和粘附，以促進瘤細胞離散和游走,并在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用3。tslc1 是新近證實的一種新腫瘤抑制基因4，屬于免疫球蛋白超家族5，主要存在于腦 組織中。研究認為 tslc1 與細胞粘附有關(guān)5, 6，是一種細胞粘附分子，參與細胞與細胞之間 的相互作用，tslc1 基因的表達可維持上皮細胞之間的緊密連接，抑制腫瘤的浸潤及轉(zhuǎn)移7。 本研究發(fā)現(xiàn)：隨著星形細胞腫瘤惡性程度增加，tslc1 表達的平均光密度值降低，這提示 在星形細胞腫瘤的惡性進展過程中，tslc1 發(fā)揮著重要作用，可能與星形細胞腫瘤的侵襲 浸潤行為有關(guān)。在級、級星形細胞腫瘤中，tslc1 陽性表達強度比陰性表達患者中位 生存期長，兩者比較，差異有統(tǒng)計學意義（p=0.0093）。因此，在星形細胞腫瘤組織中檢測 tslc1，對于分析和判斷其瘤組織生長及評估預后有重要意義。n-cd 是另一種跨膜粘附分子，主要見于成人肌肉和神經(jīng)組織中，其在星形細胞腫瘤細 胞間的粘附過程中也起重要作用8。本實驗結(jié)果顯示，隨著腫瘤病理學分級的增高 n-cd 表 達降低，-級與-級腫瘤相比差異顯著(p0.01)，而級與級比較無統(tǒng)計學意義， 且其與 tslc1 之間的表達呈正相關(guān)(rs=0.601,p0.01)。這提示 tslc1 與 n-cd 在細胞與細胞 粘附過程中可能起協(xié)同作用，共同維持細胞與細胞之間的緊密連接，抑制腫瘤的浸潤。ki-67 抗原是與細胞增殖相關(guān)的核抗原，與細胞增殖核抗原(pcna)相比，半衰期短，細 胞脫離增殖周期后迅速降解，更能反映腫瘤的惡性程度及患者預后9。本研究結(jié)果顯示， ki-67 在星形細胞腫瘤組織中的表達呈現(xiàn)非均一性表現(xiàn)，在同樣條件下，ki-67 的平均光密 度值隨星形細胞腫瘤病理級別升高而升高，各組之間差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)，且與 tslc1 表達呈負相關(guān)(rs=-0.460,p0.05)，這說明 tslc1 的缺失與星形細胞腫瘤細胞周期調(diào) 節(jié)的異常有關(guān)，從而進一步證實了 tslc1 抑制瘤細胞增殖之作用。tslc1 作為一種新的抑癌基因參與細胞間粘附、抑制瘤細胞增殖。它在星形細胞腫瘤 中表達異常，主要表現(xiàn)為抑制瘤細胞增殖。但其發(fā)揮腫瘤抑制作用的分子機制尚不清楚，故 而，tslc1 在腦部生長調(diào)節(jié)機制是目前研究之重點。tslc1 與 n-cd、ki67 關(guān)系密切，提示 在星形細胞腫瘤發(fā)展過程中，三者都發(fā)揮著重要作用。隨著臨床和病理研究的進一步深入， 對星形細胞腫瘤進行 tslc1、n-cd、ki67 的聯(lián)合檢測，在判定其惡性度和預后可能有更重 要的意義。參考文獻1 趙繼宗 主編.顱腦腫瘤外科學m.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：208-237.2 biernat w. 2000 world health organization classification of tumors of the nervous systemj. pol j pathol. 2000,51(3):107-14.3 biederer t, sara y, mozhayeva m et al. syncam,a synaptic adhesion molecule that drives synapse assemblyj.science,2002,297:525-531.4 kuramochi m, fukuhara h, nobukuni t,et al.tslc1 is a tumor 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negative correlated with ki67 expression(rs=0.460,p0.05). themedian of tslc1 positive expression was longer than that of