保健食品毒理與功能檢驗要求.ppt

保健食品申報安全性與功能檢驗,黃 俊 明 （廣東省疾病預防控制中心） 廣州 2008.6.6,主要內(nèi)容,一、毒理、功能試驗依據(jù)的法規(guī)和標準 二、毒理學安全性評價方法和檢驗要求 三、功能評價方法和檢驗要求 四、檢驗過程常見問題 五、保健食品評審動向,相關(guān)管理法規(guī)和標準,國務院: 中華人民共和國食品衛(wèi)生法 (1995) 衛(wèi)生部：保健食品管理辦法（1996） 衛(wèi)生部：新資源食品衛(wèi)生管理辦法（1990） 衛(wèi)生部：保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范(2003） 衛(wèi)生部：食品安全性毒理學評價程序和方法 (GB15193.1-12.2003） SFDA： 保健食品注冊管理辦法（2005）,相關(guān)管理法規(guī)和標準,中華人民共和國食品衛(wèi)生法 保健食品：表明具有特定保健功能的食品 第二十二條：保健食品必須報批 第二十三條：保健食品不得有害健康 功能不得虛假,相關(guān)管理法規(guī)和標準,保健食品管理辦法規(guī)定： 保健食品必須 經(jīng)必要的動物和/或人群功能試驗 原料及產(chǎn)品無急性、亞急性、慢性危害 提交 “毒理學安全性評價報告” “保健功能評價報告”,相關(guān)管理法規(guī)和標準,使用的原、輔料不是可用于保健食品和食品的， 參照新資源食品衛(wèi)生管理辦法做安全性試驗，如： 動物、植物、微生物， 加工過程中使用的微生物新品種， 動物、植物、微生物中分離的食品物料， 采用新工藝導致原有成分或結(jié)構(gòu)改變的食品原料或食品成份。,新資源食品衛(wèi)生管理辦法,安全性評價內(nèi)容： 來源、食用歷史、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標準、主要成分及含量、推薦量、毒理學試驗 微生物產(chǎn)品的菌種鑒定、毒力鑒定、保存條件、遺傳穩(wěn)定性 其他科學文獻資料,相關(guān)管理法規(guī)和標準,保健食品注冊管理辦法對保健食品的定義：具有特定保健功能或者以補充維生素、礦物質(zhì)為目的的食品。 具有調(diào)節(jié)機體功能，不以治療疾病為目的食品 對人體不產(chǎn)生任何急性、亞急性或者慢性危害的食品,保健食品注冊管理辦法,保健食品的試驗：申請人送樣給SFDA確定的檢驗機構(gòu)進行相關(guān)的試驗 試驗種類：毒理學安全性試驗、功能學試驗、功效成分或標志性成分檢測、衛(wèi)生學試驗、穩(wěn)定性試驗 試驗項目：毒理分四個階段試驗，功能分27個試驗 功能不在公布范圍內(nèi)：自行進行動物和人體試食試驗，檢驗機構(gòu)對方法和結(jié)果進行驗證。 營養(yǎng)素補充劑：共27個種類，推薦使用量范圍內(nèi)，不做毒理和功能，做功效成分、衛(wèi)生學、穩(wěn)定性試驗,保健食品注冊管理辦法,試驗與檢驗： 功能和毒理學試驗，按SFDA指定的方法：保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范2003年版 檢驗機構(gòu)的責任：科學規(guī)范、公開、公正、公平，不得出具虛假報告。 樣品的檢測：應在保質(zhì)期內(nèi)進行 檢驗機構(gòu)的法律責任：第九十九條、第一百條、第一百零一條。,保健食品注冊管理辦法,保健食品的試驗和檢驗從2005年7月1日起按保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范2003年版食品檢驗有關(guān)標準等的相關(guān)規(guī)定和要求進行 1、安全性毒理學檢驗： 按保健食品安全性毒理學評價程序和檢驗方法對送檢樣品進行的以檢驗它的食用安全性為目的動物試驗，必要時可進行人體試食試驗。,保健食品注冊管理辦法,2、功能學檢驗： 動物檢驗：檢驗機構(gòu)按SFDA頒布的或企業(yè)提供的保健食品功能學評價程序和檢驗方法，對送檢的樣品進行保健功能的動物試驗 人體試食試驗：檢驗機構(gòu)按SFDA頒布的或企業(yè)提供的保健食品按人體試食評價程序和檢驗方法，對送檢的樣品進行人體試食試驗（包括安全性指標觀察）。,保健食品注冊管理辦法,3、功效成分或標志性成分檢測：檢驗機構(gòu)按SFDA頒布的或企業(yè)提供的檢驗方法，對送檢的樣品的功效成分或標志性成分的含量及其含量變化進行的檢測。 4、衛(wèi)生學檢驗：檢驗機構(gòu)SFDA頒布的或企業(yè)提供的食品衛(wèi)生檢驗方法，對送檢樣品進行衛(wèi)生學及產(chǎn)品質(zhì)量有關(guān)指標（除功效成分和標示成分以外）的測定。,保健食品注冊管理辦法,5、穩(wěn)定性檢驗：檢驗機構(gòu)按有關(guān)標準對樣品的衛(wèi)生學及其產(chǎn)品質(zhì)量有關(guān)指標（除功效成分和標示成分）在保質(zhì)期內(nèi)變化情況進行檢測。 6、樣品檢驗：檢驗機構(gòu)按照申請人申報的質(zhì)量標準，對樣品進行全項目檢驗 7、復核檢驗：檢驗機構(gòu)對申請人申報的質(zhì)量標準中的功效成分或標志性成分的檢測方法進行的復核檢驗。,保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范,一、對檢驗樣品的要求 二、安全性毒理學評價程序和檢驗方法 三、功能學評價程序和檢驗方法,對送檢樣品的要求,對送檢樣品的一般要求： 1、樣品必須是符合既定的配方、生產(chǎn)工藝及質(zhì)量標準的規(guī)格化定型產(chǎn)品。（至少是經(jīng)中試的定型產(chǎn)品） 2、送檢單位應提供受試樣品的配方，及樣品的物理、化學性質(zhì)（包括化學結(jié)構(gòu)、純度、穩(wěn)定性等）及相關(guān)的資料。,對送檢樣品的要求,3、應提供功效成分或特征成分、營養(yǎng)成分的名稱及含量。 4、送檢者應提供詳細的生產(chǎn)工藝。 5、提供產(chǎn)品使用說明書。 6、提供與申請功能相關(guān)的科學文獻資料或試制過程的實驗參考資料。,對送檢樣品的要求,不同試驗對樣品的要求： 一、毒理學試驗送檢樣品的要求 二、功能學動物試驗送檢樣品的要求 三、功能學人體試食試驗的要求 四、樣品推薦量較大樣品的要求,對送檢樣品的要求,一、毒理學檢驗送檢樣品要求： 1、送檢樣品批號：應為三批衛(wèi)生學檢驗樣品中的任一批樣品，同時毒理、功能、人體試驗的批號要一致。 2、送檢樣品數(shù)量： 30天喂養(yǎng)樣品數(shù)量 (推薦劑量60) 200動物總重飼養(yǎng)天數(shù) 90天喂養(yǎng)樣品數(shù)量 (推薦劑量60) 600動物總重飼養(yǎng)天數(shù) 不足2kg按2kg送樣。需要增加或減少毒理學試驗項目時，適當增加或減少樣品量。,毒理學試驗送檢樣品要求,3、液體產(chǎn)品要求：可送定型產(chǎn)品或產(chǎn)品濃縮液，濃縮液應注明濃縮倍數(shù)、樣品批次、密度。 4、固體產(chǎn)品要求：樣品應先粉碎，過100目篩； 若是去輔料應注明去除何種輔料并提供加蓋公章的證明。 5、酒類產(chǎn)品要求：可送定型產(chǎn)品或濃縮液，需要濃縮的樣品，乙醇度低于15%（v/v）時，濃縮后要將乙醇度恢復至市售產(chǎn)品的濃度，乙醇度高于15%（v/v）時，濃縮后要將乙醇度調(diào)整至15%濃度。不需要濃縮的樣品，送定型產(chǎn)品。同時還要提供產(chǎn)品的酒基。,毒理學試驗送檢樣品要求,6、益生菌類產(chǎn)品：按保質(zhì)期分批送樣；需濃縮時，最好是提供經(jīng)低溫干燥濃縮的濃縮樣品。 7、含大豆蛋白、乳清蛋白產(chǎn)品：應提供30天喂養(yǎng)用量的去大豆蛋白、乳清蛋白樣品。 8、高膨脹度產(chǎn)品： 應說明樣品的膨脹系數(shù)。 9、非水溶性產(chǎn)品：應說明合適的溶劑。 10、推薦量較大的樣品: 如達到 6克/日 或 12ml /日以上，已超過動物的灌胃量、飼料的摻入量，考慮推薦量的100 倍用量設計問題，可提供去輔料或濃縮的樣品，并提供一定數(shù)量的定型產(chǎn)品。,功能學動物試驗送檢樣品要求,二、功能檢驗送檢樣品要求： 1、送檢樣品批號：應為三批衛(wèi)生學檢驗樣品中的任一批樣品，并且動物功能試驗樣品要與毒理、人體試驗樣品批號一致。 2、送檢樣品數(shù)量：樣品數(shù)量(推薦劑量60) 45動物總重飼養(yǎng)天數(shù) 或按簡便計法：樣品數(shù)量每天最大推薦量m倍(小鼠m=200，大鼠m=500)。 3、樣品包裝要求：應送定型包裝樣品。液體產(chǎn)品盡可能不要濃縮，固體產(chǎn)品盡可能不要去輔料。,功能學動物試驗送檢樣品要求,4、含糖量超過30%的樣品：應說明含糖量，并提供加蓋公章的證明。 5、酒類產(chǎn)品：應送市場銷售包裝樣品，樣品一般盡可能不要不濃縮，同時要送該產(chǎn)品的酒基。應說明乙醇含量，并提供加蓋公章的證明。 、其他類別產(chǎn)品的要求：參照毒理學試驗送檢樣品要求，但盡可能送原樣。,功能學評價人體試食試驗,人體試食試驗送檢樣品要求： 1、樣品必須經(jīng)毒理學試驗安全無毒，不含興奮劑或違禁藥，經(jīng)衛(wèi)生學檢驗合格。 2、提供定型包裝產(chǎn)品。 、樣品數(shù)量：人體推薦劑量試食人數(shù)服用天數(shù)2,毒理學評價程序和檢驗方法,毒理學試驗四個階段內(nèi)容 第一階段：急性毒性試驗（LD50、MTD）。 第二階段：遺傳毒性試驗（Ames、微核和精子畸形試驗），30天喂養(yǎng)試驗，傳統(tǒng)致畸試驗。 第三階段：亞慢性毒性試驗-90天喂養(yǎng)試驗、 繁殖試驗、代謝試驗 第四階段：慢性毒性試驗（包括致癌試驗）,毒理學評價試驗的選擇原則,一、送檢樣品的原料和輔料的情況 1、原料：形成保健食品的功效成分和配方的初始物料。輔料：生產(chǎn)保健食品所用的賦形劑和附加劑。 2、保健食品原料應當對人體健康安全無害，限制使用的物質(zhì)不得超過國家規(guī)定的準許使用量。,毒理學評價試驗的選擇原則,3、可用于保健食品的原料： 食物成分（中國食物成分表）。 食物新資源和新資源食品（已經(jīng)衛(wèi)生部批準） 食品添加劑使用衛(wèi)生標準名單物品（GB2760）。 營養(yǎng)強化劑衛(wèi)生標準名單物品（GB14880）。 既是食品又是藥品名單（51號文87種）。 可用于保健食品的物品（51號文114種） 。,毒理學評價試驗的選擇原則,4、不可用于保健食品的原料： 根據(jù)衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200251號文件，共59種。 5、保健食品配方中原料數(shù)量： 根據(jù)衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200251號文件：保健食品中含有動植物物品（或原料）的，動植物物品（或原料）總數(shù)不得超過14個。 名單物品總數(shù)不得超過4個。,毒理學評價試驗的選擇原則,二、不需要進行安全性毒性試驗的產(chǎn)品： 1、普通食品或衛(wèi)生部51號文規(guī)定的藥食同源原料的產(chǎn)品，以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)，且以傳統(tǒng)方式食用 2、以上原材料用水提物配制生產(chǎn)的保健食品，如服用量為原料的常規(guī)用量，且有關(guān)資料未提示其具有不安全性。 3、營養(yǎng)素補充劑，其原料、工藝和質(zhì)量標準符合國家有關(guān)要求，不需要做毒理試驗，使用維生素、礦物質(zhì)化合物名單以外物品則需做。,毒理學評價試驗的選擇原則,三、使用51號文規(guī)定的114種可用物品（名單），需要進行的毒性試驗： 1、用水提物配制生產(chǎn)的，如服用量大于常規(guī)用量，需要進行到第二階段毒理學評價。 2、用水提以外的其它常用的生產(chǎn)工藝，如服用量為原料的常規(guī)用量時，做急性毒性、致突變試驗。如服用量大于原料的常規(guī)用量時，需增加30天喂養(yǎng)試驗，必要時做傳統(tǒng)致畸試驗和第三階段毒性試驗。,毒理學評價試驗的選擇原則,四、原料和產(chǎn)品需要分別做毒理試驗的： 1、包括51號文規(guī)定的名單以外的動植物或其提物、微生物、化學合成物（新原料） 2、新原料：參照新資源食品評價。 3、新原料生產(chǎn)的保健食品：需做第一、二階段或第三階段毒性試驗。,毒理學評價試驗的選擇原則,該原料已做過系統(tǒng)的毒理學安全性評價，能證明該產(chǎn)品的質(zhì)量規(guī)格與其一致的： 毒理試驗到第二階段或第三階段。 有多個國家較大人群或廣泛食用未發(fā)現(xiàn)毒性的： 毒理試驗到第二階段或第三階段 只有少數(shù)國家和局部地區(qū)有食用歷史的： 毒理試驗到第三階段或第四階段 無食用歷史的：需要做到第四階段毒理學評價,功能學評價程序和檢驗方法,可評價的27項保健功能: 1.增強免疫 2.輔助降血糖* 3.輔助降血脂* 4.抗氧化* 5.輔助改善記憶* 6.緩解視疲勞* 7.促進排鉛* 8.清咽* 9.輔助降血壓* 10.改善睡眠 11.促進泌乳* 12.緩解體力疲勞 13.提高耐缺氧能力,14.對輻射危害有輔助保護 15.減肥* 16.改善生長發(fā)育* 17.增加骨密度 18.改善營養(yǎng)性貧血* 19.對化學性肝損傷有保護作用 20.祛痤瘡* 21.祛黃褐斑* 22.改善皮膚水分* 23.改善皮膚油分* 24.調(diào)節(jié)腸道菌群* 25.促進消化* 26.通便* 27.對胃粘膜損傷有輔助保護作用 （ *需人體實驗）,保健功能項目的科學依據(jù),調(diào)節(jié)生理功能：減肥功能、祛痤瘡功能、祛黃褐斑功能、改善皮膚水份功能、改善皮膚油份功能。 調(diào)理亞健康狀態(tài)：增強免疫力功能。 減緩或預防疾病的發(fā)展：輔助降血脂功能 、輔助降血壓功能 、對化學性肝損傷有輔助保護功能 、輔助降血糖功能。 減輕有害因素的影響：對輻射危害有輔助保護功能。,保健功能項目的科學依據(jù),促進體內(nèi)有毒物質(zhì)的分解與排泄：促進排鉛功能。 改善營養(yǎng)素的代謝：增加骨密度功能。 幫助應對激狀態(tài)適應能力：提高缺氧耐受力功能 。 幫助恢復機體的異常狀態(tài)：通便功能、改善睡眠功能、輔助降血脂功能功能 。,動物功能試驗的基本要求,一、對實驗動物的要求： 1、實驗動物的數(shù)量：小鼠每組1015只（單一性別），大鼠每組812只（單一性別） 2、動物級別：清結(jié)級、SPF級動物。 3、分組要求：設3個劑量組，1 個陰性對照組，必要時可設陽性對照組或空白對照組。 4、對照組設置的要求：當樣品載體本身可能具有相同功能時，應設載體作為對照,動物功能試驗的基本要求,二、對實驗劑量、給樣方式和實驗時間的要求： 1、給藥劑量必須在毒理學評價確定的安全劑量范圍之內(nèi)。 2、要有一個劑量相當于推薦攝入量的5倍（大鼠）或10倍（小鼠）。 3、最高劑量不得超過推薦攝入量的30倍。 4、實驗時間：一般為30天，已達30天而實驗結(jié)果仍為陰性時，則可終止實驗。 抗氧化試驗可以延長至60天。 5、給樣方式：經(jīng)口給予受試樣品，首選灌胃。如無法灌胃則加入飲水或摻入飼料中，計算樣品的給予量。,人體試食功能試驗的基本要求,三、對受試樣品的要求： 1、樣品的來源、組方、加工工藝和衛(wèi)生條件要有詳細說明。 2、提供與試食試驗同批次樣品的衛(wèi)生學檢測合格的報告。 3、受試樣品須經(jīng)過動物實驗證實，具有需驗證的保健功能。 4、原則上應在動物功能學實驗有效的前提下進行 5、受試樣品必需經(jīng)過毒理學安全性評價，提供同批次樣品的毒理學試驗確認安全的報告。 6、對照物：可以用安慰劑或空白對照，還可用陽性對照物。,人體試食功能試驗的基本要求,四、試驗前的準備： 1、試驗方案經(jīng)本單位倫理委員會批準。 2、受試例量：最終統(tǒng)計中試食組和對照組不少于50人，試驗的脫離率不得超過20。 3、開始試用前要常規(guī)體檢（包括心電圖、胸透和腹部B超，根據(jù)情況決定試驗結(jié)束后是否重復。兒童不需做這些檢查）,人體試食功能試驗的基本要求,五、對受試者的要求： 1、功能試驗的受試者必須是知情、自愿的。 2、受試者必須符合納入和排除標準。 4、必須有受試者和主要研究者簽字的知情同意書。 5、試食試驗期限原則上不得少于30天（特殊情況除外），必要時可以適當延長。,人體試食功能試驗的基本要求,六、對實施者的要求： 1、試驗單位是合法檢驗機構(gòu)。合作醫(yī)院必須選擇三級甲等醫(yī)院。 2、指導受試者的日?；顒?，監(jiān)督檢查受試者遵守試驗有關(guān)規(guī)定。 3、在受試者身上采集的樣品應詳細記錄采集樣品的種類、數(shù)量、次數(shù)、采集方法和采集日期。 5、負責試驗的主要研究者應具有副高級職稱。,人體試食功能試驗的基本要求,七、安全性指標： 1、一般情況：精神和體力的主觀感覺、進食、睡眠、大小便 2、生理指標：血壓、心率 3、血液學指標：血紅蛋白、紅細胞和白細胞計數(shù)，必要時做白細胞分類,人體試食功能試驗的基本要求,4、生化指標：轉(zhuǎn)氨酶、血清總蛋白、白蛋白，尿素、肌酐、血脂、血糖 5、常規(guī)糞檢：外觀、寄生蟲、顯微鏡檢查 6、尿常規(guī)：尿八項測定 7、常規(guī)體檢：心電圖、胸透和腹部B超,毒理與功能檢驗過程常見問題,一、一般問題（12種） 1、未做研發(fā)試驗，產(chǎn)品未定型，檢驗過程中發(fā)現(xiàn)問題常需要修改配方。 2、檢驗樣品批號不一致，毒理、功能、人體試驗樣品不同批。 3、推薦日服量太大，給予樣品的途徑不暢，高劑量達不到推薦日服量的100倍。 4、濃縮倍數(shù)不明、密度不明，造成配制樣品濃度與設計劑量不符。,毒理與功能檢驗過程常見問題,5、樣品去輔料后未應注明去除何種輔料，造成檢測結(jié)果不適宜全面正確評價受試物。 6、樣品推薦日服量太大，動物試驗去輔料，人體試驗不去輔料，造成樣品批號不一致。 7、溶劑選擇不合適，水溶性產(chǎn)品用油配制。 8、益生菌類產(chǎn)品超過保質(zhì)期。 9、膨脹系數(shù)高的樣品難以給樣，灌胃量超20ml/kg，一天給予四次也不夠量。,毒理與功能檢驗過程常見問題,10、Ames試驗樣品未處理或處理不當。組氨酸問題。未處理對照、溶劑對照選擇不合適或未說明。 11、配制樣品濃度未達到要求。摻入量超過5%未加蛋白。 12、營養(yǎng)素補充劑超量，顆粒劑超過20克/日，口服液超30ml/日。,毒理與功能檢驗過程常見問題,二. 實驗動物與設施： 1、實驗動物級別、品系問題。 2、30天和90天喂養(yǎng)試驗選用動物體重超標或太小。 3、老年大鼠、離乳大鼠鼠齡問題。 4、實驗過程中動物的體重稱量，每周一次與二次的問題，食物量不規(guī)則波動。 5、30天與四周、完整的一周與有差別的一周對體重與食物利用的影響不同。,毒理與功能檢驗過程常見問題,三、實驗設計 1、急性毒性試驗：各檢驗機構(gòu)的 LD50/MTD 劑量不一致,如10g/kg、15g/kg、 20g/kg、21.5g/kg 2、微核試驗、精子畸形試驗：設10g/kg，以下二組。1/2LD50、1/4 LD50、1/8 LD50，不考慮人體推薦量的問題。無精子畸變類型。 3、Ames試驗：不符合0.2-5mg/皿范圍，不設未處理對照或溶劑對照組。如出現(xiàn)抑菌，以下要設四個組。,毒理與功能檢驗過程常見問題,、天、天喂養(yǎng)試驗：未按成人60公斤少年兒童30公斤、3-7歲20公斤計。飼料摻入量超過5%時未補充蛋白質(zhì)，應添加樣品量的20%的酪蛋白。摻入飲水給樣時，未記錄和計飲水量。新原材料劑量未達到推薦日服量的300倍。 5、傳統(tǒng)致畸試驗：劑量選擇原則上可采用1/4、1/16、1/64LD50，或以最大無作用劑量為最高劑量組。最大無作用劑量無法的確定時，也可選擇推薦量的300倍。,毒理與功能檢驗過程常見問題,四、實驗結(jié)果