2019屆高考生物二輪復(fù)習(xí)大題提升八生物技術(shù)實(shí)踐.docx

八、現(xiàn)代生物科技專題12018全國卷回答下列問題：(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)?？梢宰鳛檩d體外，還證明了_(答出兩點(diǎn)即可)。(2)體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2參與的_方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；而體外重組的噬菌體DNA通常需與_組裝成完整噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞。在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中，可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是_。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用_的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加_的抑制劑。22018全國卷某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5末端，獲得了L1GFP融合基因(簡(jiǎn)稱為甲)，并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。回答下列問題：(1)據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是_。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證_，也是為了保證_。(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培育的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了_和_過程。(3)為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_移入牛的_中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。(4)為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定，在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的_(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。32018全國卷2018年細(xì)胞期刊報(bào)道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”。回答下列問題：(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指_。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目_(填“減半”“加倍”或“不變”)。(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度_(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是_。(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目_(填“相同”或“不同”)，性染色體組合_(填“相同”或“不同”)。42018江蘇卷為生產(chǎn)具有特定性能的淀粉酶，研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了淀粉酶基因(1 656個(gè)堿基對(duì))，利用基因工程大量制備淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見右圖。請(qǐng)回答下列問題：(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增淀粉酶基因前，需先獲得細(xì)菌的_。(2)為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的_端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是_。(3)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，下列選項(xiàng)中_的設(shè)定與引物有關(guān)，_的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。(填序號(hào))變性溫度退火溫度延伸溫度變性時(shí)間退火時(shí)間延伸時(shí)間(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含_個(gè)密碼子，如虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有_種。(5)獲得工程菌表達(dá)的淀粉酶后，為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性，結(jié)果如下表所示：緩沖液50 mmol/L Na2HPO4KH2PO450 mmol/L TrisHCl50 mmol/L GlyNaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相對(duì)活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷該淀粉酶活性最高的條件為_。52018河北武邑中學(xué)調(diào)考如圖列舉了幾種植物的育種方式，請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問題：(1)甲育種方式稱為_，該過程用到的酶有_和_。(2)愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度_化的呈無定型狀的_細(xì)胞。(3)通過丁方式可以獲得脫毒苗，培養(yǎng)過程中c常常取用莖尖的原因是_。(4)丙方式將外源目的基因?qū)胧荏w植物細(xì)胞，最常采用的方法是_。(5)甲、丙兩種育種方式與傳統(tǒng)雜交育種相比，其優(yōu)點(diǎn)是_。62018河北正定中學(xué)調(diào)研干擾素是治療癌癥的藥物，其成分是一種糖蛋白，它必須從血液中提取，每升人血中只能提取0.05 g，所以價(jià)格昂貴。現(xiàn)在美國加利福尼亞的基因公司用如圖所示的方式生產(chǎn)干擾素，試分析并回答下列問題：(1)從人的淋巴細(xì)胞中取出_，使它同質(zhì)粒相結(jié)合，然后移植到酵母菌體內(nèi)，讓酵母菌_。(2)有人嘗試將干擾素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒重組，轉(zhuǎn)入大腸桿菌體內(nèi)后，形成“工程菌”，此種操作能制備到干擾素嗎？_，請(qǐng)說明理由：_。(3)中國青年科學(xué)家陳炬成功地把人的干擾素基因移植到煙草的DNA分子上，使煙草獲得了抗病毒的能力，試分析：人的基因之所以能移接到植物體內(nèi)，其物質(zhì)基礎(chǔ)是_。煙草有了抗病能力，這表明煙草體內(nèi)產(chǎn)生了_。這個(gè)事實(shí)說明，人和植物共用一套_，蛋白質(zhì)合成方式_(基本相同/大不相同)。72018內(nèi)蒙古奮斗中學(xué)如圖為蛋白質(zhì)工程操作的基本思路，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)寫出圖中各數(shù)字代表的生物學(xué)過程的名稱或內(nèi)容：_；_；_；_。(2)蛋白質(zhì)工程的目的是_，通過_來實(shí)現(xiàn)。(3)代表蛋白質(zhì)工程操作思路的過程是_(填寫數(shù)字)；代表中心法則內(nèi)容的是_(填寫數(shù)字)。82018河南實(shí)驗(yàn)中學(xué)聯(lián)考如圖為純種荷斯坦小奶牛的繁殖過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題。(1)克隆動(dòng)物培育過程與圖示繁殖過程相比，特有的技術(shù)手段是_。兩種動(dòng)物繁殖的方式相比，實(shí)質(zhì)性的區(qū)別為前者是_，后者是_。(2)一般用_激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。(3)為了提高胚胎的利用率，可以采用_技術(shù)處理早期胚胎，如果選擇囊胚階段的早期胚胎，在分割時(shí)需要注意_。(4)如果培育轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛，可采用_技術(shù)將藥用蛋白基因?qū)氲绞芫阎?，并采用_技術(shù)檢測(cè)受體細(xì)胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因。92018河南安陽聯(lián)考下圖表示從蘇云金芽孢桿菌分離出來的殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(簡(jiǎn)稱Bt基因)及形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問題：(1)圖中a過程要用到的酶是_。(2)為確定抗蟲棉是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子雜交測(cè)試，又要在個(gè)體水平上鑒定，后者具體過程是_。(3)活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種_分子，可以全部或部分嵌合于昆蟲的細(xì)胞膜上，使細(xì)胞膜產(chǎn)生孔道，導(dǎo)致細(xì)胞由于滲透平衡的破壞而破裂。(4)我國在“863”計(jì)劃資助下開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究，可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用，這將對(duì)_起到重要作用。10回答下列有關(guān)基因工程的問題：嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開展了以下試驗(yàn)。(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增，最簡(jiǎn)便的方法是_技術(shù)。(2)如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。下表為限制酶的酶切位點(diǎn)。限制酶BamHHindEcoRNde識(shí)別序列及切割位點(diǎn)GGATCCAAGCTTGAATTCCATATG圖示的質(zhì)粒上有多個(gè)酶切位點(diǎn)，本實(shí)驗(yàn)中沒有選擇Xba酶切割質(zhì)粒，原因是_。(3)分析圖示，可選擇兩種不同的限制酶_切割質(zhì)粒，以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后，可用DNA連接酶將其與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是_。(4)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開。112018湖北十堰聯(lián)考科學(xué)家已分離出H7N9病毒(一種RNA病毒)。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)出預(yù)防和治療甲流的抗體，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題：(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的_細(xì)胞，促進(jìn)d過程的常用誘導(dǎo)劑是_。(2)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成_種類型的C細(xì)胞，因此需用培養(yǎng)基篩選出_(填特點(diǎn))的D細(xì)胞用于培養(yǎng)。D細(xì)胞的名稱是_。(3)理論上，注射了該抗體的人群不能長期對(duì)甲流免疫，試分析原因：_。(4)不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合，相比誘變育種和雜交育種方法，具有_等突出的特點(diǎn)。(5)請(qǐng)說明不能用單個(gè)B淋巴細(xì)胞獲得大量抗體的原因：_。 (6)單克隆抗體的主要用途有_。122018河北冀州中學(xué)調(diào)考科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如圖所示)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問題：(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分散處理，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過程中需要利用_酶處理。(2)用于核移植的供體細(xì)胞，一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是_。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞增殖的方式是_，此外，細(xì)胞增殖還表現(xiàn)出_和接觸抑制等特點(diǎn)。(4)將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是_。(5)將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后，該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢，但也不是100%復(fù)制，原因最可能是_。(6)上述動(dòng)物細(xì)胞工程中涉及的技術(shù)有_。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動(dòng)物的_具有全能性。13回答下列有關(guān)胚胎工程的問題：(1)從母牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到_(時(shí)期)才能與精子受精。在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，需要滿足以下條件：_、營養(yǎng)、溫度和pH以及氣體。(2)通過試管動(dòng)物技術(shù)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)_、_可產(chǎn)生多個(gè)基因型相同的后代。(3)胚胎移植時(shí)，供、受體應(yīng)處于相同的生理狀況，此時(shí)可利用激素對(duì)供、受體進(jìn)行_處理；此外，受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生_反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，胚胎移植的優(yōu)勢(shì)在于供體的主要職能變?yōu)開。(4)生產(chǎn)上常用_期的胚胎送入母體內(nèi)，使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。而在制備乳腺生物反應(yīng)器的過程中，科學(xué)家將生長激素基因與_的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，通過_等方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中。142018天津靜海一中期末生態(tài)工程的建設(shè)已經(jīng)成為社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。近日，北京頻繁發(fā)生的霧霾嚴(yán)重影響人們的生活，天津港火災(zāi)爆炸事故遺址將在徹底清理后建成海港生態(tài)公園，這再次將生態(tài)環(huán)境與生態(tài)經(jīng)濟(jì)推上輿論的焦點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題：(1)生態(tài)工程建設(shè)的目的是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，達(dá)到_的同步發(fā)展。與傳統(tǒng)的工程相比，生態(tài)工程是一類_的工程體系。(2)山西省為產(chǎn)煤大省，生態(tài)環(huán)境破壞嚴(yán)重，礦區(qū)廢棄地的生態(tài)恢復(fù)工程的關(guān)鍵在于_，具體實(shí)施的措施有_(答兩點(diǎn))。(3)某農(nóng)村生態(tài)工程以沼氣工程為中心，各類植物的秸稈、枝葉用來生產(chǎn)飼料喂養(yǎng)畜、禽、魚，人、畜、禽的糞便作為原料生產(chǎn)沼氣，沼渣水返還農(nóng)田、菜園、果園、苗圃、魚塘，這主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的_原理。該生態(tài)工程建設(shè)中，魚塘中每一種魚苗的投放量都不宜超過其_。該生態(tài)系統(tǒng)把魚塘、農(nóng)田、果園等有機(jī)地組合在一起，優(yōu)化了系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，遵循_原理。在該生態(tài)工程中，種植不同的農(nóng)作物、果樹，飼養(yǎng)多種畜禽，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的_原理。(4)一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對(duì)_進(jìn)行修復(fù)，對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。(5)在應(yīng)用植物修復(fù)技術(shù)治理重金屬污染的土壤時(shí)，需選擇符合要求的植物，這遵循了生態(tài)工程的_原理。152018云南曲靖一中聯(lián)考人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示。(1)卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可以從已處死的雌鼠_中獲取。(2)圖中的高血壓相關(guān)基因作為_，質(zhì)粒作為_，二者需用_切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有_有關(guān)。(3)子代大鼠如果_和_，即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。(4)在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是_、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。162018云南大理聯(lián)考以下是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過程，ah為操作過程，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題：(1)“試管?！奔夹g(shù)的操作流程是_(填字母)。(2)圖中數(shù)字標(biāo)號(hào)代表的結(jié)構(gòu)名稱是_；_。(3)d操作的名稱是_。(4)圖中用到的激素是_，過程h常用的方法是_。(5)移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是_。17我國基因工程藥物的研制和生產(chǎn)發(fā)展迅猛。目前科學(xué)家已在牛和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素等重要藥品，其大致過程如圖所示：(1)哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括a_、b_和受精等幾個(gè)主要步驟。若要充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛能，可給供體注射_，使其排出更多的卵子。(2)在過程c中需要用到的工具酶有_。要使人的藥用蛋白基因在奶牛乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)，完整的基因表達(dá)載體要包括目的基因、_、標(biāo)記基因等部分。(3)d過程常用的方法是_，e過程的名稱為_。(4)若要一次獲得多只完全相同的轉(zhuǎn)基因牛，應(yīng)采用_技術(shù)，通常選擇_的桑椹胚或囊胚。(5)早期胚胎發(fā)育的幾個(gè)階段：受精卵_期桑椹胚囊胚_(dá)。182018四川成都外國語學(xué)校聯(lián)考下面是以小鼠為對(duì)象進(jìn)行的研究工作，請(qǐng)分析回答問題： (1)進(jìn)行小鼠胚胎工程操作時(shí)，首先在光控周期下(光照14 h，黑暗10 h)飼養(yǎng)成年雌鼠，并注射促性腺激素，其目的是_。然后從雌鼠輸卵管中取出卵子，在一定條件下培養(yǎng)成熟；并從雄鼠附睪中取出精子，在一定條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是使_。再在37 、5%CO2條件下，精卵共同作用4 h，沖洗后繼續(xù)培養(yǎng)。定時(shí)在顯微鏡下觀察胚胎的變化，第5天可以看到胚胎發(fā)生收縮，細(xì)胞間隙擴(kuò)大，接著胚胎內(nèi)部出現(xiàn)裂隙，這是胚胎_期開始的標(biāo)志。 (2)如果體外受精后，在精核與卵核融合之前，用微型吸管吸除精核，再用細(xì)胞松弛素B處理(作用類似于用秋水仙素處理植物細(xì)胞)，處理后的受精卵可發(fā)育成小鼠。這種方法在動(dòng)物新品種選育中的顯著優(yōu)點(diǎn)是_。(3)如果將小鼠甲的體細(xì)胞核移入小鼠乙的去核卵細(xì)胞中，由重組細(xì)胞發(fā)育成小鼠丙，則小鼠丙的基因來源于_。八、現(xiàn)代生物科技專題1(1)體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入體細(xì)胞；真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)(2)轉(zhuǎn)化外殼蛋白(噬菌體蛋白)細(xì)菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶解析：(1)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)，該過程證明了體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入體細(xì)胞，也可證明真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)等。(2)體外重組的質(zhì)粒可通過Ca2參與的轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；體外重組的噬菌體DNA通常需與蛋白質(zhì)外殼組裝成完整的噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組噬菌體DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；噬菌體侵染的是細(xì)菌，而不能寄生在其它細(xì)胞中，因此可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是細(xì)菌。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解，為防止蛋白質(zhì)被降解，可以選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑。2(1) E1和E4甲的完整甲與載體正確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞(4)核DNA解析：(1)用限制酶進(jìn)行酶切時(shí)，為了保證甲(融合基因)的完整，而且也要保證甲(融合基因)與載體正確連接，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，需要使用E1和E4這兩種酶進(jìn)行酶切，如果用E2或E3進(jìn)行酶切，則融合基因不完整。(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。(3)要獲得含有甲的牛，需要做的工作是：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，然后經(jīng)體外培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得含有甲的牛。(4)若利用PCR方法檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，則應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板。3(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易(3)相同不同解析：(1)核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體，因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和供體相同。(2)因?yàn)閯?dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，所以胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植。(3)哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞染色體常染色體相同，性染色體前者是XX，后者是XY，因此分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同，性染色體組合不同。4(1)基因組DNA(2)5使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連(3)(4)813(5)pH為8.5，緩沖液為50 mmol/L TrisHCl解析：(1)必須先獲得細(xì)菌的基因組DNA，然后再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增淀粉酶基因。(2)目的基因與運(yùn)載體結(jié)合前需要用限制酶對(duì)兩者進(jìn)行切割，延伸是在引物的3端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5端加上限制性酶切位點(diǎn)，且為了使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)。(3)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān)，延伸時(shí)間的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。(4)虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個(gè)堿基，每3個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，因此包含8個(gè)密碼子；構(gòu)成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有44313種。(5)分析表中數(shù)據(jù)可知，在pH為8.5，緩沖液為50 mmol/L TrisHCl的條件下，淀粉酶相對(duì)活性為99.5%，活性最高。5(1)植物體細(xì)胞雜交纖維素酶果膠酶(2)液泡薄壁(3)莖尖所含病毒極少，甚至不含病毒(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(5)都能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙解析：(1)甲表示植物體細(xì)胞雜交，該過程需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀的薄壁細(xì)胞。(3)莖尖所含病毒極少，甚至不含病毒，因此植物組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得脫毒苗。(4)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，最常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(5)甲表示植物體細(xì)胞雜交育種、丙表示基因工程育種，這兩種育種方式與傳統(tǒng)雜交育種相比，其優(yōu)點(diǎn)是都能克服不同物種遠(yuǎn)源雜交不親和障礙。6(1)干擾素基因合成干擾素(2)不能大腸桿菌是原核生物，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器，無法合成干擾素(糖蛋白)(3)DNA結(jié)構(gòu)基本相同干擾素遺傳密碼基本相同解析：(1)從人的淋巴細(xì)胞中提取目的基因干擾素基因，使它與細(xì)菌質(zhì)粒相結(jié)合，然后移植到酵母菌體內(nèi)，讓酵母菌合成干擾素。(2)大腸桿菌是原核生物，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器，無法合成糖蛋白，因此用大腸桿菌作為工程菌時(shí)不能制備得到干擾素。(3)人的基因之所以能接到植物體內(nèi)去，其物質(zhì)基礎(chǔ)是兩者的DNA結(jié)構(gòu)基本相同，空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。煙草有了抗病能力，這表明干擾素基因煙草體內(nèi)得到了表達(dá)，產(chǎn)生了干擾素。這個(gè)事實(shí)說明：人和植物共有一套密碼子。所有生物合成蛋白質(zhì)的方式相同，都是脫水縮合形成蛋白質(zhì)。7(1)轉(zhuǎn)錄翻譯分子設(shè)計(jì)DNA合成(2)獲得滿足人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì)基因合成或改造(3)解析：(1)圖中為轉(zhuǎn)錄過程，為翻譯過程，為分子設(shè)計(jì)，表示DNA合成。(2)蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要?？梢?，蛋白質(zhì)工程的目的是獲得滿足人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì)，通過基因合成或改造來實(shí)現(xiàn)。(3)圖中過程代表蛋白質(zhì)工程的操作思路；過程代表中心法則。8(1)核移植無性生殖有性生殖(2)促性腺(3)胚胎分割將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割(4)顯微注射DNA分子雜交解析：(1)圖示繁殖過程是試管動(dòng)物技術(shù)，克隆動(dòng)物培育過程與其相比，特有的技術(shù)手段是核移植。兩種動(dòng)物繁殖的方式相比，實(shí)質(zhì)性的區(qū)別為克隆動(dòng)物培育過程沒有經(jīng)過受精作用，屬于無性生殖，試管動(dòng)物技術(shù)有經(jīng)過受精作用，屬于有性生殖。(2)一般用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。(3)為了提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技術(shù)處理早期胚胎，如果選擇囊胚階段的早期胚胎，在分割時(shí)需要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。(4)如果培育轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛，可采用顯微注射技術(shù)將藥用蛋白基因?qū)氲绞芫阎校⒉捎肈NA分子雜交技術(shù)檢測(cè)受體細(xì)胞中的染色體DNA上是否插入了目的基因。9(1)限制性核酸內(nèi)切酶(2)殺蟲晶體蛋白質(zhì)基因(或Bt基因、目的基因)讓害蟲吞食抗蟲棉葉子，觀察害蟲的存活狀態(tài)(或其他合理答案)(3)多肽(4)環(huán)境保護(hù)解析：(1)圖中a過程是提取目的基因，用到的酶是限制酶。(2)為確定抗蟲棉是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子雜交測(cè)試，又要在個(gè)體水平上鑒定，后者具體過程是讓害蟲吞食抗蟲棉葉子，觀察害蟲的存活狀態(tài)。(3)活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種多肽分子，可以全部或部分嵌合于昆蟲的細(xì)胞膜上，使細(xì)胞膜產(chǎn)生孔道，導(dǎo)致細(xì)胞由于滲透平衡的破壞而破裂。(4)開展Bt抗蟲棉、抗蟲水稻等研究，可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用，這將對(duì)環(huán)境保護(hù)起到重要作用。10(1)PCR擴(kuò)增(2)由于Xba在質(zhì)粒不止一個(gè)酶切位點(diǎn)(3)Nde、BamH顯微注射法(4)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶解析：(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增，最簡(jiǎn)便的方法是PCR擴(kuò)增技術(shù)。(2)根據(jù)啟動(dòng)子和終止子的生理作用可知，目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動(dòng)子和終止子之間。據(jù)圖可知，兩者之間存在有三種限制酶切點(diǎn)，但是由于Xba在質(zhì)粒上有不止一個(gè)酶切位點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)中沒有選擇Xba酶切割質(zhì)粒。 (3)分析圖示，為防止質(zhì)粒自身環(huán)化，擴(kuò)增的BglB基因兩端需分別引入Nde和BamH不同限制酶的識(shí)別序列，再用DNA連接酶將其與目的基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒。如果受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，常用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。 (4)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)檗D(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。11(1)B淋巴聚乙二醇(PEG)(滅活的病毒)(2)3既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細(xì)胞(3)引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異(4)目的性強(qiáng)，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(能有效地打破物種的生殖隔離界限) (5)B淋巴細(xì)胞已經(jīng)分化，在體外不能大量增殖 (6)作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物 解析：(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞，促進(jìn)d動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)劑是聚乙二醇(PEG)(滅活的病毒)。 (2)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合、B細(xì)胞與B細(xì)胞融合共3種類型的C細(xì)胞，因此需用培養(yǎng)基篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的D雜交瘤細(xì)胞用于培養(yǎng)。 (3)由于引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異，理論上，注射了該抗體的人群不能長期對(duì)甲流免疫。 (4)相比誘變育種和雜交育種方法，不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合目的性強(qiáng)，且能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。 (5)由于B淋巴細(xì)胞已經(jīng)分化，在體外不能大量增殖，因此不能用單個(gè)B淋巴細(xì)胞獲得大量抗體。 (6)單克隆抗體的主要用途有作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。12(1)胰蛋白(2)細(xì)胞能保持正常的二倍體核型(3)有絲分裂貼壁生長(4)使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞 (5)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制；生物的性狀還受環(huán)境因素的影響 (6)核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞的細(xì)胞核解析：(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分散處理，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過程中需要利用胰蛋白酶處理。(2)用于核移植的供體細(xì)胞，一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是保持正常的二倍體核型。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞增殖的方式是有絲分裂，此外，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)還表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制等特點(diǎn)。(4)要使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞，需要將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中。(5)因?yàn)樯锏男誀钍芗?xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制；同時(shí)還受環(huán)境因素的影響，所以將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后，該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢，但也不是100%復(fù)制。(6)上述動(dòng)物細(xì)胞工程中涉及的技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動(dòng)物的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。13(1)減數(shù)第二次分裂中期無菌無毒的環(huán)境(2)胚胎分割胚胎移植(3)同期發(fā)情免疫排斥只產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎(4)桑椹胚(或囊胚)乳腺蛋白基因顯微注射解析：(1)從母牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能與獲能的精子受精。在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，需要滿足的條件有無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)、溫度和pH以及氣體。(2)通過試管動(dòng)物技術(shù)培養(yǎng)發(fā)育到早期胚胎后，再經(jīng)胚胎分割、胚胎移植產(chǎn)生多個(gè)基因型相同的后代。(3)胚胎移植時(shí)，供、受體應(yīng)處于相同的生理狀況，此時(shí)可利用激素對(duì)供、受體進(jìn)行同期發(fā)情處理。此外，受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，胚胎移植的優(yōu)勢(shì)在于供體的職責(zé)變?yōu)橹划a(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎。(4)生產(chǎn)上常將用桑椹胚(或囊胚)期的胚胎送入母體內(nèi)，使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。而在制備乳腺生物反應(yīng)器的過程中，科學(xué)家將生長激素基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，通過顯微注射等方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中。14(1)經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益少消耗、多效益、可持續(xù)(2)植被恢復(fù)，以及為植被恢復(fù)所必需的土壤微生物群落的重建人工制造表土、平整壓實(shí)土地(3)物質(zhì)循環(huán)再生環(huán)境容納量系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能物種多樣性(4)已破壞的生態(tài)系統(tǒng)(5)協(xié)調(diào)與平衡解析：(1)生態(tài)工程建設(shè)的目的是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。與傳統(tǒng)的工程相比，生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。(2)在礦區(qū)生態(tài)環(huán)境的恢復(fù)工程中，關(guān)鍵的措施是植被的恢復(fù)及其所必需的土壤微生物群落的重建。具體措施有：人工制造表土、多層覆蓋、特殊隔離、土壤侵蝕控制、植被恢復(fù)工程。(3)沼氣工程主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的物質(zhì)循環(huán)再生原理。魚塘中每一種魚苗的投放量都不宜超過其環(huán)境容納量。該生態(tài)系統(tǒng)把魚塘、農(nóng)田、果園等有機(jī)地組合在一起，優(yōu)化了系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，遵循系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理。在該生態(tài)工程中，種植不同的農(nóng)作物、果樹，飼養(yǎng)多種畜禽，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的物種多樣性原理。(4)一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對(duì)已破壞的生態(tài)系統(tǒng)進(jìn)行修復(fù)，對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生