實驗四線粒體和液泡系的超活染色與觀察.ppt

實驗三：線粒體和液泡系的超活染色與觀察,【課前預習】 1什么是液泡系？ 2為什么不能用一種活體染料同時觀察多種細胞器？,【目的要求】 1. 觀察動植物活細胞內線粒體、液泡系的形態(tài)、發(fā)育和分布 2. 了解細胞和細胞器的超活染色技術,【基本原理】 線粒體是細胞內一種重要細胞器，細胞的各項活動所需要的能量，主要是通過線粒體呼吸作用來提供的。活體染色是應用無毒或毒性較小的染色劑真實地顯示活細胞內某些結構而又很少影響細胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠 B（Janus green B）是線垃體的專一性活細胞染色劑，毒性很小，屬于堿性染料，解離后帶正電，由電性吸引堆積在線粒體膜上。線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍綠色，從而使線粒體顯色，而在周圍的細胞質中染料被還原，成為無色狀態(tài)。細胞中的線粒體呈藍綠色的顆粒。 中性紅對液泡系的染色具有專一性，將活細胞中的液泡系染成紅色。,【實驗用品】 1. 器材：顯微鏡、恒溫水浴鍋、剪刀、鑷子、解剖刀、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙 2. 試劑：Ringer液、1/5000詹納斯綠B、1/3000中性紅 3. 材料：人口腔上皮細胞、洋蔥鱗莖內表皮細胞、小麥（或綠豆）幼根根尖,【方法步驟】 1線粒體的超活染色與觀察 1）口腔上皮細胞線粒體的超活染色：1/5000詹納斯綠B1-2滴，口腔上皮細胞（牙簽刮取），載玻片于37恒溫染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2）洋蔥鱗莖內表皮細胞線粒體的超活染色與觀察：1/5000詹納斯綠B溶液1-2滴，洋蔥鱗莖內表皮，載玻片于37恒溫水浴染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2小麥（或綠豆）幼根根尖液泡系的中性紅染色觀察 小麥（或綠豆）幼苗根尖（1-2cm）縱切面切片，1/3000中性紅溶液1滴染色5-10min，載玻片于37恒溫水浴，蓋上蓋玻片壓扁根尖，顯微鏡下觀察。,【方法步驟】 1線粒體的超活染色與觀察 1）口腔上皮細胞線粒體的超活染色：1/5000詹納斯綠B1-2滴，口腔上皮細胞（牙簽刮取），載玻片于37恒溫染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2）洋蔥鱗莖內表皮細胞線粒體的超活染色與觀察：1/5000詹納斯綠B溶液1-2滴，洋蔥鱗莖內表皮，載玻片于37恒溫水浴染色10-15min，顯微鏡下觀察。 2小麥（或綠豆）幼根根尖液泡系的中性紅染色觀察 小麥（或綠豆）幼苗根尖（1-2cm）縱切面切片，1/3000中性紅溶液1滴染色5-10min，載玻片于37恒溫水浴，蓋上蓋玻片壓扁根尖，顯微鏡下觀察。,【實驗結果】,【實驗報