實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理培訓(xùn)第八章突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測.ppt

實(shí)驗(yàn)室在突發(fā)公共衛(wèi)生 事件中的作用和任務(wù) （微生物部分）,主 要 內(nèi) 容 1. 突發(fā)公共衛(wèi)生事件的主要有害 因素 2. 實(shí)驗(yàn)室在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中 的作用 3. 實(shí)驗(yàn)室在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中 的任務(wù)、應(yīng)急檢測技術(shù)、原則,1. 突發(fā)公共衛(wèi)生事件 的主要有害因素,1.1 病原微生物 包括致病菌和病毒、細(xì)菌、螺 旋體、真菌等。,1.2 微生物產(chǎn)生的毒素 毒素是微生物體內(nèi)的代謝 產(chǎn)物。,1.3 病原寄生蟲 由于各種寄生蟲引起的寄生 蟲病。,1.4 病媒生物 如蚊子、蠅、虱、蟑螂等。,2. 實(shí)驗(yàn)室在突發(fā) 公共衛(wèi)生事件中的作用,突發(fā)事件的處理，不僅是對(duì)疾 控機(jī)構(gòu)，甚至是對(duì)一個(gè)城市醫(yī)療管 理水平和政府行政管理水平的嚴(yán)峻 挑戰(zhàn)。,疾控機(jī)構(gòu)應(yīng)在最短時(shí)間內(nèi)采取 規(guī)范、科學(xué)、符合標(biāo)準(zhǔn)要求的快速 行動(dòng)，以判斷原因，采取有效的對(duì) 策。,質(zhì)量和速度是專業(yè)技術(shù)和管理 水平等綜合素質(zhì)、反應(yīng)能力的整體 體現(xiàn)。,2.1.1 危險(xiǎn)性評(píng)估 突發(fā)事件發(fā)生后，衛(wèi)生行政部門應(yīng) 組織專家進(jìn)行綜合評(píng)估，初步判斷事件 類型，根據(jù)危害范圍和程度進(jìn)行分級(jí)。 危險(xiǎn)性評(píng)估需要現(xiàn)代化的實(shí)驗(yàn)室、 快速的危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)技術(shù)等作為支撐。,2.1.2 危險(xiǎn)性評(píng)估 提出是否啟動(dòng)突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng) 急預(yù)案的建議。 建立實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)，快速識(shí)別突發(fā)公 共衛(wèi)生事件的病因。,2.2.1 實(shí)驗(yàn)室在傳染病疫情中的作用 無論是基礎(chǔ)研究還是應(yīng)用研究都離不 開實(shí)驗(yàn)室的工作，這些工作主要包括病原 學(xué)、檢測與診斷、預(yù)防與控制（包括疫苗 等）、藥品研究等方面。 病原學(xué)研究包括病原的鑒定、病原體 分子生物學(xué)、病原體可能的來源、病原體 致病機(jī)理等。,2.2.2 實(shí)驗(yàn)室在傳染病疫情中的作用 傳染病的診斷需要綜合實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié) 果，包括：流行病學(xué)資料、臨床病史、體 格檢查以及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,2.2.3 實(shí)驗(yàn)室在傳染病疫情中的作用 病原體的檢出是確診傳染病的主要依 據(jù)。每一種傳染病都有特異的病原體，病 原體的檢出是確診的重要依據(jù)，應(yīng)盡一切 可能分離到病原體。,3. 實(shí)驗(yàn)室在突發(fā)公共衛(wèi) 生事件中的任務(wù)、應(yīng) 急檢測技術(shù)、原則,3.1 統(tǒng)一指揮、 明確職責(zé)和分工 現(xiàn)場流調(diào)人員和實(shí)驗(yàn)室人員之間 要緊密配合，相互溝通,3.2.1 檢驗(yàn)技術(shù)能力的儲(chǔ)備 不同級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該具備的檢測能力不 一樣，省、地、縣級(jí)疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn) 室建設(shè)指導(dǎo)意見規(guī)定了省級(jí)疾病預(yù)防控制中 心實(shí)驗(yàn)室必須開展的項(xiàng)目和選做的項(xiàng)目；地級(jí) 疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室必須開展的項(xiàng)目和選 做的項(xiàng)目；縣級(jí)疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室必須 開展的項(xiàng)目和選做的項(xiàng)目。,3.2.2 檢驗(yàn)技術(shù)能力的儲(chǔ)備 突發(fā)公共衛(wèi)生事件有害因子的鑒別應(yīng)該形 成一個(gè)自上而下的公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)。 下級(jí)實(shí)驗(yàn)室鑒別不了的請(qǐng)示上級(jí)實(shí)驗(yàn)室支 持，疾控機(jī)構(gòu)解決不了的問題應(yīng)邀請(qǐng)其他部門 和研究機(jī)構(gòu)加入公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)，并建立 經(jīng)常性的聯(lián)系。 檢驗(yàn)技術(shù)能力的儲(chǔ)備也包括各網(wǎng)絡(luò)內(nèi)相關(guān) 實(shí)驗(yàn)室檢測能力等信息的收集、整理。項(xiàng)目。,3.2.3 檢驗(yàn)技術(shù)能力的儲(chǔ)備 人員業(yè)務(wù)素質(zhì)、儀器設(shè)備、技術(shù) 資料、檢測試劑等。,3.3 實(shí)驗(yàn)室在處理 傳染病疫情中的任務(wù),主要內(nèi)容： a)現(xiàn)場病原微生物標(biāo)本的采集 b)病原微生物標(biāo)本的保存 c)病原微生物標(biāo)本的包裝和運(yùn)送 d)病原學(xué)檢測 e)血清學(xué)檢測 f)免疫學(xué)檢測 g)核酸檢測和序列分析 h)現(xiàn)場快速檢測,a)現(xiàn)場病原微生物標(biāo)本的采集 采樣計(jì)劃；采樣時(shí)生物安全考慮； 采樣時(shí)間；采樣容器、標(biāo)識(shí)等。,采樣計(jì)劃 根據(jù)暴發(fā)疫情和臨床特點(diǎn)，首先 制定周密的采樣計(jì)劃。,采樣時(shí)生物安全考慮 采樣中避免污染對(duì)于人員和標(biāo)本都 是至關(guān)重要的，應(yīng)采用防護(hù)措施，注意 安全操作。,基本的安全要求如下 采樣戴手套；采樣中盡可能穿防護(hù)服； 消毒人員要穿戴防護(hù)服和厚橡膠手套；污染 的或材料應(yīng)先消毒后清洗或先消毒后廢棄； 使用口罩、護(hù)目鏡、呼吸面罩，用于防止有 高度傳染力的可吸入病原；特殊情況下可搭 建簡易焚燒爐，焚燒后將廢棄物深埋。,采樣時(shí)間 懷疑細(xì)菌感染時(shí)應(yīng)盡量在急性發(fā)作期 和使用抗菌素之前采集標(biāo)本，進(jìn)行細(xì)菌的 分離、培養(yǎng)。病毒分離培養(yǎng)和抗原檢測的 標(biāo)本應(yīng)在發(fā)病初期（如 1-2天內(nèi)）和急性 期采集。,采樣容器、標(biāo)識(shí) 采集標(biāo)本應(yīng)使用無菌容器，一個(gè)標(biāo)本一個(gè) 容器。對(duì)容器基本要求是選耐用材料制成，容 器包裝好后可防滲漏。能承受空中地面運(yùn)送過 程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化。 標(biāo)本標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)齊全。在暴發(fā)調(diào)查中個(gè)案 調(diào)查的信息應(yīng)和標(biāo)本同時(shí)收集，并且能夠互相 符合等。,b)病原微生物標(biāo)本的保存 為分離標(biāo)本中病原細(xì)菌或病毒，應(yīng)選擇合 適的培養(yǎng)基和保存液，并注意保存濕度。用于 分離培養(yǎng)病毒的標(biāo)本一般應(yīng)放在0 4的容 器內(nèi)，不能超過48小時(shí)。如不能立即分離病毒 或無條件立即運(yùn)送時(shí)應(yīng)凍存保存，長期保存的 標(biāo)本應(yīng)放入-70。 用于檢測抗原或抗體的標(biāo)本可在4C8C 保存2428h，在20C保存時(shí)間更長。檢測 抗體的血清可在4C保存約一個(gè)星期，最長10天；超過一周必須在-20C下冷凍。,c)病原微生物標(biāo)本的包裝和運(yùn)送 根據(jù)國際空運(yùn)和健康相關(guān)條例，菌毒種屬 于運(yùn)輸中的感染性材料，這類材料的包裝和運(yùn) 輸都必須符合世界衛(wèi)生組織對(duì)傳染性物質(zhì)和診 斷性標(biāo)本的安全運(yùn)送指南 （WHO）1997。在運(yùn) 送過程中的感染性物質(zhì)分為A、B類兩大類。,d)病原微生物的檢測 直接涂片鏡檢 細(xì)菌分離、培養(yǎng)和鑒定 病毒分離培養(yǎng)（動(dòng)物接種、雞胚 培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)）等,直接涂片鏡檢 直接涂片染色后鏡檢適用于形態(tài)和染 色上具有特征性的病原菌。 優(yōu)點(diǎn)是方便快捷，缺點(diǎn)是適用范圍小。,細(xì)菌分離、培養(yǎng)和鑒定 為了查明暴發(fā)疫情的原因?qū)Σ杉臉?biāo) 本最好做病原分離和培養(yǎng)，并且要進(jìn)行鑒 定。 細(xì)菌鑒定包括生化鑒定、血清鑒定與 分型。,病毒分離培養(yǎng) 動(dòng)物接種是比較老的一種方法，如用于 流行性出血熱的病毒分離。 雞胚的組織分化程度低，選擇適應(yīng)途徑 和部位接種病毒容易繁殖，操作簡便。雞胚 本身無菌，對(duì)接種的病毒不產(chǎn)生抗體，最常 用來分離流感病毒。 細(xì)胞培養(yǎng)是目前分離病毒中最常用的方 法。常用和細(xì)胞來源有兩種：一是原代細(xì)胞 培養(yǎng)；二是傳代細(xì)胞培養(yǎng)。,e)血清學(xué)檢測 用于病程較長的傳染病的診斷， 結(jié)果判斷時(shí)一般需要取患者急性期和 恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本。當(dāng)恢復(fù)期血清 抗體效價(jià)比急性期高4倍或4倍以上時(shí) 才有診斷意義。,f)免疫學(xué)檢測 免疫學(xué)檢測是感染病原檢測的首選辦 法，簡便快速，準(zhǔn)確率也較高。 凝集反應(yīng)包括直接凝集反應(yīng)、間接凝 集反應(yīng)、間接凝集抑制反應(yīng)和協(xié)同凝集反 應(yīng)。,g)核酸檢測和序列分析 核酸診斷主要用于檢測難以培養(yǎng)的微生物、或目前培養(yǎng)方法不敏感、花費(fèi)高或耗時(shí)太久的情況。 優(yōu)點(diǎn)：省時(shí)，靈敏性高。在嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)過程的條件下，對(duì)于病因診斷有很好的作用。缺點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)過程控制不嚴(yán)格時(shí)可能產(chǎn)生假陽性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)條件、經(jīng)驗(yàn)和試劑成本要求高。 因此在應(yīng)用時(shí)要考慮對(duì)疫情控制的需要，考慮必要性和可行性。,序列分析是測定核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的方 法，目前鑒定細(xì)菌或病毒特征的有效方 法。 對(duì)已知的病原體，通過特定序列測 定可以精確地鑒定出所屬的亞型；對(duì)未 知的病原體，通過序列測定可以確定其 在生物分類學(xué)上的歸屬。,h)現(xiàn)場快速檢測 快速檢測方法操作過程簡單，結(jié)果判斷不需借助儀器或只需要小型的儀器。 適合現(xiàn)場應(yīng)用，要求靈敏度高、對(duì)特異度的要求相對(duì)低些，以便能進(jìn)行初篩。 膠體金層析檢測卡優(yōu)點(diǎn)是方便快速，