實驗室建設與管理培訓第八章突發(fā)公共衛(wèi)生事件應急檢測.ppt

實驗室在突發(fā)公共衛(wèi)生 事件中的作用和任務 （微生物部分）,主 要 內 容 1. 突發(fā)公共衛(wèi)生事件的主要有害 因素 2. 實驗室在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中 的作用 3. 實驗室在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中 的任務、應急檢測技術、原則,1. 突發(fā)公共衛(wèi)生事件 的主要有害因素,1.1 病原微生物 包括致病菌和病毒、細菌、螺 旋體、真菌等。,1.2 微生物產(chǎn)生的毒素 毒素是微生物體內的代謝 產(chǎn)物。,1.3 病原寄生蟲 由于各種寄生蟲引起的寄生 蟲病。,1.4 病媒生物 如蚊子、蠅、虱、蟑螂等。,2. 實驗室在突發(fā) 公共衛(wèi)生事件中的作用,突發(fā)事件的處理，不僅是對疾 控機構，甚至是對一個城市醫(yī)療管 理水平和政府行政管理水平的嚴峻 挑戰(zhàn)。,疾控機構應在最短時間內采取 規(guī)范、科學、符合標準要求的快速 行動，以判斷原因，采取有效的對 策。,質量和速度是專業(yè)技術和管理 水平等綜合素質、反應能力的整體 體現(xiàn)。,2.1.1 危險性評估 突發(fā)事件發(fā)生后，衛(wèi)生行政部門應 組織專家進行綜合評估，初步判斷事件 類型，根據(jù)危害范圍和程度進行分級。 危險性評估需要現(xiàn)代化的實驗室、 快速的危險性評價技術等作為支撐。,2.1.2 危險性評估 提出是否啟動突發(fā)公共衛(wèi)生事件應 急預案的建議。 建立實驗室網(wǎng)絡，快速識別突發(fā)公 共衛(wèi)生事件的病因。,2.2.1 實驗室在傳染病疫情中的作用 無論是基礎研究還是應用研究都離不 開實驗室的工作，這些工作主要包括病原 學、檢測與診斷、預防與控制（包括疫苗 等）、藥品研究等方面。 病原學研究包括病原的鑒定、病原體 分子生物學、病原體可能的來源、病原體 致病機理等。,2.2.2 實驗室在傳染病疫情中的作用 傳染病的診斷需要綜合實驗室檢驗結 果，包括：流行病學資料、臨床病史、體 格檢查以及實驗室檢查結果,2.2.3 實驗室在傳染病疫情中的作用 病原體的檢出是確診傳染病的主要依 據(jù)。每一種傳染病都有特異的病原體，病 原體的檢出是確診的重要依據(jù)，應盡一切 可能分離到病原體。,3. 實驗室在突發(fā)公共衛(wèi) 生事件中的任務、應 急檢測技術、原則,3.1 統(tǒng)一指揮、 明確職責和分工 現(xiàn)場流調人員和實驗室人員之間 要緊密配合，相互溝通,3.2.1 檢驗技術能力的儲備 不同級別的實驗室應該具備的檢測能力不 一樣，省、地、縣級疾病預防控制中心實驗 室建設指導意見規(guī)定了省級疾病預防控制中 心實驗室必須開展的項目和選做的項目；地級 疾病預防控制中心實驗室必須開展的項目和選 做的項目；縣級疾病預防控制中心實驗室必須 開展的項目和選做的項目。,3.2.2 檢驗技術能力的儲備 突發(fā)公共衛(wèi)生事件有害因子的鑒別應該形 成一個自上而下的公共衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡。 下級實驗室鑒別不了的請示上級實驗室支 持，疾控機構解決不了的問題應邀請其他部門 和研究機構加入公共衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡，并建立 經(jīng)常性的聯(lián)系。 檢驗技術能力的儲備也包括各網(wǎng)絡內相關 實驗室檢測能力等信息的收集、整理。項目。,3.2.3 檢驗技術能力的儲備 人員業(yè)務素質、儀器設備、技術 資料、檢測試劑等。,3.3 實驗室在處理 傳染病疫情中的任務,主要內容： a)現(xiàn)場病原微生物標本的采集 b)病原微生物標本的保存 c)病原微生物標本的包裝和運送 d)病原學檢測 e)血清學檢測 f)免疫學檢測 g)核酸檢測和序列分析 h)現(xiàn)場快速檢測,a)現(xiàn)場病原微生物標本的采集 采樣計劃；采樣時生物安全考慮； 采樣時間；采樣容器、標識等。,采樣計劃 根據(jù)暴發(fā)疫情和臨床特點，首先 制定周密的采樣計劃。,采樣時生物安全考慮 采樣中避免污染對于人員和標本都 是至關重要的，應采用防護措施，注意 安全操作。,基本的安全要求如下 采樣戴手套；采樣中盡可能穿防護服； 消毒人員要穿戴防護服和厚橡膠手套；污染 的或材料應先消毒后清洗或先消毒后廢棄； 使用口罩、護目鏡、呼吸面罩，用于防止有 高度傳染力的可吸入病原；特殊情況下可搭 建簡易焚燒爐，焚燒后將廢棄物深埋。,采樣時間 懷疑細菌感染時應盡量在急性發(fā)作期 和使用抗菌素之前采集標本，進行細菌的 分離、培養(yǎng)。病毒分離培養(yǎng)和抗原檢測的 標本應在發(fā)病初期（如 1-2天內）和急性 期采集。,采樣容器、標識 采集標本應使用無菌容器，一個標本一個 容器。對容器基本要求是選耐用材料制成，容 器包裝好后可防滲漏。能承受空中地面運送過 程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化。 標本標簽內容應齊全。在暴發(fā)調查中個案 調查的信息應和標本同時收集，并且能夠互相 符合等。,b)病原微生物標本的保存 為分離標本中病原細菌或病毒，應選擇合 適的培養(yǎng)基和保存液，并注意保存濕度。用于 分離培養(yǎng)病毒的標本一般應放在0 4的容 器內，不能超過48小時。如不能立即分離病毒 或無條件立即運送時應凍存保存，長期保存的 標本應放入-70。 用于檢測抗原或抗體的標本可在4C8C 保存2428h，在20C保存時間更長。檢測 抗體的血清可在4C保存約一個星期，最長10天；超過一周必須在-20C下冷凍。,c)病原微生物標本的包裝和運送 根據(jù)國際空運和健康相關條例，菌毒種屬 于運輸中的感染性材料，這類材料的包裝和運 輸都必須符合世界衛(wèi)生組織對傳染性物質和診 斷性標本的安全運送指南 （WHO）1997。在運 送過程中的感染性物質分為A、B類兩大類。,d)病原微生物的檢測 直接涂片鏡檢 細菌分離、培養(yǎng)和鑒定 病毒分離培養(yǎng)（動物接種、雞胚 培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)）等,直接涂片鏡檢 直接涂片染色后鏡檢適用于形態(tài)和染 色上具有特征性的病原菌。 優(yōu)點是方便快捷，缺點是適用范圍小。,細菌分離、培養(yǎng)和鑒定 為了查明暴發(fā)疫情的原因對采集的標 本最好做病原分離和培養(yǎng)，并且要進行鑒 定。 細菌鑒定包括生化鑒定、血清鑒定與 分型。,病毒分離培養(yǎng) 動物接種是比較老的一種方法，如用于 流行性出血熱的病毒分離。 雞胚的組織分化程度低，選擇適應途徑 和部位接種病毒容易繁殖，操作簡便。雞胚 本身無菌，對接種的病毒不產(chǎn)生抗體，最常 用來分離流感病毒。 細胞培養(yǎng)是目前分離病毒中最常用的方 法。常用和細胞來源有兩種：一是原代細胞 培養(yǎng)；二是傳代細胞培養(yǎng)。,e)血清學檢測 用于病程較長的傳染病的診斷， 結果判斷時一般需要取患者急性期和 恢復期雙份血清標本。當恢復期血清 抗體效價比急性期高4倍或4倍以上時 才有診斷意義。,f)免疫學檢測 免疫學檢測是感染病原檢測的首選辦 法，簡便快速，準確率也較高。 凝集反應包括直接凝集反應、間接凝 集反應、間接凝集抑制反應和協(xié)同凝集反 應。,g)核酸檢測和序列分析 核酸診斷主要用于檢測難以培養(yǎng)的微生物、或目前培養(yǎng)方法不敏感、花費高或耗時太久的情況。 優(yōu)點：省時，靈敏性高。在嚴格控制實驗過程的條件下，對于病因診斷有很好的作用。缺點：實驗過程控制不嚴格時可能產(chǎn)生假陽性結果。實驗條件、經(jīng)驗和試劑成本要求高。 因此在應用時要考慮對疫情控制的需要，考慮必要性和可行性。,序列分析是測定核酸一級結構的方 法，目前鑒定細菌或病毒特征的有效方 法。 對已知的病原體，通過特定序列測 定可以精確地鑒定出所屬的亞型；對未 知的病原體，通過序列測定可以確定其 在生物分類學上的歸屬。,h)現(xiàn)場快速檢測 快速檢測方法操作過程簡單，結果判斷不需借助儀器或只需要小型的儀器。 適合現(xiàn)場應用，要求靈敏度高、對特異度的要求相對低些，以便能進行初篩。 膠體金層析檢測卡優(yōu)點是方便快速，