維生素d受體及維生素d受體激動(dòng)劑的研究進(jìn)展.doc

維生素d受體及維生素d受體激動(dòng)劑的研究進(jìn)展潘偉男，鄧水秀湖南食品藥品職業(yè)學(xué)院，湖南 長沙 410208摘要 維生素d受體為親核蛋白，屬于類固醇激素/甲狀腺激素受體超家族成員，在體內(nèi)主要介導(dǎo)維生素d的細(xì)胞作用。維生素d的主要代謝產(chǎn)物活性維生素d3在體內(nèi)作用廣泛，與維生素d受體結(jié)合后，不僅發(fā)揮經(jīng)典的鈣磷調(diào)節(jié)作用，還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與分化、調(diào)節(jié)免疫及抑制細(xì)胞壞死、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移等非鈣調(diào)作用。本文就維生素d受體的生物學(xué)特征和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、活性維生素d3及其衍生物維生素d受體激動(dòng)劑的有關(guān)研究進(jìn)展做一綜述。關(guān)鍵詞 維生素d；維生素d受體；活性維生素d3；維生素d受體激動(dòng)劑中圖分類號(hào) r961；r977.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 aprogress in research of vitamin d receptorand vitamin d receptor agonistspan weinan, deng shuixiuhunan food and drug voctional college, changsha hunan 410208【abstract】 vitamin d receptor (vdr) is ribonucleoprotein and belongs to superfamily of steroid hormone/thyroid hormone receptor. the main function of vdr is mediation of vitamin d. 1,25-(oh)2d3 is active vitamin d3 to seduce physiological action in vivo. active vitamin d3 and its analogue have the function in development, differentiation, immunoregulation, inhibition of cell necrosis and inhibition of tumor invasion and metastasis in addition to calcium and phosphorus metabolic regulation. this paper summarizes the research progress on the biological characteristics, signal transduction pathway of vdr and vitamin d receptor agonists.【key words】 vitamin d; vitamin d receptor; active vitamin d3; vitamin d receptor agonists第一作者簡介：潘偉男（1981-），男，講師，主要從事藥理學(xué)和職業(yè)教育研究。共同第一作者：鄧水秀（1980-），女，講師，主要從事藥理學(xué)和職業(yè)教育研究。維生素d（vitamin d，vit d）是不同的vit d原經(jīng)紫外線照射后形成的固醇類衍生物，是a、b、c、d環(huán)結(jié)構(gòu)相同，但側(cè)鏈不同的一類復(fù)合物的總稱。a、b、c、d 環(huán)結(jié)構(gòu)均來源于類固醇的環(huán)戊氫烯菲環(huán)，因此vit d也是一種類固醇激素1。植物中不含vit d，但vit d原在動(dòng)物和植物中均存在。目前已知的vit d 至少有10 種，但vit d家族中最重要的、與人類健康較為密切的成員是vit d2（麥角鈣化醇）和vit d3（膽鈣化醇）。vit d2是紫外線照射植物中的麥角固醇產(chǎn)生，自然界存在較少。vit d3是人體必需的脂溶性維生素，由大多數(shù)高等動(dòng)物的表皮和真皮層內(nèi)的7-脫氫膽固醇在紫外線（波長228 265nm）照射下經(jīng)光化學(xué)反應(yīng)在皮膚中轉(zhuǎn)化而成，也是vit d中生物代謝率最高的一種活性形式。經(jīng)皮膚轉(zhuǎn)化和腸道吸收的vit d3入血后，與特異性的vit d 結(jié)合蛋白-球蛋白結(jié)合，迅速進(jìn)入肝臟，先在肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體中經(jīng)25-羥化酶系統(tǒng)轉(zhuǎn)變?yōu)?5-羥膽鈣化醇（25-（oh）d3），再在腎近端小管上皮細(xì)胞線粒體1-羥化酶作用下，轉(zhuǎn)化為生物活性最強(qiáng)的活性vit d3即1,25-（oh）2 d3（calcitriol，鈣三醇）2。鈣三醇發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)后，在肝臟和小腸中轉(zhuǎn)化為1,24,25-（oh）3 d3而失活。在肝臟1,25-（oh）2 d3可與葡萄糖醛酸結(jié)合而隨膽汁從腸道排出，同時(shí)在小腸又被部分重吸收構(gòu)成vit d的肝腸循環(huán)?；钚詖it d主要是通過與vit d受體（vitamin d receptor，vdr）結(jié)合發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)3。1 vdr的生物學(xué)特征1969年laussler分離出一種分子量為45 50kd，沉降系數(shù)為3.2s，能與vit d特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)并將它命名為vdr。1988年baker等克隆出人vdr，它由427個(gè)氨基酸殘基組成。人類vdr基因位于12號(hào)常染色體長臂（12q13-14），其基因組dna全長為75kb，由9個(gè)外顯子和8個(gè)內(nèi)含子組成，翻譯起始密碼子位于第二個(gè)外顯子。人類vdr與大鼠、鳥類有很高的同源性，其中n端有95%相似，c端有93%同源。盡管不同種屬的vdr相對(duì)分子質(zhì)量差別很大，但它們的氨基酸和結(jié)構(gòu)組成非常相似。研究表明vdr從n端到c端可分為a、b、c、d、e、f 6個(gè)功能區(qū)（圖1），每個(gè)功能區(qū)分工不同但相互協(xié)作4,5。其中，a/b區(qū)（1 24位氨基酸）為n端短區(qū)，是不依賴于配體的細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄激活自主調(diào)節(jié)功能區(qū)，即af-1區(qū)，但其自主調(diào)節(jié)功能較弱。c區(qū)（24 91位氨基酸）為dna結(jié)合區(qū)（dna-binding domain，dbd），是vdr作為轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮作用必須的，它由vdr 基因外顯子、編碼，主要參與dna順序識(shí)別，可識(shí)別靶基因上的vit d 反應(yīng)元件（vitamin d responsive element，vdre）6，此區(qū)為核受體家族的特異性蛋白質(zhì)，具有高度保守性，人與大鼠、鳥類的同源性為98.5%。此外, 該區(qū)還參與vdr異二聚體的形成。dbd由8個(gè)保守的半胱氨酸組成兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)，每個(gè)鋅指形成一個(gè)a2螺旋，兩個(gè)a2螺旋相互垂直構(gòu)成dbd核心。d區(qū)（91 115位氨基酸）為一鉸鏈區(qū)（hinge region）和抗原決定區(qū)，有很強(qiáng)的免疫原性，但其確切結(jié)構(gòu)和功能尚未闡明，可能與核定位有關(guān)。e區(qū)（115 409位氨基酸）為配體結(jié)合區(qū)（ligand-binding domain，lbd），系vit d依賴性的轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域，由vdr基因外顯子v - ix編碼，是vdr高親和力地結(jié)合1,25-（oh）2 d3的主要部位。e區(qū)還介導(dǎo)與類視黃醇x受體（retinoid x receptor，rxr）形成異二聚體, 增強(qiáng)其與vdre的結(jié)合能力。vdr-rxr是發(fā)揮1,25-（oh）2 d3作用的分子開關(guān)，而1,25-（oh）2 d3可以穩(wěn)定這種開關(guān)構(gòu)象7。另外此區(qū)在近c(diǎn)端處存在一個(gè)配體依賴性的轉(zhuǎn)錄激活功能結(jié)構(gòu)域2（activation function 2，af-2），與af-1協(xié)同可促進(jìn)vdr和協(xié)同激活因子/協(xié)同抑制因子相結(jié)合，從而使vdr發(fā)揮調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄活性8。此外，e區(qū)對(duì)dna識(shí)別也有協(xié)同作用。f區(qū)（409 427位氨基酸）結(jié)構(gòu)和功能尚未闡明。圖1 維生素d受體蛋白4figure 1 vitamin d receptor proteinvdr為親核蛋白，是介導(dǎo)1,25-（oh）2 d3發(fā)揮生物效應(yīng)的核內(nèi)生物大分子，屬于類固醇激素/甲狀腺激素受體超家族成員。當(dāng)游離的鈣三醇以彌散方式進(jìn)入細(xì)胞后，可迅速轉(zhuǎn)移至核內(nèi)，與vdr的lbd結(jié)合形成復(fù)合物，引起vdr的構(gòu)象變化和磷酸化，從而使vdr轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨问剑⑴crxr形成異二聚體，vdr-rxr異二聚體可與靶基因啟動(dòng)子區(qū)域vdre結(jié)合形成vdr-rxr-vdre復(fù)合物, 進(jìn)而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性9。vdr是一個(gè)配體依賴性核轉(zhuǎn)錄因子，與1,25-（oh）2 d3一起在維持機(jī)體鈣磷代謝、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與分化、調(diào)節(jié)免疫及抑制細(xì)胞壞死、抑制腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移等方面發(fā)揮著重要作用。vdr在甲狀旁腺、腸道、胃、骨骼、腎臟、胰腺、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、t淋巴細(xì)胞等人體各組織細(xì)胞和許多癌細(xì)胞中廣泛存在，幾乎所有有核細(xì)胞均能表達(dá)vdr，結(jié)腸、腎上腺皮質(zhì)、肺等部位的細(xì)胞中表達(dá)量較高。vdr分為細(xì)胞膜受體（membrane vitamin d receptor，mvdr）和細(xì)胞核受體（nucler vitamin d receptor，nvdr）兩大類，其分子量分別為60kd和50kd。mvdr主要參與鈣磷平衡的維持，而nvdr通過影響基因表達(dá)來調(diào)控相應(yīng)蛋白質(zhì)的合成10。nvdr存在于人體的30個(gè)靶細(xì)胞內(nèi)，屬于核受體超家族成員，是介導(dǎo)1,25-（oh）2 d3發(fā)揮生物效應(yīng)的主要途徑。1,25-（oh）2 d3除了通過nvdr產(chǎn)生基因效應(yīng)作用于靶細(xì)胞外，還存在由mvdr介導(dǎo)的快速非基因效應(yīng)，該效應(yīng)產(chǎn)生和完成所需要的時(shí)間僅為數(shù)秒到數(shù)分鐘，而基因效應(yīng)通常需要數(shù)小時(shí)到數(shù)天才可顯現(xiàn)出來10。norman等研究表明1,25-（oh）2 d3在小腸對(duì)ca2+快速吸收、胰島細(xì)胞分泌胰島素、破骨細(xì)胞離子通道的開放和內(nèi)皮細(xì)胞的快速遷移等方面均發(fā)揮了快速非基因效應(yīng)10。2 vdr相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 研究表明，1,25-（oh）2 d3對(duì)激活人體免疫系統(tǒng)至關(guān)重要11。由于人原態(tài)t細(xì)胞中的磷脂酶c-1（plc-1）含量較低，導(dǎo)致plc-1依賴的t細(xì)胞受體信號(hào)通路被抑制，而1,25-（oh）2 d3作用于vdr可誘導(dǎo)plc-1基因表達(dá)，使plc-1含量上升至原來的75倍，從而激活plc-1依賴的t細(xì)胞受體信號(hào)通路，促使t細(xì)胞檢測并殺死細(xì)菌、病毒等外來病原體11。1,25-（oh）2 d3通過多種途徑和機(jī)制干擾腫瘤細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤血管新生以及協(xié)同增強(qiáng)其它抗腫瘤藥物的活性4。研究顯示，1,25-（oh）2 d3對(duì)前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌和急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病、骨髓增生異常綜合征等均有較好的防治作用12,13。1,25-（oh）2 d3的抗腫瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路包括：（1）1,25-（oh）2 d3通過抑制表皮生長因子（epidermal growth factor，egf）和胰島素樣生長因子1（insulin-like growth factor-1，igf-1）來抑制絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，mapk）細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶l/2（extracellular-signal regulated kinase1/2，erk1/2）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡。（2）1,25-（oh）2 d3可通過igfr-1磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，pi3k）akt依賴的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，抑制端粒酶活性，負(fù)調(diào)節(jié)bcl2、誘導(dǎo)bax以及激活半胱氨酸蛋白酶（caspase）清除能力等，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。（3）1,25-（oh）2 d3可通過作用于s期激酶相關(guān)蛋白（s-phase kinase associated protein-2，skp2）泛素連接酶，降解p27；作用于myc，使prb去磷酸化，并影響轉(zhuǎn)化生長因子-（transforming growth factor-，tgf-）的交互調(diào)節(jié)等，干擾腫瘤細(xì)胞的周期，最終影響調(diào)節(jié)細(xì)胞周期基因轉(zhuǎn)錄相關(guān)的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤袋狀蛋白（prb及p107/p130）、轉(zhuǎn)錄因子e2f家族、dp多肽（dp-1）異質(zhì)二聚體之間的結(jié)合。e2f-1，2和3與高度磷酸化的prb結(jié)合，以及e2f-4，5轉(zhuǎn)錄抑制子、dp-1異質(zhì)二聚體與p107/p130的結(jié)合，使腫瘤細(xì)胞周期停滯。（4）1,25-（oh）2 d3作用于vdr可誘導(dǎo)e-鈣粘蛋白的表達(dá)，以抑制myc、轉(zhuǎn)錄因子tcf-1、細(xì)胞表面糖蛋白cd44及過氧化物酶體增殖物活化受體（peroxisome proliferator- activated receptor，ppar）等，從而發(fā)揮抗腫瘤的作用14（圖2）。圖2 活性維生素d3與腫瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)4figure 2 active vitamin d3 and tumor signal transduction3 活性維生素d3及其衍生物vdr激動(dòng)劑活性維生素d3及其衍生物vdr激動(dòng)劑（vitamin d receptor agonist，vdra）多為生物制劑，與vdr有較高的親和力，相對(duì)比較安全，在調(diào)節(jié)免疫、預(yù)防糖尿病、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡等方面的作用備受關(guān)注。與目前常用的絕大多數(shù)抗腫瘤藥物相比，活性維生素d3及其衍生物的不良反應(yīng)較少，主要是高鈣血癥，偶在大劑量應(yīng)用時(shí)出現(xiàn)心臟毒性或泌尿系結(jié)石等。目前臨床應(yīng)用的vdra主要分為非選擇性vdra和選擇性vdra兩大類。非選擇性vdra主要包括阿法骨化醇、骨化二醇、骨化三醇和度骨化醇等；選擇性vdra主要包括鈣泊三醇、他卡西醇、帕立骨化醇、馬沙骨化醇、氟骨三醇和西奧骨化醇等。3.1 阿法骨化醇阿法骨化醇（alfacalcidol）分子式為c27h44o2，分子量為400.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖3，是由中外制藥株式會(huì)社和帝人制藥株式會(huì)社聯(lián)合開發(fā)的第1代活性維生素d3類藥物，1981年在日本獲準(zhǔn)上市。阿法骨化醇在肝臟經(jīng)25-羥化酶作用迅速轉(zhuǎn)化成1,25-（oh）2 d3，其臨床效應(yīng)與后者基本一致，主要作用機(jī)理是提高血液循環(huán)中1,25-（oh）2 d3水平，增加小腸和腎小管對(duì)鈣、磷的重吸收，抑制甲狀旁腺增生，減少甲狀旁腺激素合成與釋放，降低血漿中甲狀旁腺激素水平，同時(shí)促進(jìn)骨礦化，減少骨鈣消溶，調(diào)節(jié)鈣磷平衡。另外還可增加tgf-和igf-1合成，促進(jìn)膠原和骨基質(zhì)蛋白合成，并能調(diào)節(jié)肌肉鈣代謝，促進(jìn)肌細(xì)胞分化，增強(qiáng)肌力，增加神經(jīng)肌肉協(xié)調(diào)性，減少跌倒傾向。臨床上適用于防治骨質(zhì)疏松癥，腎源性骨病，繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)（伴有骨病者），甲狀旁腺功能減退，營養(yǎng)和吸收障礙引起的佝僂病和骨軟化癥，假性缺鈣的佝僂病和骨軟化癥等15。3.2 骨化二醇骨化二醇（calcifediol）分子式為c27h44o2，分子量為400.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖4，是由美國upjohn公司開發(fā)的第1代活性維生素d3類藥物，1982年獲準(zhǔn)上市。它是自然存在人體內(nèi)vit d3的活性代謝產(chǎn)物，也是腎臟羥化成三醇的中間體。骨化二醇能促進(jìn)小腸鈣、磷吸收，提高血清鈣、磷濃度，降低堿性磷酸酶和某些病人的甲狀旁腺激素水平，減少某些病人的礦物質(zhì)缺乏現(xiàn)象，主要適用于防治代謝性骨病、各種慢性骨紊亂和腎臟疾病，對(duì)進(jìn)行腎透析的慢性腎衰患者的低鈣血癥、缺乏性佝僂病、各類難治型佝僂病、老年性骨質(zhì)疏松癥、抗驚厥藥引起的骨質(zhì)疏松癥等有較好的療效。骨化二醇常規(guī)劑量服用，一般無明顯不良反應(yīng)，服用過量會(huì)引起vit d中毒，出現(xiàn)乏力、頭痛、嗜睡、惡心、嘔吐、口干、多尿、煩渴、易怒、消瘦、便秘、肌肉痛、骨痛和金屬味等癥狀。另外，消膽胺和抗驚厥藥可影響患者對(duì)骨化二醇的需要量；合用洋地黃類時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎使用本品，以防止心律失常16。 圖3 阿法骨化醇 圖4 骨化二醇figure 3 alfacalcidol figure 4 calcifediol3.3 骨化三醇骨化三醇（羅蓋全，rocalirol，calcitriol）分子式為c27h44o3，分子量為416.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖5，是由羅氏公司開發(fā)的第1代活性維生素d3類藥物，1982年獲準(zhǔn)上市，已被美國、英國、澳大利亞、意大利、日本和新西蘭等國家批準(zhǔn)為防治骨質(zhì)疏松癥、腎性骨營養(yǎng)不良和甲狀旁腺功能低下的藥物并廣泛應(yīng)用于臨床17。骨化三醇可直接作用于小腸，促進(jìn)腸道對(duì)鈣磷的吸收及腎小管對(duì)鈣的重吸收，升高血中鈣磷含量，增加鈣磷對(duì)骨的供應(yīng)，促進(jìn)骨骼正常鈣化。該藥能活化破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞，通過血鈣增加所致的反饋?zhàn)饔?，使甲狀旁腺分泌減少，破骨作用減弱而成骨作用相對(duì)增強(qiáng)，最終使骨量丟失延緩，有效緩解骨質(zhì)疏松癥患者的疼痛并降低發(fā)病率。骨化三醇的半衰期較短，藥動(dòng)學(xué)研究表明停藥或減量數(shù)天后，鈣含量即可恢復(fù)正常，這一過程比vit d3快，一旦出現(xiàn)不良反應(yīng)，停藥即可避免高血鈣綜合征或鈣中毒等。骨化三醇也有助于恢復(fù)或降低過高的血清堿性磷酸酶和甲狀腺素水平，對(duì)于手術(shù)后甲狀旁腺功能低下、特發(fā)性甲狀旁腺功能低下和假性甲狀旁腺功能低下，可以緩解低血鈣及其臨床癥狀。至于vit d依賴性佝僂病，其血清骨化三醇水平極低或?yàn)榱悖赡I臟合成的內(nèi)源性骨化三醇不足，需要本藥替代治療。對(duì)于抗vit d型佝僂病，雖然長期療效尚未肯定，服用本藥可能有益，某些患者服用后能緩解低血磷癥。3.4 鈣泊三醇第2代活性維生素d3類藥物鈣泊三醇（卡泊三醇，calcipotriol）分子式為c27h40o3，分子量為412.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖6。1988年calverley首先報(bào)道其合成，由丹麥leo pharmaceuticals produs公司開發(fā)生產(chǎn)，1991年在英國、丹麥和愛爾蘭上市。角質(zhì)細(xì)胞、附件細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、單核細(xì)胞、t淋巴細(xì)胞和已激活的b淋巴細(xì)胞等參與銀屑病發(fā)病的皮膚細(xì)胞中均有vdr，而鈣泊三醇是角質(zhì)細(xì)胞分化和增生的強(qiáng)調(diào)節(jié)劑，其與nvdr結(jié)合后，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)生物變化，減少銀屑病患者表皮白細(xì)胞介素-6（interleukin-6, il-6）含量及活化的表皮t淋巴細(xì)胞數(shù)，抑制角質(zhì)細(xì)胞過度增生并誘導(dǎo)其分化成熟，使細(xì)胞按正常規(guī)律生長增殖，糾正銀屑病皮損的增生及分化異常。鈣泊三醇也能與皮膚炎癥和免疫應(yīng)答中的細(xì)胞激肽途徑相互作用并加以調(diào)節(jié)，抑制炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答。本藥主要用于治療紅皮病型銀屑病、膿皰性銀屑病等嚴(yán)重銀屑病及其他角化性皮膚病。少數(shù)患者使用時(shí)可能出現(xiàn)暫時(shí)性局部刺激，極少數(shù)患者可能發(fā)生面部皮炎等不良反應(yīng)。以鈣泊三醇為主要成分的dovonex軟膏于2000年在日本上市，它對(duì)干性癬患者皮膚具有中等程度以上的改善，而對(duì)全身鈣代謝調(diào)節(jié)影響較小18。 圖5 骨化三醇 圖6 鈣泊三醇figure 5 rocalirol figure 6 calcipotriol3.5 他卡西醇第3代活性維生素d3類藥物他卡西醇（tacalcitol）分子式為c27h44o3，分子量為416.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖7，由日本帝人制藥株式會(huì)社醫(yī)藥巖國制造所開發(fā)，1993年獲準(zhǔn)上市。他卡西醇軟膏劑于2002年上市，商品名為bonalfa。研究表明，他卡西醇對(duì)白鼠表皮培養(yǎng)細(xì)胞、正常人或銀屑病患者表皮培養(yǎng)細(xì)胞的特異性vdr有很強(qiáng)的親和性，能抑制dna合成和細(xì)胞分裂、使s期細(xì)胞減少、促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)不溶性膜的形成、抑制表皮細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)表皮細(xì)胞分化。另外，對(duì)銀屑病患者涂抹bonalfa后的病灶部位皮膚進(jìn)行電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)角質(zhì)層蛋白模型形成及表皮透明角質(zhì)蛋白顆粒層形成等正常角化傾向18。他卡西醇主要用于治療銀屑病、魚鱗癬、掌跖膿包病、掌跖角化病、毛孔性紅糠疹及角化癥等。少數(shù)患者使用時(shí)可能出現(xiàn)瘙癢、發(fā)紅、腫脹、刺激感、微痛感等皮膚癥狀，頭痛和谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶上升等不良反應(yīng)。bonalfa大量涂抹有使血鈣上升的可能性，在癥狀未得到改善的情況下應(yīng)停止使用；注意不要涂在眼角膜、結(jié)膜上；高齡者注意不要過量使用；妊娠期、哺乳期婦女應(yīng)避免大量或長期大面積使用。3.6 帕立骨化醇由美國雅培（abbott）公司研發(fā)的帕立骨化醇（paricalcitol），是第一個(gè)用于治療腎病的第3代活性維生素d3 類藥物，分子式為c27h44o3，分子量為416.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖8。帕立骨化醇注射液（商品名zemplar）于1998年在美國首次獲準(zhǔn)上市，用于防治與慢性腎?。ń邮苎和肝龅穆阅I病患者）相關(guān)的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥（secondary hyperparathyroidism，shpt），具有抑制甲狀旁腺激素（parathyroid hormon，pth）分泌，降低血漿pth水平的作用，對(duì)血鈣、血磷水平影響較小，并于2002年在歐盟國家獲得上市許可，目前已在60余個(gè)國家應(yīng)用。2004年美國食品和藥物管理局（food and drug administration，fda）批準(zhǔn)zemplar用于治療5 19 歲青少年腎透析患者的shpt。2005年美國fda批準(zhǔn)帕立骨化醇膠囊劑用于shpt，對(duì)接受透析和移植手術(shù)前的期、期慢性腎臟疾病患者的shpt 具有防治作用18。本品常見的不良反應(yīng)為高鈣血癥，這與過度抑制pth有關(guān)，通過適當(dāng)調(diào)整劑量可使其發(fā)生率降低。另外偶見治療不當(dāng)引發(fā)的vit d中毒及過敏反應(yīng)。 圖7 他卡西醇 圖8 帕立骨化醇figure 7 tacalcitol figure 8 paricalcitol3.7 度骨化醇度骨化醇（doxercalciferol）分子式為c28h44o2，分子量為412.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖9，是由美國bone care international公司研制的第3代活性維生素d3類藥物，1999年獲準(zhǔn)上市。度骨化醇可作為骨化三醇的適宜替代物，安全地抑制pth，用于治療骨質(zhì)疏松癥和shpt等15，它也是首個(gè)用于shpt適應(yīng)癥的維生素d2類似物，目前正在進(jìn)行度骨化醇治療前列腺癌、結(jié)腸癌和乳腺癌的中期臨床研究。最近研究表明，度骨化醇對(duì)骨髓增生異常綜合癥（myelodysplastic syndromes，mds）、慢性粒單核細(xì)胞白血?。╟hronic myelomonocytic leukemia，cmml）等惡性腫瘤有一定的療效。本品常見的不良反應(yīng)為高鈣血癥，這與過度抑制pth有關(guān)，通過適當(dāng)調(diào)整劑量可使其發(fā)生率降低。3.8 馬沙骨化醇馬沙骨化醇（maxacalcitol）是由日本中外制藥株式會(huì)社開發(fā)的第3代新型活性維生素d3類藥物，分子式為c26h42o4，分子量為418.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖10。馬沙骨化醇注射液（商品名oxarol）于2000年上市，用于治療shpt引起的vit d代謝異常。對(duì)正常牛甲狀旁腺細(xì)胞以及慢性腎功能衰竭引起shpt患者的甲狀旁腺細(xì)胞研究顯示，馬沙骨化醇有抑制pth分泌的作用。在腎功能衰竭動(dòng)物模型上，本品在不引起血鈣升高的情況下，對(duì)pth分泌仍有抑制作用。對(duì)腎炎大鼠的研究表明，馬沙骨化醇可減少shpt導(dǎo)致的骨骼病變。此外，對(duì)狗腎功能衰竭模型的骨病變也有抑制纖維性骨形成的作用。對(duì)正常大鼠和腎功能衰竭的大鼠，本品能抑制甲狀旁腺激素原mrna的表達(dá)，還可作用于成骨細(xì)胞樣細(xì)胞，促進(jìn)骨鈣素基因的表達(dá)。馬沙骨化醇軟膏于2001年上市，它與人表皮角質(zhì)細(xì)胞的vdr結(jié)合后進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi), 抑制表皮角質(zhì)細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其分化，對(duì)皮膚紅斑、鱗屑、肥厚等干癬類皮膚病具有顯著的改善和治療效果18。馬沙骨化醇對(duì)il-6分泌及t 淋巴細(xì)胞增殖也具有抑制作用。本品主要不良反應(yīng)為高鈣血癥，其次是失眠、瘙癢感、肌酸激酶水平上升、焦躁感及肌紅蛋白、乳糖脫氫酶、血清無機(jī)磷水平上升和白細(xì)胞分化的淋巴細(xì)胞異常、嗜酸性粒細(xì)胞異常等。本品與阿法骨化醇、骨化三醇合用時(shí)有可能使血清鈣值上升，與洋地黃類合用時(shí)有可能導(dǎo)致心律失常。 圖9 度骨化醇 圖10 馬沙骨化醇figure 9 doxercalciferol figure 10 maxacalcitol3.9 氟骨三醇氟骨三醇（falecalcitriol）是由日本大正制藥株式會(huì)社和住友株式會(huì)社聯(lián)合開發(fā)的第3代新型活性維生素d3類藥物，分子式為c27h38f6o3，分子量為524.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖11。氟骨三醇于2001年獲準(zhǔn)上市，可用于治療骨質(zhì)疏松等鈣代謝失調(diào)癥以及甲狀旁腺功能亢進(jìn)18，試用于治療接受血液透析的慢性腎功能衰竭患者的shpt。在多種生物檢測系統(tǒng)中，氟骨三醇均比骨化三醇表現(xiàn)出更強(qiáng)的生物活性。體外試驗(yàn)中，比較了氟骨三醇與骨化三醇對(duì)大鼠成骨細(xì)胞株rob-c26 vit d-反應(yīng)性基因的激活作用。在加入vit d后6 h檢測1,25-(oh)2d3-24羥化酶mrna表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)氟骨三醇的作用比骨化三醇強(qiáng)10倍，其在細(xì)胞內(nèi)的滯留時(shí)間更長，能持久激活細(xì)胞內(nèi)的靶基因。對(duì)腎切除大鼠的研究結(jié)果顯示，本品對(duì)慢性腎衰引起的shpt和骨營養(yǎng)不良有一定治療作用，且用藥劑量低于骨化三醇。3.10 西奧骨化醇西奧骨化醇（seocalcito）是由丹麥leo pharmaceuticals produs公司研制的第3代新型活性維生素d3類藥物，代號(hào)為eb1089，分子式為c30h46o3，分子量為454.6，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖12，目前已進(jìn)入臨床期試驗(yàn)。臨床前研究表明，西奧骨化醇與vdr有很高的親和力，抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的能力是骨化三醇的50 200倍，可用于治療前列腺癌、乳腺癌、肝癌、結(jié)腸癌等19。西奧骨化醇還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，清除對(duì)輻射有耐受性的細(xì)胞，同時(shí)它增加血清鈣、磷濃度的作用較弱，幾乎不會(huì)引起機(jī)體血鈣上升，因此在腫瘤治療過程中引起高血鈣或骨骼變化的可能性降低，有望成為新型的抗腫瘤藥物。 圖11 氟骨三醇 圖12 西奧骨化醇figure 11 falecalcitriol figure 12 seocalcito4 研究前景與展望活性維生素d3及其衍生物vdra多為生物制劑，與vdr親和力很高20，不良反應(yīng)較小，相對(duì)比較安全，作為一種細(xì)胞循環(huán)調(diào)節(jié)劑，在免疫調(diào)節(jié)、預(yù)防糖尿病、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡等方面具有巨大的應(yīng)用價(jià)值和發(fā)展前景?；钚跃S生素d3及其衍生物的抗腫瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑眾多，機(jī)制極為復(fù)雜，對(duì)不同來源的腫瘤細(xì)胞作用機(jī)制也不盡相同，解釋其關(guān)鍵環(huán)節(jié)仍面臨漫長的道路。盡管已有臨床研究證明活性維生素d3及其衍生物對(duì)多種疾病有效，但其安全有效的劑量仍需進(jìn)一步探索。目前活性維生素d3及其衍生物的研究方向主要是結(jié)構(gòu)的改造和修飾，使其鈣磷調(diào)節(jié)作用與非鈣調(diào)作用徹底分離。近年來，c-2取代、19-失碳、a環(huán)修飾、a環(huán)和側(cè)鏈同時(shí)改造、非天然構(gòu)型的活性維生素d3衍生物的合成及其活性研究非?；钴S，眾多科學(xué)家致力于探索其構(gòu)效關(guān)系，正進(jìn)一步開發(fā)第4代選擇性更強(qiáng)的活性維生素d3類藥物。隨著研究的深入，新型活性維生素d3類藥物必將在治療癌癥、老年性癡呆、免疫功能紊亂和心腦血管病等方面得到更廣泛的應(yīng)用。參考文獻(xiàn)1 michigami t. vitamin d metabolism and action. clinical calcium, 2007, 17(10): 1493-1498.2 posner g.h., kahraman m. organic chemistry of vitamin d analogues (deltanoids). european journal of organic chemistry, 2003, 2003(20): 3889-3895.3 heikkinen s., vaisanen s., pehkonen p., et 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