無菌枕質(zhì)量控制手冊(cè).doc

上海普麗盛輕工設(shè)備有限公司 高新技術(shù)企業(yè) 無菌枕質(zhì)量控制手冊(cè) 第19頁/共19頁目 錄前言-21質(zhì)量術(shù)語說明-32質(zhì)量控制內(nèi)容-4621質(zhì)量說明與檢驗(yàn)放行-422質(zhì)量控制內(nèi)容-463無菌枕生產(chǎn)工藝說明及質(zhì)量控制要求-7931原奶接收與處理-732預(yù)處理-733超高溫滅菌及無菌灌裝工段-84無菌枕生產(chǎn)衛(wèi)生規(guī)范-941工廠衛(wèi)生要求-942灌裝間衛(wèi)生要求-95質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序-101651實(shí)驗(yàn)室儀器與設(shè)施基本配置-1052質(zhì)量控制檢驗(yàn)方法-10166無菌枕式包裝機(jī)機(jī)手包裝完整性檢查內(nèi)容- 177品控員包裝完整性檢查要求- 18前 言 無菌枕在市場上的推出，引起了廣大消費(fèi)者的極大關(guān)注。由于產(chǎn)品市場價(jià)位合理、質(zhì)量穩(wěn)定、以及運(yùn)輸成本低廉（無需冷藏），在市場上頗具競爭力。同時(shí)，無菌枕的推出還解決了國內(nèi)奶源分布不均和冷鏈系統(tǒng)不健全的問題，并有效地推動(dòng)了國內(nèi)液態(tài)乳市場的發(fā)展。無菌枕牛奶從衛(wèi)生、安全及營養(yǎng)上均優(yōu)于傳統(tǒng)的塑料袋牛奶及無菌塑料袋牛奶，它的出現(xiàn)從根本上提高了國民生活質(zhì)量，因此將擁有廣闊的市場發(fā)展空間。然而，就國內(nèi)現(xiàn)狀而言，大部分引入無菌枕灌裝線的客戶缺乏超高溫滅菌乳方面的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，有些甚至從未涉足食品生產(chǎn)行業(yè)，對(duì)于他們來講，制定原奶、半成品及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、建立無菌枕質(zhì)量控制系統(tǒng)是當(dāng)務(wù)之急。本手冊(cè)目的在于幫助客戶建立基本的質(zhì)量控制系統(tǒng)、實(shí)施衛(wèi)生規(guī)范及完善基本的硬件設(shè)施。質(zhì)量系統(tǒng)的建立應(yīng)充分考慮到“質(zhì)量最適”原則及質(zhì)量可提高性，客戶應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，在不同的發(fā)展階段，選擇實(shí)施相關(guān)建議，逐步實(shí)現(xiàn)從質(zhì)量控制到質(zhì)量保證的過渡，提高產(chǎn)品質(zhì)量的競爭力。本手冊(cè)中如有與國家或地方有關(guān)法規(guī)相抵觸的，請(qǐng)遵守并執(zhí)行相關(guān)法規(guī)中的具體規(guī)定。說明：普麗盛公司提出以上建議，目的在于幫助客戶提高產(chǎn)品質(zhì)量。然而，由于普麗盛公司無法直接控制整個(gè)生產(chǎn)運(yùn)作，故由此產(chǎn)生的結(jié)果將與普麗盛公司無關(guān)。1 質(zhì)量術(shù)語說明1.1 質(zhì)量：產(chǎn)品滿足消費(fèi)者期望和實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)者承諾的因素的總和。1.2 質(zhì)量控制：質(zhì)量控制，即通過取樣、檢查或檢測、將結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)相比較，以判定原料、半成品及成品指標(biāo)是否符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。1.3 質(zhì)量方針：質(zhì)量方針是企業(yè)的質(zhì)量宗旨和質(zhì)量方向，使企業(yè)經(jīng)營的總方針的一個(gè)組成部分，也是企業(yè)質(zhì)量行為的準(zhǔn)則。由于企業(yè)的質(zhì)量方針體現(xiàn)了企業(yè)管理層的質(zhì)量指導(dǎo)思想和市場承諾，因此它需要由企業(yè)的最高管理層制定和簽發(fā)，并且形成文件。1.4 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與AQL：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)質(zhì)量要求中的一個(gè)方面或生產(chǎn)過程中的某個(gè)環(huán)節(jié)或操作的具體描述和規(guī)定，它們是用于闡明各種要求的文件。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是有限定范圍的。 AQL：即產(chǎn)品的可接受質(zhì)量水平。是企業(yè)質(zhì)量方針中的一個(gè)重要組成。它不是對(duì)某一批產(chǎn)品質(zhì)量合格率的描述，而是對(duì)企業(yè)連續(xù)生產(chǎn)中產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性的評(píng)價(jià)。 在超高溫產(chǎn)品生產(chǎn)中，最重要的產(chǎn)品質(zhì)量缺陷是由各種微生物原因引起的產(chǎn)品壞包（包括脹包、酸包、苦包、臭包等）。因此，產(chǎn)品可接受質(zhì)量水平定義為最大可接受壞包率，即在正產(chǎn)的生產(chǎn)狀態(tài)下，由微生物所引起的壞包所占的比例。1.5 商業(yè)無菌：滅菌乳的微生物指標(biāo)為商業(yè)無菌，具體定義為：產(chǎn)品中不含致病菌。 產(chǎn)品中不含微生物毒素。 在正常的倉儲(chǔ)、運(yùn)輸條件下，微生物不在產(chǎn)品中增殖。商業(yè)無菌不是絕對(duì)無菌！2 質(zhì)量控制內(nèi)容21 質(zhì)量說明與檢驗(yàn)放行質(zhì)量控制的基本要求是，制定質(zhì)量說明、確認(rèn)取樣點(diǎn)，并對(duì)某些關(guān)鍵點(diǎn)的關(guān)鍵指標(biāo)建立待檢與放行制度。22 質(zhì)量控制內(nèi)容質(zhì)量控制內(nèi)容主要包括：原料質(zhì)量控制、半成品質(zhì)量控制、及成品質(zhì)量控制。下面以純牛奶生產(chǎn)為例，就無菌枕生產(chǎn)質(zhì)量控制內(nèi)容加以說明。221 原奶質(zhì)量控制 用以保證原奶質(zhì)量符合原奶質(zhì)量說明，基本包括感官指標(biāo)、理化指標(biāo)、以及微生物指標(biāo)三個(gè)方面的檢驗(yàn)。具體如下：1） 酒精試驗(yàn)：75%（V/V）酒精試驗(yàn)通過；2） 酸度（或PH值）：1618T（PH6.66.8）；3） 常規(guī)理化檢驗(yàn)如：蛋白質(zhì)、脂肪、總干物質(zhì)或非乳脂固體含量；4） 芽孢總數(shù)1000cfu/ml，耐熱芽孢總數(shù)100cfu/ml。鑒于無菌枕貨架期較短，并且細(xì)菌營養(yǎng)體對(duì)滅菌效果影響不大，對(duì)菌落總數(shù)的檢測，本手冊(cè)不作推薦；但適當(dāng)控制菌落總數(shù)，有利于提高產(chǎn)品口味、保持營養(yǎng)價(jià)值、延長生產(chǎn)時(shí)間以及增強(qiáng)產(chǎn)品的競爭力。222 半成品質(zhì)量控制 確認(rèn)進(jìn)入超高溫滅菌設(shè)備的半成品滿足滅菌機(jī)加工要求，取樣點(diǎn)建議設(shè)在超高溫設(shè)備平衡槽處，檢測項(xiàng)目為：） 芽孢總數(shù)：1000cfu/ml） 耐熱芽孢總數(shù)：100cfu/ml） PH6.66.8 223 成品質(zhì)量控制 確認(rèn)投放市場的產(chǎn)品符合成品質(zhì)量要求，包括基本的理化及微生物指標(biāo)。所有指標(biāo)均應(yīng)符合相關(guān)的國際標(biāo)準(zhǔn)。 成品取樣分為隨機(jī)取樣與目的取樣。隨機(jī)取樣，確認(rèn)批產(chǎn)品是否符合放行標(biāo)準(zhǔn)，推薦程序如下：） 取樣方法及取樣數(shù)量每間隔一段時(shí)間取樣一次（盡量保證取樣間隔均勻分布于整個(gè)生產(chǎn)過程），每次連續(xù)取兩包，正常情況下，生產(chǎn)企業(yè)每批產(chǎn)品、每條生產(chǎn)線隨機(jī)取樣量為包；） 檢測方法隨機(jī)樣品在下保溫天后，進(jìn)行外觀、感官、值及微生物劃線檢驗(yàn)。） 結(jié)果評(píng)判以下任何一項(xiàng)缺陷則可視為壞包：.外觀檢驗(yàn)，脹包、泄露或損壞；.感官檢驗(yàn)，色質(zhì)、氣味、口味、組織狀態(tài)發(fā)生變化；. PH變化,PH變化大于.，并由劃線試驗(yàn)對(duì)微生物污染加以確認(rèn)；.微生物劃線檢驗(yàn)呈陽性。）放行程序以下列舉了成品放行程序?qū)嵗?，但具體執(zhí)行何種放行程序，應(yīng)由生產(chǎn)廠家自行確定。實(shí)例見圖二。舉例:目的取樣，用于剔除由于生產(chǎn)狀態(tài)發(fā)生變化引起質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)的增加所帶來的不合格產(chǎn)品。推薦取樣點(diǎn)及取樣量如下：生產(chǎn)開始：包；替換包材前后：包（前后各包）；灌裝機(jī)短停后開機(jī)：包；生產(chǎn)結(jié)束前：包；其他情況，如調(diào)整封合溫度或機(jī)器設(shè)定時(shí)：包。目的樣應(yīng)標(biāo)明目的取樣代碼及生產(chǎn)時(shí)間。目的樣的檢測方法與隨機(jī)樣完全相同，但由于不同的取樣原理及檢測目的，目的樣的檢測結(jié)果必須與隨機(jī)樣的檢測結(jié)果分開統(tǒng)計(jì)。目的：驗(yàn)證機(jī)器不正常時(shí)的無菌性，衡量操作是否規(guī)范。無菌枕生產(chǎn)工藝說明及質(zhì)量控制要求.原奶接收與處理3.1.1原奶處理工藝流程圖（圖三）：. 工藝說明與質(zhì)量控制）原奶接收時(shí)，首先創(chuàng)建批號(hào)，經(jīng)過取樣檢驗(yàn)合格后方可投入使用；）原奶接收人員應(yīng)注意衛(wèi)生操作規(guī)范，防止原奶污染；）原奶接收處安裝防蠅、滅蠅及防鼠設(shè)施；）初次殺菌有利于殺死原奶中的低溫菌，延長貯存時(shí)間；）脫氣可以提高牛奶標(biāo)準(zhǔn)化精度、減少巴式殺菌機(jī)結(jié)垢、并保護(hù)均質(zhì)機(jī)頭，客戶可按照實(shí)際情況確定取舍；）從鮮奶擠出至預(yù)殺菌工段，冷藏時(shí)間最好控制在小時(shí)以內(nèi)。. 預(yù)處理此工段分為兩部分，即產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化與巴式殺菌。. 預(yù)處理工藝流程圖（見圖四）. 工藝說明與質(zhì)量控制）客戶按照終產(chǎn)品脂肪含量要求自行選擇標(biāo)準(zhǔn)化參數(shù)或確定取舍；）均質(zhì)有利于保證產(chǎn)品的均一性、提高產(chǎn)品風(fēng)味； ）巴氏殺菌殺死牛奶中的致病毒及大部分微生物營養(yǎng)體，保證生產(chǎn)周轉(zhuǎn)正常。應(yīng)嚴(yán)格控制巴氏殺菌的溫度、時(shí)間，并完善生產(chǎn)記錄；3.3超高溫滅菌及無菌灌裝工段 3.3.1超高溫滅菌工藝流程圖(圖五)3.3.2工藝說明與質(zhì)量控制1)嚴(yán)格控制超高溫工段滅菌溫度與時(shí)間，并完善生產(chǎn)記錄，以便于質(zhì)量追蹤；及時(shí)檢查冷熱水溫度、蒸汽溫度與壓力、以及保溫段的壓力差與溫度差。對(duì)設(shè)備上的溫度探頭、壓力表等，做好周期檢定及更換工作；2)無菌灌裝應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序、按要求定期做好設(shè)備的維護(hù)與保養(yǎng)，尤其注意各種用于自動(dòng)化控制的溫度探頭、流量計(jì)、及壓力表的周期檢定與及時(shí)更換；此外，還要注意以下方面的控制；（a）包材滅菌，雙氧水濃度范圍控制范圍為3235。（b)無菌環(huán)境的獲得和維持，檢查無菌空氣溫度及管加熱器溫度。（c)及時(shí)進(jìn)行包裝完整性檢驗(yàn)。操作人員定時(shí)(如每15分鐘)從灌裝線上連續(xù)抽取兩包進(jìn)行完整性檢驗(yàn)；3)CIP過程控制，主要檢驗(yàn)清洗液濃度、溫度，時(shí)間以及清洗時(shí)的流量(保證流速大于等于1.5m/s)；（a)完善現(xiàn)場清洗記錄，每班滴定檢驗(yàn)清洗液(酸、堿)濃度并做好記錄；及時(shí)做好洗滌劑的補(bǔ)充、更換；（b）一般情況下，當(dāng)溫度差(殺菌溫度與熱水溫度)大于911時(shí)，對(duì)滅菌機(jī)進(jìn)行一次CIP，當(dāng)原奶質(zhì)量較差時(shí)，有必要每生產(chǎn)45小時(shí)進(jìn)行一次CIP；4)保持無菌輸送管段各接口的密閉性，管路中無清洗死角，嚴(yán)格執(zhí)行無菌段的日常清洗與維護(hù)程序。無菌罐的設(shè)置需特別謹(jǐn)慎，客戶按照生產(chǎn)實(shí)際需要及自身技術(shù)程度確定安裝與否。4、無菌枕生產(chǎn)的衛(wèi)生規(guī)范4.1工廠基本衛(wèi)生要求：為提高產(chǎn)品質(zhì)量水平，推薦工廠逐步施行優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)規(guī)范。在工廠投入商業(yè)生產(chǎn)之前，滿足以下基本要求：1）生產(chǎn)車間設(shè)定唯一的員工出入口；2）車間入口前設(shè)定員工進(jìn)出車間更衣室；3）車間入口處安裝防蠅簾、滅蠅燈及防鼠設(shè)施；4）完善洗手消毒設(shè)施，如洗手池、消毒池等；5）制度工廠個(gè)人衛(wèi)生制度、衛(wèi)生操作規(guī)范程序（包括洗手、更衣程序等），并張貼公布在生產(chǎn)現(xiàn)場，保證使所有的相關(guān)人員獲得充分的培訓(xùn)；6）工廠內(nèi)各車間實(shí)施排布應(yīng)考慮合理的物料流向及人員流向，保證灌裝間衛(wèi)生等級(jí)最高，避免交叉污染。4.2 灌裝間衛(wèi)生要求：1)空氣經(jīng)過過濾并保持正壓24mmH2O；2)空氣流速為0.20.3m/s，并保證空氣交換頻率為1015次/小時(shí)；3)加強(qiáng)溫濕度控制，溫度1530，濕度3070；4)每10m2安裝一支紫外燈(規(guī)律15KW、波長20003000埃、安裝高度1.82.0m),并定期熏蒸，保持灌裝環(huán)境的衛(wèi)生與整潔?！翱諝饨德洹痹囼?yàn)30cfu/平皿(檢驗(yàn)方法見5.2.6節(jié)空氣降落試驗(yàn))。5質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序5.1實(shí)驗(yàn)室儀器與設(shè)施基本配置1)各種規(guī)格的燒杯、錐形瓶、試管、移液管、吸管、容量瓶、量筒等化學(xué)試驗(yàn)玻璃器皿；9厘米標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片等微生物用玻璃器皿；酸、堿滴定管。2)121濕熱滅菌用手提式高壓滅菌釜；160干熱滅菌用電熱干燥箱。3)水平式無菌操作臺(tái)；生物顯微鏡（帶“100倍”油鏡）；平板計(jì)數(shù)器。4)電熱恒溫培養(yǎng)箱（室溫60可調(diào)節(jié))，最好為隔水式；溫度最低可達(dá)到0的、配有制冷功能的多功能培養(yǎng)箱（有條件時(shí)配備）。5)電熱恒溫培水?。ㄊ覝?00可調(diào)節(jié))；可調(diào)溫電爐、或電磁爐、微波爐；雙門電冰箱。6)藥物架盤天平；分析天平；稱量皿；干燥器。7)康氏振蕩器；磁力攪拌器；離心機(jī)。8)PH計(jì)（精確到0.01)；糖度計(jì)；比重計(jì)；乳稠計(jì)；乳脂計(jì)。9)紅外水分測定計(jì)；馬福爐；坩鍋。5.2質(zhì)量控制檢驗(yàn)方法5.2.1菌落總數(shù)的測定檢驗(yàn)?zāi)康暮头秶簩?duì)無菌操作條件下獲得的樣品原液配置的樣品稀釋液進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)的測定。操作程序：一 對(duì)樣品進(jìn)行編號(hào)，并記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。 原液選取103至105三個(gè)稀釋度的樣品稀釋液；常規(guī)產(chǎn)品檢驗(yàn)選取原樣；問題產(chǎn)品檢驗(yàn)選取102至104三個(gè)稀釋度的樣品稀釋液。二、培養(yǎng)基的準(zhǔn)備1檢查預(yù)先經(jīng)過滅菌處理的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是否處于正常、可用狀態(tài)。2、將滅菌培養(yǎng)基用微波爐加熱2分鐘，或經(jīng)沸水浴中融化后，用4045水浴保溫待用。三接種培養(yǎng)1在無菌操作條件下，在一個(gè)滅菌平皿內(nèi)傾入15ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并暴露至接種過程結(jié)束，標(biāo)記后以作為環(huán)境對(duì)照樣品。2按樣品編號(hào)在滅菌平皿底部作相應(yīng)的標(biāo)記，并記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。3在無菌操作條件下，用1ml的滅菌吸管移取1ml選定的樣品稀釋液或樣品原樣至滅菌平皿內(nèi)。4同上對(duì)同一樣品重復(fù)操作。即每個(gè)選定的樣品稀釋度做兩個(gè)平皿。5按以上步驟，以1ml無菌生理鹽水作為空白操作對(duì)照。6在無菌操作條件下，將約15ml的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入樣品平皿中，將平皿置于操作臺(tái)面上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使樣品和培養(yǎng)基混合均勻。7待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，即保持有標(biāo)記和培養(yǎng)基的一面向上。8將所有平皿(包括空白和環(huán)境對(duì)照)置于301的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，保溫培養(yǎng)482小時(shí)。9在“微生物檢驗(yàn)操作表”中記錄保溫時(shí)間。四、菌落計(jì)數(shù)1選擇菌落數(shù)在30至300之間的平皿為標(biāo)準(zhǔn)，在菌落計(jì)數(shù)上計(jì)數(shù)每個(gè)平皿上的菌落總數(shù)，記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。2檢驗(yàn)結(jié)果平行樣品菌落數(shù)之和/2#稀釋倍數(shù)。記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。計(jì)數(shù)結(jié)果在100以內(nèi)，按實(shí)際計(jì)數(shù)報(bào)告；100以上，按兩位有效數(shù)字報(bào)告。5.2.2芽孢總數(shù)測定檢驗(yàn)?zāi)康牡暮头秶簩?duì)無菌操作條件下獲得的樣品原液配制的樣品稀釋液進(jìn)行芽孢總數(shù)的測定。操作程序：一樣品準(zhǔn)備1在無菌操作條件下,將10ml室溫狀態(tài)下的待檢樣品加入一個(gè)滅菌試管中，蓋好棉塞。2在同直徑的試管中加入10 ml同樣室溫狀態(tài)下的水，并插入溫度計(jì)。3將兩支試管同時(shí)放入80水浴中保溫，當(dāng)水中的溫度計(jì)達(dá)到80時(shí)開始計(jì)時(shí)。4計(jì)時(shí)達(dá)10分鐘后，迅速將樣品管取出，置于410的冷水中迅速降溫至室溫。5按無菌操作條件對(duì)降溫后的樣品進(jìn)行稀釋，編號(hào)后記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。6原材選取10-2和10-4三個(gè)稀釋度的樣品稀釋液；7中間產(chǎn)品檢驗(yàn)取10-2和10-3兩個(gè)稀釋度的樣品稀釋液。8問題產(chǎn)品檢驗(yàn)選取10-1和10-2兩個(gè)稀釋度的樣品稀釋液。二培養(yǎng)基準(zhǔn)備1檢查預(yù)先經(jīng)過滅菌處理的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是否處于正常、可用狀態(tài)。2將滅菌培養(yǎng)基用微波爐加熱2分鐘，或經(jīng)沸水融化后，用4045水浴保溫待用。三接種培養(yǎng)1在無菌操作條件下，在一個(gè)滅菌平皿內(nèi)傾入15ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并暴露至接種過程結(jié)束，標(biāo)記后以作為環(huán)境對(duì)照樣品。2按樣品編號(hào)在滅菌平皿底部作相應(yīng)的標(biāo)記，并記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。3在無菌操作條件下，用1ml的滅菌吸管移取1ml選定的樣品稀釋液或樣品原樣至滅菌平皿內(nèi)。4同上對(duì)同一樣品重復(fù)操作。即每個(gè)選定的樣品稀釋度做兩個(gè)平皿。5按以上步驟，以1ml無菌生理鹽水作為空白操作對(duì)照。6在無菌操作條件下，將約15ml的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入樣品平皿中，將平皿置于操作臺(tái)面上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使樣品和培養(yǎng)基混合均勻。7待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，即保持有標(biāo)記和培養(yǎng)基的一面向上。8將所有平皿(包括空白和環(huán)境對(duì)照)置于301的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，保溫培養(yǎng)72小時(shí)。9在“微生物檢驗(yàn)操作表”中記錄保溫時(shí)間。四菌落計(jì)數(shù)1選擇菌落數(shù)在30至300之間的平皿為標(biāo)準(zhǔn)，在菌落計(jì)數(shù)上計(jì)數(shù)每個(gè)平皿上的菌落數(shù)，記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。2檢驗(yàn)結(jié)果=平行樣品菌落數(shù)之和/2*稀釋倍數(shù)。記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。3計(jì)數(shù)結(jié)果在100以內(nèi)，按實(shí)際計(jì)數(shù)報(bào)告；100以上的，按兩位有效數(shù)字報(bào)告。5.2.3耐熱芽孢總數(shù)測定檢驗(yàn)?zāi)康牡暮头秶簩?duì)無菌操作條件下獲得的樣品原液配制的樣品稀釋液進(jìn)行耐熱芽孢總數(shù)的測定。操作程序：一樣品準(zhǔn)備1在無菌操作條件下,將10ml室溫狀態(tài)下的待檢樣品加入一個(gè)滅菌試管中，蓋好棉塞。2在同直徑的試管中加入10水ml同樣室溫狀態(tài)下的水，并插入溫度計(jì)。3將兩支試管同時(shí)放入80水浴中保溫，當(dāng)水中的溫度計(jì)達(dá)到100時(shí)開始計(jì)時(shí)。4計(jì)時(shí)達(dá)10分鐘后，迅速將樣品管取出，置于410的冷水中迅速降溫至室溫。5按無菌操作條件對(duì)降溫后的樣品進(jìn)行稀釋，編號(hào)后記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。6原材選取10-1和10-3三個(gè)稀釋度的樣品稀釋液；7中間產(chǎn)品檢驗(yàn)取10-1和10-2兩個(gè)稀釋度的樣品稀釋液。8問題產(chǎn)品檢驗(yàn)選取原樣和10-1兩個(gè)稀釋度的樣品稀釋液。二培養(yǎng)基準(zhǔn)備1檢查預(yù)先經(jīng)過滅菌處理的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是否處于正常、可用狀態(tài)。2將滅菌培養(yǎng)基用微波爐加熱2分鐘，或經(jīng)沸水融化后，用4045水浴保溫待用。三接種培養(yǎng)1在無菌操作條件下，在一個(gè)滅菌平皿內(nèi)傾入15ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并暴露至接種過程結(jié)束，標(biāo)記后以作為環(huán)境對(duì)照樣品。2按樣品編號(hào)在滅菌平皿底部作相應(yīng)的標(biāo)記，并記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。3在無菌操作條件下，用1ml的滅菌吸管移取1ml選定的樣品稀釋液或樣品原樣至滅菌平皿內(nèi)。4同上對(duì)同一樣品重復(fù)操作。即每個(gè)選定的樣品稀釋度做兩個(gè)平皿。5按以上步驟，以1ml無菌生理鹽水作為空白操作對(duì)照。6在無菌操作條件下，將約15ml的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入樣品平皿中，將平皿置于操作臺(tái)面上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使樣品和培養(yǎng)基混合均勻。7待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，即保持有標(biāo)記和培養(yǎng)基的一面向上。8將所有平皿(包括空白和環(huán)境對(duì)照)置于301的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，保溫培養(yǎng)72小時(shí)。9在“微生物檢驗(yàn)操作表”中記錄保溫時(shí)間。四菌落計(jì)數(shù)1選擇菌落數(shù)在30至300之間的平皿為標(biāo)準(zhǔn)，在菌落計(jì)數(shù)上計(jì)數(shù)每個(gè)平皿上的菌落數(shù)，記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。2檢驗(yàn)結(jié)果=平行樣品菌落數(shù)之和/2*稀釋倍數(shù)。記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。3計(jì)數(shù)結(jié)果在100以內(nèi)，按實(shí)際計(jì)數(shù)報(bào)告；100以上的，按兩位有效數(shù)字報(bào)告。5.2.4 表面微生物指標(biāo)測定檢驗(yàn)?zāi)康牡暮头秶簩?duì)生產(chǎn)設(shè)備、容器、包裝材料、操作人員的雙手等需保持潔凈的表面進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)的檢測。操作程序：一取樣1在無菌操作條件下，將滅菌的棉簽用滅菌的生理鹽水濕潤即可。2用已濕潤的棉簽在滅菌100cm2的規(guī)板內(nèi)涂抹待檢表面。3涂抹后迅速用滅菌剪刀，在無菌操作條件下剪下涂抹端，置于10ml滅菌生理鹽水管內(nèi)，蓋好試管蓋。二培養(yǎng)基準(zhǔn)備1檢查預(yù)先經(jīng)過滅菌處理的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是否處于正常、可用狀態(tài)。2將滅菌培養(yǎng)基用微波爐加熱2分鐘，或經(jīng)沸水浴中融化后，用4045水浴保溫待用。三接種培養(yǎng)1將浸有涂抹端的滅菌生理鹽水管在康氏振蕩器上充分振蕩。 2在無菌操作條件下，在一個(gè)滅菌平皿內(nèi)傾入15ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并暴露至接種過程結(jié)束，標(biāo)記后以作為環(huán)境對(duì)照樣品。3按樣品編號(hào)在滅菌平皿底部作相應(yīng)標(biāo)記，并記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。4在無菌操作條件下，用1ml的滅菌吸管移取1ml振蕩后的稀釋液至滅菌平皿內(nèi)。5同上對(duì)同一樣品重復(fù)操作。即每個(gè)選定的樣品稀釋度做兩個(gè)平皿。6按以上步驟，以1ml無菌生理鹽水作為空白操作對(duì)照。7在無菌操作條件下，將約15ml的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入樣品平皿中，將平皿置于操作臺(tái)面上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使樣品和培養(yǎng)基混合均勻。8待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，即保持有標(biāo)記和培養(yǎng)基的一面向上。9將所有平皿(包括空白和環(huán)境對(duì)照)置于301的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，保溫培養(yǎng)482小時(shí)。10在“微生物檢驗(yàn)操作表”中記錄保溫時(shí)間。四菌落計(jì)數(shù)1選擇菌落數(shù)在30至300之間的平皿為標(biāo)準(zhǔn)，在菌落計(jì)數(shù)上計(jì)數(shù)每個(gè)平皿上的菌落數(shù)，記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。2檢驗(yàn)結(jié)果（cfu/cm2）=平行樣品菌落數(shù)之和/2。記錄在“微生物檢驗(yàn)操作表”中。3計(jì)數(shù)結(jié)果在100以內(nèi)，按實(shí)際計(jì)數(shù)報(bào)告；100以上的，按兩位有效數(shù)字報(bào)告。5.2.5 原奶酒精試驗(yàn)檢驗(yàn)?zāi)康牡暮头秶捍_定原料奶是否可以通過75%