卵巢癌的單藥及聯(lián)合用藥體外藥物敏感性試驗(yàn).doc

卵巢癌的單藥及聯(lián)合用藥體外藥物敏感性試驗(yàn)癌癥 1999年第6期第19卷 短篇報(bào)道作者：梁永鉅，馮公侃，潘啟超，劉富元單位：中山醫(yī)科大學(xué)腫瘤防治中心腫瘤研究所(廣州，510060)關(guān)鍵詞：卵巢腫瘤；藥物篩選試驗(yàn)；抗腫瘤；藥物療法；聯(lián)合中圖分類號(hào)：R73.53文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：D 文章編號(hào)：1000467X(1999)06074202本文采用組織塊培養(yǎng)?MTT終點(diǎn)染色計(jì)算機(jī)圖像分析法1檢查了卵巢癌對(duì)多種單藥及聯(lián)合用藥的體外敏感性，為臨床選擇聯(lián)合用藥方案提供參考依據(jù)。1材料和方法在24孔板每培養(yǎng)孔中放置高0.5cm不銹鋼網(wǎng)支架，支架上放置1.1cm1.1cm濾紙，每孔加培養(yǎng)液1ml，液面剛至濾紙。腫瘤標(biāo)本切成直徑0.5mm1mm組織塊放置于濾紙上，每孔46塊，培養(yǎng)1天后，測(cè)定每孔瘤塊面積(area，A)，加藥物培養(yǎng)4天后，加MTT再培養(yǎng)6小時(shí)，測(cè)定瘤塊被甲瓚藍(lán)染的面積(blue area,BA)，按下式計(jì)算經(jīng)藥物作用后的細(xì)胞生存指數(shù)(survivalindex,SI)。所試驗(yàn)的藥物濃度為臨床用藥達(dá)到的血漿峰濃度的5倍2，即卡鉑(carboplatin,CBDCA或P)為50g/ml、平陽(yáng)霉素(bleomycin A5，Bleo)為15g/ml、表阿霉素(Epirubicin,EADM)11.5g/ml、長(zhǎng)春新堿(Vincristine,VCR)1.85g/ml。聯(lián)合用藥方案有VCRBleoCBDCA(VBP)及VCREADMCBDCA(VEP)，每種藥物濃度與單藥試驗(yàn)時(shí)相同。為判斷各藥作用是拮抗、相加還是協(xié)同，以作用最強(qiáng)的單藥的SI(SIDmax)作為亞相加作用的臨界值，以3個(gè)單藥的SI的乘積(即SIprod=A藥的SIB藥的SIC藥的SI)作為協(xié)同作用的期望值，聯(lián)合用藥的SI(SIcomb)大于SIDmax為拮抗，小于SIDmax而大于SIprod為亞相加，等于或小于SIprod為協(xié)同3。采用符號(hào)秩和檢驗(yàn)(signed ranktest)對(duì)55例標(biāo)本的SIcomb與SIDmax、SIcomb與SIprod的差別作顯著性檢驗(yàn)。2結(jié)果55例標(biāo)本對(duì)各單藥及聯(lián)合用藥的敏感性均有較大差異，見(jiàn)表1。表155例卵巢癌標(biāo)本對(duì)各種單藥及聯(lián)合用藥的SI中位數(shù)及不同敏感程度的例數(shù)藥物SI中位數(shù)()敏感例數(shù)輕度敏感例數(shù)不敏感例數(shù)SI 033%SI 34%66%SI 67%100%VCR911648Bleo7931636CBDCA60112222EADM41202015VEP3029188VBP1936118注：對(duì)各藥及聯(lián)合用藥的不同敏感程度例數(shù)作2檢驗(yàn)，VEP與VCR及CBDCA比較有顯著性差異(均P0.001)，與EADM比較無(wú)顯著差異(P=0.143)。VBP與VCR、Bleo及CBDCA比較均有顯著性差異(均P0.001)。對(duì)于聯(lián)合用藥，VEP的SIcomb中位數(shù)為30，小于SIDmax中位數(shù)(37)，但無(wú)顯著差別(P0.200)，表明VEP亞相加作用不顯著，大于SIprod中位數(shù)(20)，差別顯著(P0.005)，表明VEP無(wú)協(xié)同作用；VBP的SIcomb中位數(shù)為19，小于SIDmax中位數(shù)(51)及SIprod中位數(shù)(27)，且差別分別為非常顯著(P0.001)及顯著(P0.050)，表明VBP有顯著協(xié)同作用，見(jiàn)圖12。圖1VEP聯(lián)合用藥SIcomb與SIDmax及SIprod的關(guān)系經(jīng)符號(hào)秩和檢驗(yàn)SIcomb與SIDmax無(wú)顯著差別(P0.200),SIcomb與SIprod有非常顯著差別(P0.005)。圖2VBP聯(lián)合用藥SIcomb與SIDmax及SIprod的關(guān)系經(jīng)符號(hào)秩和檢驗(yàn)SIcomb與SIDmax有非常顯著差別(P0.001)，SIcomb與SIprod有顯著差別(P0.050)3討論為提高卵巢癌化療的療效，人們嘗試采用各種體外藥物敏感性試驗(yàn)預(yù)測(cè)病人對(duì)不同藥物的敏感性。但以往的方法需將新鮮的腫瘤織組經(jīng)酶消化或機(jī)械分散成單細(xì)胞后培養(yǎng)，細(xì)胞難培養(yǎng)成活，可評(píng)價(jià)率低，一般為40704。本法采用組織塊培養(yǎng)，保持實(shí)體瘤的組織結(jié)構(gòu)，有利細(xì)胞存活，可評(píng)價(jià)率90以上。NguyenHN等在子宮癌細(xì)胞體外藥物敏感性試驗(yàn)中觀察到聯(lián)合用藥CAP(環(huán)磷酰胺阿霉素順鉑)、CAF(環(huán)磷酰胺阿霉素氟脲嘧啶)與單藥阿霉素?zé)o顯著差別5。本文結(jié)果亦顯示VEP亞相加和協(xié)同作用不明顯，且與單藥EADM無(wú)顯著性差異，臨床上常將VCR、EADM及CBDCA聯(lián)合用藥，合理與否值得進(jìn)一步探討。在卵巢癌臨床治療觀察到VBP與VEP療效相似，與實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。由于EADM心臟毒性突出，VEP方案應(yīng)用受限制，而且VBP方案中3個(gè)藥物合用有協(xié)同，故可能是卵巢癌較好的化療方案。參考文獻(xiàn)1梁永鉅，潘啟超，麥偉源，等.鼻咽癌體外藥物敏感性試驗(yàn)的初步研究J.癌癥，1996，15(3)：216218.2Scheithauer W，Clark GM,Salmon SE, et al.Model for estimation of clinically achievable plasma concentrations for investigational anticancer drugs in manJ. Cancer Treat Rep,1986,70(12)：13791382.3Valeriote F,Lin Hs.Synergistic inte-raction of anticancer agents：a cellular perspectiveJ.Cancer Chemother Rep,1975,59：895900.4Sevin BU,Perras JP,Averette HE,et al.Chemoseneitivity testing in ovarian cancer J.Cancer,1993,71(suppl 4)：16131620.5Nguyen HN,Sevin BU, Averette HE,et al.Comparative evaluti