白細胞計數(shù)sop文件.doc

1 檢驗?zāi)康? 1.1 參考值： 4.0-10.0X109/L1.2 臨床意義：1.2.1 生理變化：因年齡，日夜變化，運動，疼痛與情緒作用，妊娠分娩等因素有所變化。1.2.2 病理變化：1.2.2.1 增高：大部分化膿細菌所引起的炎癥、尿毒癥、嚴重?zé)齻?、傳染性單核細胞增多、傳染性淋巴細胞增多，急性出血、組織損傷、大手術(shù)、白血病等。1.2.2.2 減低：病毒感染、傷寒、副傷寒、黑熱病、瘧疾、再障、極度嚴重感染，防射線，腫瘤化療后，非白血性白血病等。2 檢驗程序的原理：2.1 XE-2100采用一束半導(dǎo)體激光照射標(biāo)本，并依據(jù)每個細胞產(chǎn)生的三種信號來相互區(qū)分，即前向散射光，側(cè)向射散光和側(cè)向光和側(cè)向熒光。前向散射光反映細胞體積，側(cè)向散射光反映細胞內(nèi)涵物，如核和顆粒，側(cè)向熒光反映細胞脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。2.2 DIFF通道：表面活性劑可完全溶解紅細胞和血小板，部分溶解白細胞。第2種試劑使核酸染上顏色。XE-2100的DIFF通道可將白細胞分成4類。在STROMATOLYSER-4DL試劑中的表面活性劑可溶解或破壞紅細胞和血小板，并在白細胞膜上打出小孔。在STROMATOLYSER-4DL試劑中的聚次甲基染料可進入破損白細胞，與核酸和細胞器結(jié)合，經(jīng)波長633nm的激光照射，所產(chǎn)生熒光強度與細胞核酸含量成一定比例。在在STROMATOLYSER-4DL試劑中的有機酸能與嗜酸性顆粒特異結(jié)合，根據(jù)側(cè)向散射光信號強度，能提高嗜酸性粒細胞從中性粒細胞區(qū)分出來能力。2.3 WBC/BASO通道：在XE-2100中，此通道運用前向和側(cè)向散射光信號。酸性試劑可引起除嗜堿性粒細胞外的紅細胞(影紅細胞)、血小板(影血小板)和白細胞(裸核)溶解和皺縮。因而此通道可檢測白細胞數(shù)和嗜堿性粒細胞數(shù)。在STROMATOLYSER-FB試劑中的表面活性劑作用細胞可形成影紅細胞，影血小板和除嗜堿性粒細胞外的裸核白細胞。根據(jù)前向散射光信號，使嗜堿性粒細胞和其他細胞容積差異而區(qū)分。前向散射光強度代表細胞體積，側(cè)向散射光代表細胞殘余物復(fù)雜性。嗜堿性粒細胞形成獨立群體。核殘余物也可從影細胞中區(qū)分出來。嗜堿性粒細胞和裸核數(shù)之和代表白細胞總數(shù)。有核紅細胞也包括在內(nèi)。2.4 NRBC通道：在NRBC通道中，表面活性劑可使紅細胞和血小板皺縮，使白細胞和有核紅細胞核酸染色。XE-2100應(yīng)用半導(dǎo)體激光束照射標(biāo)本，根據(jù)側(cè)向熒光和側(cè)向散射光信號來計數(shù)有核紅細胞。在在STROMATOLYSER-NR試劑中表面活性劑可溶解紅細胞膜，僅留下有核紅細胞核，白細胞膜不被溶解，胞質(zhì)完整。在STROMATOLYSER-4DL試劑中的聚次甲基熒光染料，可滲入白細胞胞膜，使細胞器染上顏色。根據(jù)熒光強度的差異可將細胞分成2組，根據(jù)前向散射光信號、容積差異可將有核紅細胞和影細胞區(qū)分出來。3 性能參數(shù)：3.1精密度（重現(xiàn)性）全血模式：3.0%或更低(4.0 103 / 微升或更高)末梢血模式：5.0%或更低(4.0 103 / 微升或更高)3.2準(zhǔn)確度：在3%范圍內(nèi)，或在0.20 103 / 微升范圍內(nèi)（在10%之內(nèi)）3.3線性全血模式：在3.0%或0.3 103 / 微升范圍內(nèi)（0 100.0 103 / 微升）末梢血模式：在5.0%或0.5 103 / 微升范圍內(nèi)（0 100.0 103 / 微升）4 原始樣品系統(tǒng)4.1受檢者的準(zhǔn)備：病人避免采血前劇烈活動。4.2用含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管，肘靜脈采血1ml，輕輕混勻，室溫4小時內(nèi)完成檢測，不能在4小時內(nèi)檢測的標(biāo)本，放置于冷藏冰箱（28）中保存，8小時內(nèi)有效，使用前從冰箱中取出回復(fù)室溫后檢測。4.3注意事項：4.3.1防止溶血：混勻時不可用力震蕩，避免產(chǎn)生大量氣泡。4.3.2避免淤血：止血帶壓迫時間不宜過長，最好不超過半分鐘。4.3.3標(biāo)本不能從輸液管中或輸液手的同側(cè)靜脈采集。4.3.4穿刺時須防止穿刺針刺扎采血員，以避免血液中傳染性病原如肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血員。4.3.5抗凝管應(yīng)貼有標(biāo)簽，并清楚注明病人姓名。5 容器和添加物類型：含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管,有條形碼的貼上條形碼。乳膠手套、試管架6 要求的設(shè)備和試劑6.1設(shè)備：Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀6.2 試劑廠商：Sysmex公司 6.2.1試劑及包裝：配套試劑包 CELLCLEAN 清潔液 (CL-50)試劑名稱簡寫樣品數(shù)每盒容量CELLPACKEPK50020LSTROMATOLYSER-4DLFFD10002LSTORMATOLYSER FBFBA1000SULFOLYSERSLS1000500mlSTROMATOLYSER-4DSFFS105042mlCELLSEATHSE6.3試劑穩(wěn)定性：6.3.1原包裝試劑儲存在15-30，至標(biāo)簽所示失效日期。6.3.2試劑如出現(xiàn)混濁或絮狀物則失效。7 校準(zhǔn)程序（計量學(xué)溯源性）7.1校準(zhǔn)品商品名稱：SCS-10007.2校準(zhǔn)前檢查：7.2.1確認校準(zhǔn)品瓶上批號和有效期于靶值表一致，沒有過期。7.2.2確認是否按廠家建議進行儀器保養(yǎng)。盡可能不要再進行保養(yǎng)或試劑更換的當(dāng)天進行校準(zhǔn)或校準(zhǔn)校驗。7.2.3瀏覽最近的質(zhì)控數(shù)據(jù)，確保分析儀性能穩(wěn)定。7.2.4在儀器上登記試劑的批號和有效期。7.2.5進行自動清洗，確認空白表示沒有超出規(guī)定范圍。7.3校準(zhǔn)準(zhǔn)備：請嚴格遵守以下步驟，這對于保證SCS-1000校準(zhǔn)品的性能正確非常重要。從冰箱或包裝取出1瓶SCS-1000，放置30分鐘使其溫度升至室溫（18-25）。保持瓶子直立的狀態(tài)將其放在雙手掌中輕輕滾動20秒，然后將其顛倒后再滾動20秒以上。輕輕來回倒轉(zhuǎn)12次使其混合均勻，確保所有細胞都已經(jīng)懸浮起來。進行分析前在平面上靜置瓶子15秒，使泡沫散去。7.4校準(zhǔn)步驟：注意：SCS-1000的分析必須在開放模式進行，此時儀器設(shè)定為維修程序-“特殊模式”-菜單的“質(zhì)控血模式”。使用質(zhì)控血模式可防止出現(xiàn)WBC通道錯誤。關(guān)于進入維修程序的方法，請咨詢技術(shù)服務(wù)代表。7.4.1在開放模式下連續(xù)進行6次分析。在分析當(dāng)中不要混勻校準(zhǔn)品。7.4.2每次分析結(jié)束后，使用潔凈無屑的紙巾或紗布拭凈瓶子及瓶蓋螺紋，之后蓋上瓶蓋。7.5平均值的計算及校核數(shù)據(jù)7.5.1排除第1次分析結(jié)果。7.5.2計算其余5次分析結(jié)果的平均值，確認各參數(shù)的平均值都在可接受極限范圍內(nèi)。7.5.3如果某個參數(shù)的平均值超出了可接受極限范圍，并內(nèi)部質(zhì)控和/或室間質(zhì)控的結(jié)果也顯示出類似偏差，表示需要重新校準(zhǔn)分析儀。7.5.4計算新的校準(zhǔn)設(shè)定系數(shù)。7.6校準(zhǔn)的頻率：7.7.1一般情況：每年校準(zhǔn)2次上半年一次下半年一次。7.72其他情況：試劑商更改，排除各種原因后的質(zhì)控未能通過，主要部件更換后，儀器遠距離搬動，或嚴重故障須重新校準(zhǔn)。儀器進行維修和保養(yǎng)校準(zhǔn)后需做質(zhì)控，校準(zhǔn)后比對失敗，工程師應(yīng)驗證質(zhì)控品是否變質(zhì)，在市內(nèi)質(zhì)控歷史數(shù)據(jù)和室間質(zhì)控數(shù)據(jù)表示良好時校準(zhǔn)品可能變質(zhì)，需更換重新校準(zhǔn)，直至通過校準(zhǔn)。7.8校準(zhǔn)驗證：校準(zhǔn)后及時進行驗證，內(nèi)容包括：精密度、線性、校準(zhǔn)前后病人標(biāo)本結(jié)果比對、新鮮血close和open進樣模式結(jié)果比對、質(zhì)控、白細胞分類手工和儀器分類方式的比對，由實驗室操作人員完成。8 程序步驟8.1 打開電腦，單擊OK，同時按下Ctrl，Alt及Delete鍵進行登錄。8.2 在登錄框中單擊OK，出現(xiàn)XE-2100登錄信息，在用戶名一欄中鍵入“admin”，并單擊OK。8.3 檢查廢液是否已滿，并倒空。8.4 開主機電源并進行登錄。8.5 儀器進行自動沖洗及本底檢測，如本底在范圍以內(nèi)，主機屏幕上將出現(xiàn)登錄信息。如本底超出正常范圍，將出現(xiàn)錯誤提示。需要在登錄完成后，再次進行自動沖洗。8.6 按一下主機上的NUM/ALPH鍵切換為字符輸入，然后，在登錄名一欄中鍵入“ADMIN”，登錄操作菜單。8.7 每天測試質(zhì)控全血，從冰箱取出質(zhì)控全血，包括e-check兩支，臨檢中心質(zhì)控品一支，室溫放置15分鐘后檢測。選擇QC，分別選中相應(yīng)質(zhì)控全血的批號，以手工進樣方式檢測各質(zhì)控品，每次檢測結(jié)束選擇OK確認，在主機電腦上觀察質(zhì)控結(jié)果，如在靶值范圍，則可進行樣本測試； 如失控則需尋找失控原因，解決后再重做質(zhì)控，各參數(shù)完全在控方可檢測樣本。8.8 標(biāo)本檢測：選sampler鍵，以架號為1，位置號為1，起始樣本號為1，檢測方式為自動進樣，檢測參數(shù)為CBC+DIF,將樣本依次放入樣本架內(nèi)，選sampler即開始檢測。8.9 開始分析標(biāo)本。9 質(zhì)量控制程序：9.1質(zhì)控品：9.1.1質(zhì)控品品牌：Sysmex（中、低值2個水平e-CHECK）9.1.2儲存條件： 28（每日須復(fù)核一次冰箱溫度）。9.1.3使用期限： Sysmex e-CHECK質(zhì)控開瓶后14天。 9.1.4質(zhì)控品開啟后應(yīng)注明開啟日期，失效期并簽名。9.2質(zhì)控頻率：每天開機后在標(biāo)本檢測前進行一次質(zhì)控品的分析（至少做兩個水平質(zhì)控）。9.3質(zhì)控操作：從冰箱中取出e-CHECK，使用前檢查有效期及狀況（如極度溶血或失效，應(yīng)及時更換）,在室溫環(huán)境下（1830）靜置15分鐘。保持瓶子直立狀態(tài)在雙掌中輕輕滾動10次，將其顛倒再滾動10次，此過程反復(fù)8次，總共持續(xù)兩分鐘左右，再將質(zhì)控品上下顛倒10次混勻至紅細胞完全混合，在質(zhì)控分析上選擇相應(yīng)批號質(zhì)控文件，然后選擇“執(zhí)行”； 將質(zhì)控物混勻后置于手工吸樣針下方，按綠色“START”開關(guān)；分析完成后，接受數(shù)據(jù)；在IPU中單擊“質(zhì)控”，查看質(zhì)控圖。9.4質(zhì)控期望值：至少滿足2個e-CHECK在靶值極限值內(nèi)，記錄質(zhì)控結(jié)果后開始做標(biāo)本。9.5失控時應(yīng)采取的措施：質(zhì)控結(jié)果超出期望值時，需查找原因，檢查質(zhì)控品是否在有效期內(nèi)，過期或近過期需更換新的質(zhì)控品,檢查試劑情況，是否需更換。再檢查儀器的各項參數(shù)是否在控，如各項檢查操作后質(zhì)控仍失控則聯(lián)系工程師，責(zé)任人需通知組長。與此同時聯(lián)系急癥病人相關(guān)醫(yī)生，如為急診標(biāo)本及時送往門急診化驗室檢測。直至質(zhì)控通過，開始做標(biāo)本。9.6每次失控必須分析原因，記錄處理過程并簽名。失控記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存，保存期為二年。9.7更換批號后靶值設(shè)定：取開始10次QC結(jié)果，計算均值，為靶值，靶值應(yīng)落在廠商提供的范圍內(nèi)，以累計6個月CV%均值（或近兩個月CV%較大值），通過均值乘以CV%=1SD, 質(zhì)控范圍設(shè)定為2.7SD。由組長或組長指定人員負責(zé)計算。9.8定期打印質(zhì)控曲線，曲線上注明使用質(zhì)控品的批號和效期，并簽上責(zé)任人姓名。9.9所有室內(nèi)質(zhì)控打印及記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存，保存期為二年。9.10每日由操作員記錄質(zhì)控狀況與X-barm記錄于記錄本。10 干擾（如乳糜血、溶血、膽紅素血）和交叉反應(yīng)10.1嚴重的黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高。10.2紅細胞冷凝集可使紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低，白細胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法)和MCV假性增高。10.3冷凝球蛋白增高使白細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。10.4有血小板凝集者可使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。11 生物參考區(qū)間參考區(qū)間（正常人群參考范圍）是檢測正常個體得出的。每一個參數(shù)的范圍用95%可信區(qū)間計算而得。參數(shù)女性范圍(n=133)男性范圍(n=182)WBC3.98-10.044.23-9.07*女性的年齡范圍為21-41歲，平均年齡為24.5歲.12 患者檢驗結(jié)果的可報告區(qū)間WBC： 109/L13 警告/危機值13.1危機值：如遇以下危急值，應(yīng)上報臨床科室，并記錄在危急值報告記錄表(電話上報時接聽者需復(fù)述)：WBC 40.0109/L。13.2異常報警信息：WBC異常：WBC Abn ScattergramWBC散射圖異常Leukocytosis白細胞增加Neutropenia嗜中性粒細胞減少Neutrophilia嗜中性粒細胞增加Lymphopenia淋巴細胞減少Lymphocytosis淋巴細胞增加Monocytosis單核細胞增加Eosinophilia嗜酸性粒細胞增加Basophilia嗜堿性粒細胞增加Leukocytopenia白細胞減少WBC懷疑：Blasts?原始細胞Immature Gran?未成熟粒細胞Left Shift?左移Atypical Lympho?異形淋巴細胞Abn Lympho/L-Blasts?異常淋巴/原始淋巴NRBC有核紅細胞14 安全防護措施14.1使用時的特殊要求XE-2100D僅適用于人血或人工質(zhì)控血的體外分析，無其它指定用途。使用條件還包括按規(guī)定拆卸清潔和保養(yǎng)。14.2通用要求操作前先閱讀本手冊。弄清手冊和儀器上有應(yīng)注意的標(biāo)志。妥善保管手冊以備今后參考。必須按照手冊說明啟動儀器。14.2.1長發(fā)、手指和衣服必須與旋轉(zhuǎn)部件保持一定距離；如果儀器發(fā)出異味或冒煙，立即關(guān)掉總開關(guān)，拔掉電源線。14.2.2不要讓儀器中的血樣或試劑濺出，也不要讓其它東西掉入儀器。否則，會引起短路。如果發(fā)生上述情況，請立即關(guān)掉總開關(guān)，拔掉電源線，并與Sysmex代理商聯(lián)系。14.2.3請勿觸摸儀器的電路，尤其不能用濕手，否則會有觸電危險。14.2.4儀器必須連接在電壓正確的電源插座上，并注意接地。14.2.5避免損壞電源線。勿將任何設(shè)備壓在電源線上。不能拉電源線。14.2.6在連接其它設(shè)備（主計算機、打印機）之前必須將儀器電源關(guān)閉。14.3安裝14.3.1儀器必須在干燥、無灰塵的地方安裝。14.3.2防止水濺到儀器上。14.3.3勿將儀器暴露于溫差大和太陽直射的地方。14.3.4避免震蕩和振動。14.3.5安裝地點必須通風(fēng)良好。14.3.6避免在發(fā)出噪音的設(shè)備旁安裝儀器，如錄音機、離心機等。14.3.7不能在貯存化學(xué)品和產(chǎn)生氣體的地方安裝儀器。14.4防止感染14.4.1一般說來，儀器所有的部件和表面都有潛在的傳染性。14.4.2操作、保養(yǎng)、服務(wù)或修理儀器時必須穿防護衣，戴橡皮手套。工作完畢后，用消毒液洗手。14.4.4勿徒手接觸廢棄物，以及接觸過廢棄物的部件。14.4.5如果不小心接觸了有傳染性的物質(zhì)或表面，立即用水徹底清洗皮膚，然后按照實驗室消毒規(guī)程操作。14.4.6即使是質(zhì)控品，也是有傳染性的。進行質(zhì)控時，也應(yīng)穿防護衣，戴橡皮手套。14.5試劑處理14.5.1檢查試劑包裝上的標(biāo)志。14.5.2避免直接接觸試劑。試劑會刺激眼睛、皮膚和粘膜。14.5.3如果皮膚接觸了試劑，立即用大量清水沖洗。14.5.4如果眼睛接觸了試劑，立即用大量清水沖洗，并立即就醫(yī)。閱讀試劑安全使用說明書。14.5.5實驗室建立一整套急救措施是非常必要的。14.5.6避免試劑與灰塵、污物或細菌接觸。14.5.7試劑必須在有效期內(nèi)使用。14.5.8妥善處理試劑，防止產(chǎn)生氣泡。請勿搖晃！試劑運輸后不能馬上使用。14.5.9勿將試劑濺出。如果濺出，用