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文檔簡介
課題3分解纖維素的微生物的分離 三 實驗操作 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 土壤取樣 取樣環(huán)境 原因 土壤取樣 取樣環(huán)境 富含纖維素的環(huán)境中 原因 土壤取樣 取樣環(huán)境 富含纖維素的環(huán)境中 由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系 在富含纖維素的環(huán)境中 纖維素分解菌的含量相對提高 因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境 原因 土壤取樣 實例 樹林中多年落葉形成的腐殖土 多年積累的枯枝敗葉等 土壤取樣 實例 樹林中多年落葉形成的腐殖土 多年積累的枯枝敗葉等 討論 如果找不到合適的環(huán)境 可將濾紙埋在土壤中 將濾紙埋在土壤中有什么作用 你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進土壤中多深 土壤取樣 實例 樹林中多年落葉形成的腐殖土 多年積累的枯枝敗葉等 討論 如果找不到合適的環(huán)境 可將濾紙埋在土壤中 將濾紙埋在土壤中有什么作用 你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進土壤中多深 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對集中 實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境 一般應(yīng)將濾紙埋于深約10cm左右的土壤中 選擇培養(yǎng) 1 選擇培養(yǎng)的目的 1 選擇培養(yǎng)的目的 增加纖維素分解菌的濃度 以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物 選擇培養(yǎng) 2 制備選擇培養(yǎng)基 參照課本29頁旁欄中的比例配置 回答下列問題 a 旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基 為什么 b 這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用 如果具有 是如何進行選擇的 參照課本29頁旁欄中的比例配置 回答下列問題 a 旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基 為什么 b 這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用 如果具有 是如何進行選擇的 是液體培養(yǎng)基 原因是配方中無凝固劑 2 制備選擇培養(yǎng)基 參照課本29頁旁欄中的比例配置 回答下列問題 a 旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基 為什么 b 這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用 如果具有 是如何進行選擇的 是液體培養(yǎng)基 原因是配方中無凝固劑 有選擇作用 本配方中的碳源是纖維素 所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖 2 制備選擇培養(yǎng)基 c 你能否設(shè)計一個對照實驗 說明選擇培養(yǎng)基的作用 c 你能否設(shè)計一個對照實驗 說明選擇培養(yǎng)基的作用 用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對照 3 操作方法 將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中 將錐形瓶固定在搖床上 在一定溫度下振蕩培養(yǎng)1 2天 直至培養(yǎng)液變渾濁 也可重復(fù)選擇培養(yǎng) 思考 為什么選擇培養(yǎng)能夠 濃縮 所需的微生物 思考 為什么選擇培養(yǎng)能夠 濃縮 所需的微生物 在選擇培養(yǎng)的條件下 可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖 而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制 因此可以起到 濃縮 的作用 梯度稀釋 按照課題1的稀釋操作方法 將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比稀釋 稀釋最大倍數(shù)到106 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 1 制備培養(yǎng)基 參照旁欄中的比例2 涂布平板 將稀釋度為104 106的菌懸液各取0 1ml涂布在培養(yǎng)基上 30 倒置培養(yǎng) 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落 一般即為分解纖維素的菌落 接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上 在300c 370c培養(yǎng) 可獲得純培養(yǎng) 剛果紅染色法 方法一 先培養(yǎng)微生物 再加入剛果紅進行顏色反應(yīng) 方法二 在倒平板時就加入剛果紅 剛果紅染色法 方法一 先培養(yǎng)微生物 再加入剛果紅進行顏色反應(yīng) 方法二 在倒平板時就加入剛果紅 思考 這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足 方法一缺點是操作繁瑣 加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜 優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用方法二優(yōu)點是操作簡便 不存在菌落混雜問題缺點一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì) 可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng) 缺點二有些微生物具有降解色素的能力 它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅 形成明顯的透明圈 與纖維素分解菌不易區(qū)分 1 在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌 符合下列哪一生物學(xué)觀點 a 生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點b 生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點c 生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點d 生物發(fā)展進化的觀點 練一練 1 在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌 符合下列哪一生物學(xué)觀點 a 生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點b 生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點c 生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點d 生物發(fā)展進化的觀點 練一練 2 從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是 土壤取樣 梯度稀釋 選擇培養(yǎng) 菌懸液涂布平板 挑選出單個菌落a b c d 2 從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是 土壤取樣 梯度稀釋 選擇培養(yǎng) 菌懸液涂布平板 挑選出單個菌落a b c d 3 有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是 a 可以增加纖維素分解菌的濃度b 可以減少纖維素分解菌的濃度c 所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基d 所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基 3 有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是 a 可以增加纖維素分解菌的濃度b 可以減少纖維素分解菌的濃度c 所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基d 所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基 四 課題延
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