動物細胞融合和單克隆抗體.doc

選修三學(xué)案 膠州四中高二生物2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體學(xué)習(xí)目標：1.列表比較動物細胞融合與植物體細胞雜交的異同2.理解和掌握動物細胞融合的原理、過程和意義3.理解和掌握單克隆抗體制備的過程的步驟和應(yīng)用學(xué)習(xí)重難點：1.動物細胞融合的原理、過程和意義。2.單克隆抗體制備的過程的步驟和應(yīng)用知識回顧：1、植物體細胞雜交過程應(yīng)用了那些技術(shù)?2、植物與動物細胞結(jié)構(gòu)有何區(qū)別？自主學(xué)習(xí)：1動物細胞融合常用的誘導(dǎo)因素有 、 、 等。細胞融合技術(shù)的優(yōu)點是 。2制備單克隆抗體的技術(shù)流程是：用羊的紅細胞對小鼠進行注射，使小鼠產(chǎn)生 反應(yīng)。然后，把相應(yīng)的 細胞和 細胞融合，再用 進行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和 的細胞都會死亡，只有 細胞才能生長。這種雜種細胞的特點是既能 又能 。對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需進行 和抗體檢測，經(jīng)過多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。最后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠的 內(nèi)增殖，這樣，從 或 中，就可以提取大量的單克隆抗體了。3單克隆抗體最主要的優(yōu)點是 、 和 。4如果把抗癌細胞的單克隆抗體跟 、 或 相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到癌細胞所在位置，在原位殺死癌細胞。這樣既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量。探究交流知識點一.動物細胞融合【動手設(shè)計】融合過程參照P52的示意圖思考：1、動物細胞融合原理和植物體細胞雜交原理是否相同？它們的融合過程是否相同？2、動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？3、誘導(dǎo)融合的方法有哪些？為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？4、動物細胞融合的意義：打破生殖隔離，使遠緣雜交成為可能；廣泛應(yīng)用； 制備 總結(jié)：完成動物細胞融合與植物體細胞雜交的異同比較項目細胞融合的原理細胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細胞雜交用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合克服遠源雜交不親和，獲得雜種植株動物細胞融合用胰蛋白酶使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合制備單克隆抗體【例1】 如下圖所示為細胞融合技術(shù)的一些過程： （1）從A、B細胞到C細胞的過程中，必須用處理。（2）若A、B細胞為植物細胞，那么這樣的細胞已經(jīng)用酶降解脫掉了，這種酶可能是酶，由此生成的A和B細胞稱為。（3）若A細胞為骨髓瘤細胞，B細胞為B淋巴細胞，那么D細胞稱為細胞，由D細胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細胞的過程，稱為過程。這種細胞既能無限繁殖，又能產(chǎn)生。（4）若A為人細胞，B為鼠細胞，并分別用紅、綠熒光染料標記細胞膜上的蛋白質(zhì)，在C細胞階段時，細胞一半發(fā)紅色熒光，一半發(fā)綠色熒光。到D細胞階段，兩種顏色的熒光均勻分布，請解釋原因。知識點二、單克隆抗體：思考：1、體液免疫中的抗體由何種細胞產(chǎn)生？這種細胞有什么特點？一種抗原侵入機體之后，引起機體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？2如果要獲得這樣的抗體，最簡單的方法是什么？這樣做有什么缺陷？請同學(xué)們在閱讀課本P52的最后一自然段的基礎(chǔ)上，討論這幾個問題。3、癌細胞的特征有哪些?【動手設(shè)計】單克隆抗體制備流程圖思考：1、圖中的B淋巴細胞有何功能？骨髓瘤細胞有何功能？為什么選擇了這兩種細胞？ 2、怎樣才能將B細胞與骨髓瘤細胞融合？融合后可能有幾種類型的細胞？如何篩選雜交瘤細胞？4、培養(yǎng)雜交瘤細胞的方式有哪兩種？5、制備過程應(yīng)用哪些細胞工程技術(shù)手段？什么叫生物導(dǎo)彈？【例2】下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請回答下列問題（1）人的紅細胞膜表面有被稱為凝集原的特異_：從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是_。（2）圖中細胞中1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細胞后而獲得的_細胞，這種細胞具有產(chǎn)生_的特點，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細胞，這種細胞在體外培養(yǎng)時能_，但不會產(chǎn)生抗體。（3）為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點，經(jīng)特殊處理，在促細胞融合因子的作用下，使兩種細胞發(fā)生融合，形成圖中的細胞3，這種細胞稱為_。把它在乙培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細胞群，這種方法稱為_。（4）過程的主要目的_。通過過程或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量_抗體。課堂反饋1.下圖表示高等動、植物細胞融合的部分過程，請據(jù)圖回答：（1）若上圖表示植物體細胞雜交的部分過程，欲將丁細胞培育成植株，可選用 技術(shù)，這一技術(shù)的兩個關(guān)鍵步驟是 和 。（2）若上圖表示制備單克隆抗體的部分過程，甲細胞為小鼠的骨髓瘤細胞，則乙細胞為 。在分離乙細胞之前，應(yīng)對小鼠進行的處理是 。過程區(qū)別于植物細胞常用的誘導(dǎo)劑是 ，過程可利用 培養(yǎng)基進行篩選，篩選得到的丁細胞還需進行 和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。上述制備過程涉及到的生物技術(shù)有 。2禽流感疫情有逐漸蔓延的趨勢，有些國家還出現(xiàn)了人感染的病例?，F(xiàn)在，科學(xué)家們已陸續(xù)從病死的家禽和候鳥體內(nèi)分離到了H5N1亞型禽流感病毒(一種RNA病毒)。 若生產(chǎn)可以用于預(yù)防和治療禽流感的抗體，請根據(jù)下面的單克隆抗體制備過程示意圖回答有關(guān)問題：(1)若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞，則B細胞是取自 體內(nèi)的 細胞，促進d過程的常用誘導(dǎo)劑是 或 。(2)假設(shè)僅考慮某兩個細胞的融合，則可形成 種類型的C細胞，因此需用培養(yǎng)基篩選出 (填特點)的D細胞用于培養(yǎng)。D細胞的名稱是 。(3)目前注射禽流感疫苗是預(yù)防禽流感的一種措施。我們已經(jīng)知道，決定禽流感病毒在人體細胞中增殖變化的物質(zhì)是 ，而決定其抗原特異性的基因位于 。據(jù)此分析制備禽流感疫苗的主要思路： _。（2分）(4)理論上，以上措施并不能使人類徹底擺脫禽流感，試分析原因： 。3、肺癌在全國的發(fā)病率居腫瘤之首，小細胞肺癌是惡性程度最高的一種，上海肺瘤研究所細胞與分子免疫研究室在國內(nèi)率先研制出一種名叫“2F7”的靶向生物導(dǎo)彈。這種生物導(dǎo)彈是一種專門對小細胞肺癌產(chǎn)生特定靶向性的特異性單克隆抗體。注入靜脈后，會“直撲”小細胞肺癌病灶，使其攜帶的腫瘤化療藥物能“集中火力”抑制、殺滅腫瘤細胞。這預(yù)示著化療藥物有望彌補“良莠不分”、損害全身免疫力的缺陷。（1）制備單克隆抗體的原理是 。（2）制備單克隆抗體用到的動物細胞工程技術(shù)手段有 。（3）單克隆抗體是由 細胞產(chǎn)生的。（4）靜脈注入而不是口服單克隆抗體的原因是 。（5）單克隆抗體與腫瘤細胞結(jié)合并發(fā)揮作用的過程屬于 免疫的 階段。答案【例1】答案：（1）誘導(dǎo)劑（2）細胞壁纖維素原生質(zhì)體（3）雜交瘤克隆特異性抗體（4）細胞膜上的蛋白質(zhì)是可以移動的?！纠?】答案：A（1）糖蛋白 抗原（每格1分）（2）免疫B淋巴 單一的抗A抗體（或單一的特異性抗體）快速大量增殖（每格1分）（3）雜交瘤細胞 單克?。扛?分）（4）篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細胞 抗A單克隆（每格1分）課堂反饋1. （1）植物組織培養(yǎng)（1分） 脫分化（1分） 再分化（1分） （2）（相應(yīng)的）B淋巴細胞（漿細胞）（2分）將抗原注射入小鼠體內(nèi)（2分）滅活的病毒（2分）特定的選擇性（2分） 克隆化培養(yǎng)（2分）動物細胞融合技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)（2分）2(1）感染病毒的動物或人效應(yīng)B聚乙二醇（PEG） 滅活的病毒 （2）3 選擇 既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細胞 （3）病毒的RNA，病毒的衣殼上，將