動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體.doc

選修三學(xué)案 膠州四中高二生物2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.列表比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同2.理解和掌握動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、過(guò)程和意義3.理解和掌握單克隆抗體制備的過(guò)程的步驟和應(yīng)用學(xué)習(xí)重難點(diǎn)：1.動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、過(guò)程和意義。2.單克隆抗體制備的過(guò)程的步驟和應(yīng)用知識(shí)回顧：1、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程應(yīng)用了那些技術(shù)?2、植物與動(dòng)物細(xì)胞結(jié)構(gòu)有何區(qū)別？自主學(xué)習(xí)：1動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有 、 、 等。細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是 。2制備單克隆抗體的技術(shù)流程是：用羊的紅細(xì)胞對(duì)小鼠進(jìn)行注射，使小鼠產(chǎn)生 反應(yīng)。然后，把相應(yīng)的 細(xì)胞和 細(xì)胞融合，再用 進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和 的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有 細(xì)胞才能生長(zhǎng)。這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能 又能 。對(duì)上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行 和抗體檢測(cè)，經(jīng)過(guò)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后，將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠的 內(nèi)增殖，這樣，從 或 中，就可以提取大量的單克隆抗體了。3單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是 、 和 。4如果把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟 、 或 相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞。這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。探究交流知識(shí)點(diǎn)一.動(dòng)物細(xì)胞融合【動(dòng)手設(shè)計(jì)】融合過(guò)程參照P52的示意圖思考：1、動(dòng)物細(xì)胞融合原理和植物體細(xì)胞雜交原理是否相同？它們的融合過(guò)程是否相同？2、動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？3、誘導(dǎo)融合的方法有哪些？為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？4、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；廣泛應(yīng)用； 制備 總結(jié)：完成動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合克服遠(yuǎn)源雜交不親和，獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合制備單克隆抗體【例1】 如下圖所示為細(xì)胞融合技術(shù)的一些過(guò)程： （1）從A、B細(xì)胞到C細(xì)胞的過(guò)程中，必須用處理。（2）若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了，這種酶可能是酶，由此生成的A和B細(xì)胞稱(chēng)為。（3）若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞，那么D細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞，由D細(xì)胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細(xì)胞的過(guò)程，稱(chēng)為過(guò)程。這種細(xì)胞既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生。（4）若A為人細(xì)胞，B為鼠細(xì)胞，并分別用紅、綠熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，在C細(xì)胞階段時(shí)，細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光，一半發(fā)綠色熒光。到D細(xì)胞階段，兩種顏色的熒光均勻分布，請(qǐng)解釋原因。知識(shí)點(diǎn)二、單克隆抗體：思考：1、體液免疫中的抗體由何種細(xì)胞產(chǎn)生？這種細(xì)胞有什么特點(diǎn)？一種抗原侵入機(jī)體之后，引起機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？2如果要獲得這樣的抗體，最簡(jiǎn)單的方法是什么？這樣做有什么缺陷？請(qǐng)同學(xué)們?cè)陂喿x課本P52的最后一自然段的基礎(chǔ)上，討論這幾個(gè)問(wèn)題。3、癌細(xì)胞的特征有哪些?【動(dòng)手設(shè)計(jì)】單克隆抗體制備流程圖思考：1、圖中的B淋巴細(xì)胞有何功能？骨髓瘤細(xì)胞有何功能？為什么選擇了這兩種細(xì)胞？ 2、怎樣才能將B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合？融合后可能有幾種類(lèi)型的細(xì)胞？如何篩選雜交瘤細(xì)胞？4、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的方式有哪兩種？5、制備過(guò)程應(yīng)用哪些細(xì)胞工程技術(shù)手段？什么叫生物導(dǎo)彈？【例2】下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題（1）人的紅細(xì)胞膜表面有被稱(chēng)為凝集原的特異_：從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是_。（2）圖中細(xì)胞中1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細(xì)胞后而獲得的_細(xì)胞，這種細(xì)胞具有產(chǎn)生_的特點(diǎn)，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能_，但不會(huì)產(chǎn)生抗體。（3）為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)生融合，形成圖中的細(xì)胞3，這種細(xì)胞稱(chēng)為_(kāi)。把它在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這種方法稱(chēng)為_(kāi)。（4）過(guò)程的主要目的_。通過(guò)過(guò)程或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量_抗體。課堂反饋1.下圖表示高等動(dòng)、植物細(xì)胞融合的部分過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答：（1）若上圖表示植物體細(xì)胞雜交的部分過(guò)程，欲將丁細(xì)胞培育成植株，可選用 技術(shù)，這一技術(shù)的兩個(gè)關(guān)鍵步驟是 和 。（2）若上圖表示制備單克隆抗體的部分過(guò)程，甲細(xì)胞為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，則乙細(xì)胞為 。在分離乙細(xì)胞之前，應(yīng)對(duì)小鼠進(jìn)行的處理是 。過(guò)程區(qū)別于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)劑是 ，過(guò)程可利用 培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，篩選得到的丁細(xì)胞還需進(jìn)行 和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。上述制備過(guò)程涉及到的生物技術(shù)有 。2禽流感疫情有逐漸蔓延的趨勢(shì)，有些國(guó)家還出現(xiàn)了人感染的病例。現(xiàn)在，科學(xué)家們已陸續(xù)從病死的家禽和候鳥(niǎo)體內(nèi)分離到了H5N1亞型禽流感病毒(一種RNA病毒)。 若生產(chǎn)可以用于預(yù)防和治療禽流感的抗體，請(qǐng)根據(jù)下面的單克隆抗體制備過(guò)程示意圖回答有關(guān)問(wèn)題：(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自 體內(nèi)的 細(xì)胞，促進(jìn)d過(guò)程的常用誘導(dǎo)劑是 或 。(2)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成 種類(lèi)型的C細(xì)胞，因此需用培養(yǎng)基篩選出 (填特點(diǎn))的D細(xì)胞用于培養(yǎng)。D細(xì)胞的名稱(chēng)是 。(3)目前注射禽流感疫苗是預(yù)防禽流感的一種措施。我們已經(jīng)知道，決定禽流感病毒在人體細(xì)胞中增殖變化的物質(zhì)是 ，而決定其抗原特異性的基因位于 。據(jù)此分析制備禽流感疫苗的主要思路： _。（2分）(4)理論上，以上措施并不能使人類(lèi)徹底擺脫禽流感，試分析原因： 。3、肺癌在全國(guó)的發(fā)病率居腫瘤之首，小細(xì)胞肺癌是惡性程度最高的一種，上海肺瘤研究所細(xì)胞與分子免疫研究室在國(guó)內(nèi)率先研制出一種名叫“2F7”的靶向生物導(dǎo)彈。這種生物導(dǎo)彈是一種專(zhuān)門(mén)對(duì)小細(xì)胞肺癌產(chǎn)生特定靶向性的特異性單克隆抗體。注入靜脈后，會(huì)“直撲”小細(xì)胞肺癌病灶，使其攜帶的腫瘤化療藥物能“集中火力”抑制、殺滅腫瘤細(xì)胞。這預(yù)示著化療藥物有望彌補(bǔ)“良莠不分”、損害全身免疫力的缺陷。（1）制備單克隆抗體的原理是 。（2）制備單克隆抗體用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段有 。（3）單克隆抗體是由 細(xì)胞產(chǎn)生的。（4）靜脈注入而不是口服單克隆抗體的原因是 。（5）單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞結(jié)合并發(fā)揮作用的過(guò)程屬于 免疫的 階段。答案【例1】答案：（1）誘導(dǎo)劑（2）細(xì)胞壁纖維素原生質(zhì)體（3）雜交瘤克隆特異性抗體（4）細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)是可以移動(dòng)的?！纠?】答案：A（1）糖蛋白 抗原（每格1分）（2）免疫B淋巴 單一的抗A抗體（或單一的特異性抗體）快速大量增殖（每格1分）（3）雜交瘤細(xì)胞 單克?。扛?分）（4）篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞 抗A單克?。扛?分）課堂反饋1. （1）植物組織培養(yǎng)（1分） 脫分化（1分） 再分化（1分） （2）（相應(yīng)的）B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）（2分）將抗原注射入小鼠體內(nèi)（2分）滅活的病毒（2分）特定的選擇性（2分） 克隆化培養(yǎng)（2分）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（2分）2(1）感染病毒的動(dòng)物或人效應(yīng)B聚乙二醇（PEG） 滅活的病毒 （2）3 選擇 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細(xì)胞 （3）病毒的RNA，病毒的衣殼上，將