2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體.ppt

2 2動(dòng)物細(xì)胞工程 2 2 2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 去掉細(xì)胞壁 融合的原生質(zhì)體 再生出細(xì)胞壁 雜種細(xì)胞 愈傷組織 雜種植株 溫故知新 植物體細(xì)胞雜交過(guò)程 A細(xì)胞 B細(xì)胞 人工誘導(dǎo) 1 動(dòng)物細(xì)胞融合的概念 雜交細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合 也稱(chēng)細(xì)胞雜交 是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)單核細(xì)胞的過(guò)程 一 動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 滅活病毒 PEG 電激等 融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂 形成完整的雜交細(xì)胞 誘導(dǎo)的手段 融合后細(xì)胞的類(lèi)型 AB雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點(diǎn) AA AB BB 未融合A和B 含兩種生物的遺傳物質(zhì) 2 動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程 原理 2 動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程 為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑 滅活喪失感染性 保留融合活性 3 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用 4 比較動(dòng) 植物細(xì)胞雜交技術(shù) 1 能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 A 離心B 滅活的病毒C 電刺激D 振動(dòng)2 融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn) A 具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息B 能無(wú)限增殖C 可形成新個(gè)體D 培養(yǎng)過(guò)程會(huì)貼壁3 動(dòng)物細(xì)胞融合的作用中最重要的是 A 克服遠(yuǎn)源雜交不親和B 制備單克隆抗體C 培育新物種D 生產(chǎn)雜種細(xì)胞 B B A 強(qiáng)調(diào) 效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 下文將其簡(jiǎn)稱(chēng)為B淋巴細(xì)胞 抗體 能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白 能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞 即效應(yīng)B細(xì)胞 溫故知新 二 單克隆抗體 B細(xì)胞 效應(yīng)B細(xì)胞 記憶B細(xì)胞 分化 抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法 抗原 反復(fù)注射動(dòng)物 從動(dòng)物的血清中分離抗體 該法制備抗體的缺點(diǎn) 產(chǎn)量低 純度低 且抗體的特異性差 靈敏度低 如何解決這個(gè)問(wèn)題呢 單克隆抗體 讀下面一段資料 找出單克隆抗體的概念 人們發(fā)現(xiàn) 在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中 體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體 但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強(qiáng)的抗體 要想獲得大量的單一抗體 必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖 即克隆 1 單克隆抗體的概念 單克隆抗體 單個(gè)B細(xì)胞 漿細(xì)胞 克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強(qiáng)的抗體 提示1 對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎 提示2 我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的 問(wèn)題 如何大量生產(chǎn)單克隆抗體 請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案 2 單克隆抗體的制備 一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖 雜交瘤細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 設(shè)計(jì)方案 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) 單克隆抗體 既能產(chǎn)生特異性抗體 又能大量增殖的細(xì)胞 1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn) 為什么給小鼠注射特定的抗原蛋白 會(huì)有幾種融合方式 雜交瘤細(xì)胞是如何篩選出來(lái)的 有何特點(diǎn) 是否所有的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體 如何大規(guī)模進(jìn)行培養(yǎng)得到大量的單克隆抗體 BB B瘤 瘤瘤 B 瘤 一選 選擇性培養(yǎng)基 只有雜交瘤細(xì)胞才能存活 獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞 二選 選能產(chǎn)生所需專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)胞 體外培養(yǎng) 小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn) 既能產(chǎn)生特異性抗體 又能大量增殖 單抗制備過(guò)程分哪幾步 請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來(lái) 順序是 3 單克隆抗體的應(yīng)用 診斷試劑 最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確 高效 簡(jiǎn)易 快速 單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn) 特異性強(qiáng) 靈敏度高 并能大量制備 生物導(dǎo)彈 單克隆抗體 藥物單抗導(dǎo)向 藥物為彈頭 治療疾病和運(yùn)載藥物 主要用于治療癌癥治療 單克隆抗體作為載體 運(yùn)載抗癌藥物 形成 生物導(dǎo)彈 準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞 兩個(gè)過(guò)程 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程 單克隆抗體制備過(guò)程 三個(gè) 一 一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒 一個(gè)新細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 一個(gè)優(yōu)勢(shì) 單克隆抗體特異性強(qiáng) 靈敏度高的優(yōu)勢(shì) 本節(jié)小結(jié) 重點(diǎn) 1 科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合 得到雜交細(xì)胞 經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體 與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 A 經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞C 經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞B 不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D 不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞2 單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的 A B淋巴細(xì)胞B T淋巴細(xì)胞C 骨髓瘤細(xì)胞D 雜交瘤細(xì)胞 A D 3 用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體 下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是 A 將抗原注入小鼠體內(nèi) 獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B 用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C 用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑 促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D 篩選雜交細(xì)胞 并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群 培養(yǎng)后提取單克隆抗體 B 4 1 若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞 則B細(xì)胞是取自小鼠體內(nèi)的細(xì)胞 從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前 應(yīng)給小鼠注射 類(lèi)物質(zhì) 2 d過(guò)程是一個(gè) 過(guò)程 該過(guò)程的進(jìn)行常用 或 的誘導(dǎo) 3 假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合 則可形成種類(lèi)型的C細(xì)胞 因此需用 培養(yǎng)基篩選出D細(xì)胞用于培養(yǎng) D細(xì)胞的名稱(chēng)是 其特點(diǎn)是 效應(yīng)B 抗原 細(xì)胞融合 聚乙二醇 選擇性 3 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 雜交瘤細(xì)胞 滅活的病毒 4 在培養(yǎng)時(shí)通過(guò) 分裂方式大量繁殖 D細(xì)胞體外培養(yǎng)需要注意的條件是 要求答5項(xiàng) 5 單克隆抗體在疾病的診斷 治療和預(yù)防方面 與常規(guī)抗體相比 其特點(diǎn)是 特異性強(qiáng) 靈敏度高 有絲 無(wú)菌 無(wú)毒的環(huán)境 充足的營(yíng)養(yǎng) 適宜的溫度和pH 適宜的氣體環(huán)境 單抗制備過(guò)程分哪幾步 請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來(lái) 順序是 5 右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法 設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案 據(jù)圖回答 1 該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎 原因是