中圖版選修3 第1單元第2章第1節(jié) 動物細(xì)胞培養(yǎng) 教案.doc

第一節(jié)動物細(xì)胞培養(yǎng)1簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程。2描述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程。1細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件（1）無毒、無菌的環(huán)境。z（2）基本的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子：如葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、核苷酸等。（3）人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度：（36.50.5）；大多數(shù)細(xì)胞的適宜ph：7.27.4。（4）氣體環(huán)境：95%氧氣，5%二氧化碳。思考動物細(xì)胞培養(yǎng)液中為什么要加入5%二氧化碳？提示：維持培養(yǎng)液的ph。2細(xì)胞培養(yǎng)的過程（1）基本過程：健康動物的組織剪碎，用胰蛋白酶處理單個細(xì)胞（分離細(xì)胞）加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸浮液 培養(yǎng)傳代培養(yǎng) 細(xì)胞株傳代培養(yǎng)遺傳物質(zhì)改變細(xì)胞系$來&源：原代培養(yǎng)：將組織從健康動物體內(nèi)取出，用濃度與活性適中的胰蛋白酶處理成單個細(xì)胞，然后用培養(yǎng)基配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的過程。傳代培養(yǎng)：把原代培養(yǎng)的細(xì)胞定期用胰蛋白酶將它們從瓶壁上脫離下來，重新分散成細(xì)胞懸浮液，分裝到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過程。細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到1050代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。細(xì)胞系：細(xì)胞株傳至50代后有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且有癌變的特點(diǎn)，有可能在培養(yǎng)條件下無限地傳下去，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞系。（2）特點(diǎn)：貼壁生長，接觸抑制。$來&源：（3）凍存及復(fù)蘇。凍存：長期保存細(xì)胞一般采用超低溫凍存法。將細(xì)胞和保護(hù)劑放入196的液氮中進(jìn)行保存。$來&源：復(fù)蘇：將凍存的細(xì)胞放在37溫水中解凍，細(xì)胞逐漸“蘇醒”，再經(jīng)過培養(yǎng)，細(xì)胞就能繼續(xù)生長。思考動物細(xì)胞培養(yǎng)需要將組織分散成單細(xì)胞，所用的酶是什么？提示：胰蛋白酶。資*源%庫3細(xì)胞培養(yǎng)的意義資*源%庫 （1）生產(chǎn)酶、生長因子、疫苗、單克隆抗體等生物制品。（2）為皮膚大面積燒傷或燙傷病人培養(yǎng)出人工皮膚，供受傷者移植使用。（3）進(jìn)行有毒物質(zhì)和藥物的檢測。（4）在揭示細(xì)胞的全能性、細(xì)胞周期及調(diào)控，癌變機(jī)理與細(xì)胞衰老機(jī)理等基礎(chǔ)研究中發(fā)揮了重大作用。1為什么對動物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時通常要添加血清？血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種，是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，其中有些氨基酸動物細(xì)胞本身不能合成（稱為必需氨基酸），必須由培養(yǎng)液提供。血清中含有胰島素、生長激素等激素及多種生長因子（如表皮生長因子、成纖維生長因子、類胰島素生長因子等）；血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì)，能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附。因此，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，要保證細(xì)胞能夠順利生長和增殖，一般需添加10%20%的血清。2將健康動物的組織塊剪碎后用胰蛋白酶處理的目的是什么？不定期用胰蛋白酶把培養(yǎng)細(xì)胞從瓶壁上脫離的目的是什么？（1）胰蛋白酶可以分解組織細(xì)胞間質(zhì)中的膠原蛋白，從而使組織分散成單個細(xì)胞。（2）細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，隨著細(xì)胞的生長和繁殖，培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞越來越多，當(dāng)貼壁生長的細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，就會停止分裂增殖，逐漸走向衰亡，這種現(xiàn)象叫做接觸抑制。需要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，傳代培養(yǎng)。資*源%庫胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白質(zhì)外，長時間的作用也會消化細(xì)胞膜蛋白，對細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。3幼齡與老齡動物的組織細(xì)胞比較，分化程度低的與分化程度高的組織細(xì)胞比較，哪一種更易于培養(yǎng)？細(xì)胞的衰老與動物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系，細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，老齡動物則相反。所以，一般來說幼齡動物的組織細(xì)胞比老年動物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細(xì)胞的分化程度越低，則增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)。題型一 動物細(xì)胞培養(yǎng)【例1】（2010浙江高考理綜改編）下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（）a培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞b原代培養(yǎng)的細(xì)胞傳至10代左右時，極少數(shù)細(xì)胞衰老死亡c二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的d惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)解析：保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上形成單層細(xì)胞。原代培養(yǎng)的細(xì)胞傳至10代左右時，細(xì)胞的生長就會出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，極少數(shù)細(xì)胞能存活下來并繼續(xù)傳下去。二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的。惡性細(xì)胞系的細(xì)胞帶有癌變的特點(diǎn)，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳下去，所以可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。答案：d反思領(lǐng)悟：細(xì)胞株和細(xì)胞系都屬于傳代細(xì)胞。能傳至1050代的傳代細(xì)胞為細(xì)胞株；當(dāng)細(xì)胞株傳至50代以后，不能再傳代，只有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，從而可能繼續(xù)傳下去，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞系。題型二 動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件【例2】一般來說，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血清溫度與動物體溫相近需要o2，不需要co2co2能維持培養(yǎng)液的pha bc d解析：動物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求環(huán)境無菌、無毒， 培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，合成培養(yǎng)基中需加血清等天然成分，適宜溫度、ph分別為（36.50.5）、7.27.4。o2是細(xì)胞代謝所必需的，co2可維持培養(yǎng)液的ph。答案：d反思領(lǐng)悟：co2溶于水生成碳酸，解離為h和hco，從而能夠維持溶液的ph。1 為了便于將培養(yǎng)的動物組織細(xì)胞分散開來，配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，選取的動物組織應(yīng)先用下列哪種物質(zhì)處理（）a胃蛋白酶 b鹽酸c胰淀粉酶 d胰蛋白酶答案：d2 關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的錯誤敘述是（）a用于人工培養(yǎng)的動物細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物b將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個細(xì)胞c在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液d人工培養(yǎng)的動物細(xì)胞只能傳50代左右，之后所培養(yǎng)的細(xì)胞會衰老死亡答案：d3 下列有關(guān)生物工程技術(shù)的說法，肯定正確的是（）a用于人工培養(yǎng)的細(xì)胞大多數(shù)取自胚胎或幼齡動物，其原因是這些細(xì)胞比成年動物的體細(xì)胞具有更強(qiáng)的全能性b離體的動物和植物細(xì)胞在適當(dāng)條件下都能發(fā)育成完整的個體，所以可以利用動植物細(xì)胞培養(yǎng)的方法進(jìn)行動植物的人工無性生殖c在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式是有絲分裂，形成的子細(xì)胞的染色體數(shù)與體細(xì)胞相同d基因工程成功的標(biāo)志是目的基因可以隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制解析：在培養(yǎng)動物細(xì)胞時多選取胚胎或幼齡動物的組織、器官，原因是這些細(xì)胞的分裂能力強(qiáng)；離體的動物細(xì)胞不能發(fā)育成完整的個體；基因工程成功的標(biāo)志是目的基因產(chǎn)生相應(yīng)的產(chǎn)物；在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式是有絲分裂，子細(xì)胞的染色體數(shù)與體細(xì)胞相同。答案：c4 下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的是（）a生產(chǎn)生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等b用于檢測物質(zhì)的毒性c用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)d以上三項(xiàng)全是解析：考查動物細(xì)胞培養(yǎng)技