浙科版選修三 基因工程的原理和技術(shù) 學(xué)案.doc

第二節(jié)基因工程的原理和技術(shù)1.基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定和高效地表達(dá)。2.獲取目的基因的方法：如果目的基因的序列是已知的，可用化學(xué)方法合成目的基因，或者用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pcr)擴(kuò)增目的基因。如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以從基因文庫(kù)中獲取。3.操作步驟：獲得目的基因；形成重組dna分子；重組dna分子導(dǎo)入受體體細(xì)胞；篩選含有目的基因的受體細(xì)胞；目的基因表達(dá)。一、基因工程的基本原理1基本原理：讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定和高效地表達(dá)。2基因工程的變異類(lèi)型：基因工程屬于可遺傳變異中的基因重組。3變異特點(diǎn)：實(shí)現(xiàn)性狀定向改造。二、基因工程的基本操作步驟1獲得目的基因(1)目的基因：人們所需要的基因，如人的胰島素基因、植物的抗病基因等。(2)獲取方法：如果目的基因的序列是已知的，可用化學(xué)方法合成目的基因，或者用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pcr)擴(kuò)增目的基因。如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一個(gè)包括目的基因在內(nèi)的基因文庫(kù)，從基因文庫(kù)中找到目的基因。2形成重組dna分子(1)通常用相同的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體dna(如質(zhì)粒)，形成相同的粘性末端。(2)用dna連接酶將目的基因和載體dna連接在一起，形成重組dna分子。3將重組dna分子導(dǎo)入受體細(xì)胞(1)常用的受體細(xì)胞：大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。(2)導(dǎo)入方法舉例：用質(zhì)粒作為載體，宿主細(xì)胞應(yīng)該選擇大腸桿菌，用氯化鈣處理大腸桿菌，增加其細(xì)胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入大腸桿菌宿主細(xì)胞。4篩選含有目的基因的受體細(xì)胞(1)篩選原因：并不是所有的細(xì)胞都接納了重組dna分子。(2)篩選方法舉例：質(zhì)粒上有抗生素如四環(huán)素的抗性基因，所以含有這種重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞就能夠在有四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，而沒(méi)有接納重組dna分子的細(xì)胞則不能生長(zhǎng)，這樣就能篩選出含有重組dna分子的受體細(xì)胞。5目的基因的表達(dá)目的基因在宿主細(xì)胞中表達(dá)，產(chǎn)生人們需要的功能物質(zhì)。1基因工程主要操作步驟的順序是()目的基因表達(dá)篩選含有目的基因的受體細(xì)胞重組dna分子導(dǎo)入受體體細(xì)胞形成重組dna分子獲得目的基因a bc d解析：選c基因工程的主要操作步驟順序是：獲得目的基因形成重組dna分子重組dna分子導(dǎo)入受體體細(xì)胞篩選含有目的基因的受體細(xì)胞目的基因表達(dá)。2下列不屬于目的基因獲得方法的是()a化學(xué)合成 bpcr擴(kuò)增c從基因文庫(kù)中獲取 d翻譯解析：選d翻譯的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，不是dna。3基因工程中科學(xué)家常采用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞的主要原因是()a結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方便 b繁殖速度快c遺傳物質(zhì)含量少，易操作 d性狀穩(wěn)定，變異少解析：選b目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，隨著受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制，由于細(xì)菌等微生物繁殖速度非常快，在很短的時(shí)間內(nèi)就能獲得很多的目的基因的產(chǎn)物。4在基因工程技術(shù)中，可能需要用到cacl2處理的環(huán)節(jié)是()a目的基因的提取和導(dǎo)入b目的基因與載體結(jié)合c將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞d目的基因的檢測(cè)與鑒定解析：選c將目的基因?qū)朐松锸荏w細(xì)胞時(shí)，首先用ca2處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中dna分子的生理狀態(tài)，然后在一定條件下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收dna分子，完成轉(zhuǎn)化。5科學(xué)家用納米技術(shù)制造出一種“生物導(dǎo)彈”，可以攜帶dna分子。把它注射入組織中，可以通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，dna被釋放出來(lái)，進(jìn)入到細(xì)胞核內(nèi)，最終整合到細(xì)胞染色體上，成為細(xì)胞基因組的一部分，dna整合到細(xì)胞染色體中的過(guò)程屬于()a基因突變 b基因重組c基因互換 d染色體畸變解析：選b基因突變是基因內(nèi)部結(jié)構(gòu)的改變；染色體畸變是指染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目變化；基因工程是將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，得到人們所需要的產(chǎn)物，屬于基因重組。1獲取目的基因方法的比較前提條件獲得方法過(guò)程優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)目的基因序列已知化學(xué)合成用單個(gè)的游離的核苷酸聚合而成專(zhuān)一性強(qiáng)僅限于比較簡(jiǎn)單的基因pcr擴(kuò)增在體外通過(guò)taqdna聚合酶的作用進(jìn)行dna復(fù)制循環(huán)往復(fù)、大量擴(kuò)增要求條件高、易出錯(cuò)目的基因序列未知強(qiáng)從基因文庫(kù)中獲取構(gòu)建dna分子中所有基因組成基因文庫(kù)，從中尋找目的基因可操作性需從大量材料中尋找2形成重組dna分子(1)用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使其產(chǎn)生相同末端。(2)將切下的目的基因片段與切開(kāi)的質(zhì)?；旌希偌尤脒m量dna連接酶，使目的基因插入質(zhì)粒的切口處，形成一個(gè)重組dna分子(重組質(zhì)粒)。構(gòu)建過(guò)程如下圖所示：(3)用到的工具酶：限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶。(4)理論基礎(chǔ)：堿基互補(bǔ)配對(duì)原則和dna雙螺旋結(jié)構(gòu)。(5)形成的重組dna分子特點(diǎn)：既有目的基因又有標(biāo)記基因。3將重組dna分子導(dǎo)入受體細(xì)胞(1)常用的受體細(xì)胞：大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。(2)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法比較：4篩選含有目的基因的受體細(xì)胞(1)篩選原因：由于在導(dǎo)入重組dna分子時(shí)，不是所有的細(xì)胞都接納了重組dna分子。(2)篩選原理：如抗性標(biāo)記基因篩選法，見(jiàn)下圖。題組沖關(guān)1基因工程常用的受體細(xì)胞有()大腸桿菌枯草桿菌支原體動(dòng)植物細(xì)胞abc d解析：選d基因工程常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞。2下列對(duì)基因工程的說(shuō)法正確的是()a導(dǎo)入人胰島素原基因的大腸桿菌可以直接合成具有生物活性的人胰島素b用氯化鈣處理大腸桿菌可以改變細(xì)胞膜的通透性，從而使重組質(zhì)粒容易進(jìn)入c篩選是指選擇出含有目的基因的受體細(xì)胞d只要目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞就能夠表達(dá)解析：選c導(dǎo)入人胰島素原基因只能合成人胰島素原，經(jīng)進(jìn)一步加工后才能獲得具有生物活性的人胰島素；用氯化鈣處理可改變大腸桿菌細(xì)胞壁的通透性，有利于目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞；但進(jìn)入受體細(xì)胞的目的基因不一定能夠表達(dá)。3在胰島素的基因與質(zhì)粒形成重組dna分子的過(guò)程中，下列哪組是所需要的()同一種限制酶切割兩者不需同一種限制酶切割兩者加入適量的dna連接酶不需加入dna連接酶a bc d解析：選a目的基因與載體重組需要兩者具有完全相同的粘性末端，而一般用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒才能切出相同的末端，而目的基因插入質(zhì)粒實(shí)現(xiàn)重組，必須在dna連接酶作用下才能完成。隨堂基礎(chǔ)鞏固1人們常選用的細(xì)菌質(zhì)粒分子往往帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗性基因的主要作用是()a提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性b對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè)c增加質(zhì)粒分子的分子量d便于與外源基因連接解析：選b重組dna必須具有標(biāo)記基因，其目的就是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。2用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì)。下列敘述錯(cuò)誤的是()a常用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒bdna連接酶和rna聚合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶c可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒d導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)解析：選b基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶。質(zhì)粒作為載體必須具有標(biāo)記基因，導(dǎo)入的目的基因不一定能成功表達(dá)，還要進(jìn)行修飾或者其他處理。3利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類(lèi)所需要的產(chǎn)品。下列能說(shuō)明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是()a棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲(chóng)基因b大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及mrnac山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)素dna序列d酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白解析：選d基因的表達(dá)是指基因使遺傳信息以一定的方式反映到蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)上這一過(guò)程，即必須獲得相應(yīng)的蛋白質(zhì)才能說(shuō)明基因完成了表達(dá)。4科學(xué)家將動(dòng)物控制合成胰島素的基因與大腸桿菌的dna分子拼接并在大腸桿菌內(nèi)成功表達(dá)。1982年，用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的胰島素投放市場(chǎng)，使胰島素的售價(jià)降低30%50%，請(qǐng)回答：(1)大腸桿菌常作為基因工程的受體細(xì)胞，是由于它_。其細(xì)胞中的_常作為目的基因的載體。(2)合成胰島素的基因能與大腸桿菌的dna拼接，是由于_，能在大腸桿菌中得到表達(dá)的原因是_。(3)基因工程中的基因重組與孟德?tīng)栠z傳定律中講的基因重組相比，最大的區(qū)別是_。解析：真核細(xì)胞dna結(jié)構(gòu)與原核細(xì)胞dna雖然有區(qū)別，但由于其基本組成和結(jié)構(gòu)相同，故可以相互拼接并能表達(dá)。答案：(1)是單細(xì)胞，繁殖快質(zhì)粒(2)dna分子都是由四種脫氧核苷酸組成的雙螺旋結(jié)構(gòu)生物共用一套遺傳密碼，合成蛋白質(zhì)的氨基酸種類(lèi)相同(3)基因工程中的基因重組是在細(xì)胞外通過(guò)人工技術(shù)完成，不是發(fā)生在有性生殖的過(guò)程中，可以使生物的遺傳性狀發(fā)生定向變異課時(shí)跟蹤檢測(cè)1要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是()限制性核酸內(nèi)切酶解旋酶dna連接酶 還原酶abc d解析：選d目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組時(shí)，首先需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶，切割出相同的末端，再依靠dna連接酶對(duì)目的基因和載體進(jìn)行“縫合”形成重組dna分子。2聚合酶鏈反應(yīng)可表示為()apec bpercpdr dpcr解析：選d聚合酶鏈反應(yīng)可表示為pcr。3將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞之前，要給予一定處理和適宜條件，下列敘述錯(cuò)誤的是()acacl2處理 b溫度、ph影響導(dǎo)入c酒精處理 d增加細(xì)胞壁通透性解析：選c將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞之前，要用氯化鈣(cacl2)處理微生物，增加其細(xì)胞壁的通透性，當(dāng)然也受溫度和ph影響，而酒精對(duì)細(xì)胞則有毒害作用。4就分子結(jié)構(gòu)而論，質(zhì)粒是()a環(huán)狀雙鏈dna分子b環(huán)狀單鏈dna分子c環(huán)狀單鏈rna分子d線狀雙鏈dna分子解析：選a質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中小型環(huán)狀雙鏈dna分子。5如圖為用于基因工程的一個(gè)質(zhì)粒示意圖。用ecor限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和該質(zhì)粒，再用dna連接酶連接形成重組質(zhì)粒，然后導(dǎo)入大腸桿菌，最后將大腸桿菌放在四種培養(yǎng)基中培養(yǎng)：a無(wú)抗生素的培養(yǎng)基，b含四環(huán)素的培養(yǎng)基，c含氨芐青霉素的培養(yǎng)基，d含四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基。含重組質(zhì)粒的大腸桿菌能生長(zhǎng)的是()aa bb和cca和b da和c解析：選d據(jù)圖可知，ecor限制性核酸內(nèi)切酶的切點(diǎn)位于四環(huán)素抗性基因的內(nèi)部，用該酶切割質(zhì)粒則會(huì)損壞四環(huán)素抗性基因的結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不具有四環(huán)素抗性。6下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述，正確的是()a轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，可能通過(guò)花粉傳入其他近緣生物中b轉(zhuǎn)入抗蟲(chóng)基因的植物，不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因的增加c動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)d如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界，則不存在安全性問(wèn)題解析：選a轉(zhuǎn)入到油菜的基因，可以通過(guò)花粉傳入其他近緣生物中；由于植物與害蟲(chóng)間是相互選擇的，轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因植物可使昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加；由于不同生物共用一套遺傳密碼，所以動(dòng)物生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后也能表達(dá)；轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問(wèn)題，要通過(guò)驗(yàn)證才能得到證實(shí)。7某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(amy)基因a，通過(guò)基因工程的方法，將基因a與載體結(jié)合后導(dǎo)入馬鈴薯植株中，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在。下列有關(guān)這一過(guò)程的敘述錯(cuò)誤的是()a獲取基因a的限制性核酸內(nèi)切酶的作用部位是圖中的b基因a進(jìn)入馬鈴薯細(xì)胞后，可隨馬鈴薯dna分子的復(fù)制而復(fù)制，傳給子代細(xì)胞c連接基因a與載體的dna連接酶的作用部位是圖中的d通過(guò)該技術(shù)人類(lèi)實(shí)現(xiàn)了定向改造馬鈴薯的遺傳性狀的目的解析：選cdna連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶的作用部位都是磷酸二酯鍵，即圖中部位。8人們?cè)噲D利用基因工程的方法，用乙種生物生產(chǎn)甲種生物的一種蛋白質(zhì)。生產(chǎn)流程如下：下列說(shuō)法正確的是()a過(guò)程需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，原料是a、u、g、cb要用限制性核酸內(nèi)切酶切斷質(zhì)粒dna，再用dna連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起c如果受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，過(guò)程可以用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入法d參與過(guò)程的物質(zhì)不含有a、u、g、c解析：選b過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄，利用逆轉(zhuǎn)錄酶，合成dna片段，所以需要的原料是a、t、g、c；過(guò)程是目的基因與質(zhì)粒dna的重組，需要用限制酶切斷質(zhì)粒dna，再用dna連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起；如果受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，重組基因的導(dǎo)入常用顯微注射法，農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入法多用于植物細(xì)胞；過(guò)程是基因的表達(dá)過(guò)程，此過(guò)程中的mrna和trna都含有a、u、g、c。9根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1)限制性核酸內(nèi)切酶切割dna分子后產(chǎn)生的片段，其末端類(lèi)型有_及平末端。(2)質(zhì)粒載體用ecor切割后產(chǎn)生的片段如下：為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的dna除可用ecor切割外，還可用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是_。(3)按其作用不同，基因工程中所使用的工具酶主要有_，_。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是_，產(chǎn)物是_。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用_技術(shù)。解析：(1)限制性核酸內(nèi)切酶切割dna分子后，露出的末端類(lèi)型為粘性末端和平末端兩種。(2)要想用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割并與之相連接，則需要的限制性核酸內(nèi)切酶切割后的末端與ecor切割后的末端一致。(3)基因工程中使用的工具酶主要有限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄的模板是rna，產(chǎn)物是cdna(或dna)，可用pcr技術(shù)對(duì)其擴(kuò)增。答案：(1)粘性末端(2)切割產(chǎn)生的dna片段末端與ecor切割產(chǎn)生的dna片段末端相同(3)限制性核酸內(nèi)切酶dna連接酶(4)mrna(或rna)cdna(或dna)pcr10植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)理論上，基因文庫(kù)含有這種生物的_(填“全部”或“部分”)基因。(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹衉出所需的_。(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物_的體細(xì)胞中，經(jīng)過(guò)一系列的過(guò)程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的_，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，再在田間實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)植株的_是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為31時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了_(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。解析：(1)基因文庫(kù)含有生物的全部基因。(2)植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)，若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因文庫(kù)，包含該生物的所有基因，然后再?gòu)闹泻Y選出所需的耐旱基因。(3)若從植物甲中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，通常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細(xì)胞后，經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)該耐旱基因是否合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，即檢測(cè)此再生植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，說(shuō)明已經(jīng)合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，這時(shí)再進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)檢測(cè)，即在田間實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)植株的耐旱性是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為31，符合基因的分離定律，說(shuō)明得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合子，因此可推測(cè)該耐旱基因只整合到了同源染色體的一條上。答案：(1)全部(2)篩選耐旱基因(3)乙表達(dá)產(chǎn)物耐旱性(4)同源染色體的一條上11在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下圖為獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)a過(guò)程需要的酶有_。(2)b過(guò)程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為載體必須具備的兩個(gè)條件是_。(3)c過(guò)程的培養(yǎng)基中除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入_。(4)在d過(guò)程中，抗蟲(chóng)基因遺傳信息的傳遞過(guò)程是_。解析：(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過(guò)程需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶。(2)作為基因工程的載體，必須具備三個(gè)條件：在宿主細(xì)胞中能穩(wěn)定保存并能大量復(fù)制；有一個(gè)至多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切點(diǎn)，而且每種酶的切點(diǎn)最好只有一個(gè)；有一定的標(biāo)記基因，便于篩選。題目中能體現(xiàn)的是。(3)由題可知，我們需要的植株是含有抗蟲(chóng)基因的植株，因此要進(jìn)行篩選，含有抗蟲(chóng)基因的植株也一定含有卡那霉素抗性基因，所以要利用卡那霉素進(jìn)行篩選。(4)抗蟲(chóng)基因最終要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)的性狀就必須表達(dá)，即通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯來(lái)實(shí)現(xiàn)。答案：(1)限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶(2)具有標(biāo)記基因；能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存(3)卡那霉素(4)抗蟲(chóng)基因先轉(zhuǎn)錄成mrna，再翻譯成蛋白質(zhì)12.某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源dna分子插入到ampr或tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(ampr表示氨芐青霉素抗性基因，tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用bamh酶切后，與用bamh酶切獲得的目的基因混合，加入dna連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物