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專(zhuān)題二 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 隨堂基礎(chǔ)鞏固1下列關(guān)于土壤取樣的敘述,錯(cuò)誤的是()a土壤取樣時(shí),應(yīng)選取肥沃、濕潤(rùn)的土壤b先鏟去表層土3 cm左右,再取樣c取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌d應(yīng)在酒精燈火焰旁稱(chēng)取土壤解析:選c在“分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中,必須在含微生物豐富的濕潤(rùn)、肥沃土壤中取樣,所用小鐵鏟和信封必須滅菌。2測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量一般選104、105和106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),而測(cè)定真菌的數(shù)量一般選用102、103和104倍稀釋液,其原因是()a細(xì)菌個(gè)體小,真菌個(gè)體大b細(xì)菌易稀釋?zhuān)婢灰紫♂宑細(xì)菌在土壤中的含量比真菌高d隨機(jī)的,沒(méi)有原因解析:選c細(xì)菌在土壤中的含量多于真菌,因此稀釋涂 布時(shí),細(xì)菌的稀釋倍數(shù)要大于真菌的稀釋倍數(shù),這樣才能 使平板上培養(yǎng)出的菌落清晰易辨。3下列屬于菌落特征的是() 菌落的形狀菌落的大小菌落的多少隆起 程度顏色有無(wú)莢膜abc d解析:選b菌落特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度 和顏色等。4下列能分離出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是()akh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、葡萄糖、尿素、瓊脂、水bkh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、葡萄糖、瓊脂、水ckh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、尿素、瓊脂、水dkh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水解析:選a要想分離尿素分解菌,應(yīng)把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源,而b項(xiàng)中無(wú)氮源,c項(xiàng)中無(wú)碳源,d項(xiàng)中牛肉膏、蛋白胨都可作為氮源。5用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用,需要設(shè)置的對(duì)照是()a未接種的選擇培養(yǎng)基b未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基c接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基d接種了的選擇培養(yǎng)基解析:選c將菌液稀釋相同的倍數(shù)并接種,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目,因此,應(yīng)選擇接種菌種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照。對(duì)照實(shí)驗(yàn)遵循的原則是單一變量原則。6某同學(xué)對(duì)101、102、103倍稀釋液計(jì)數(shù)的平均菌落數(shù)分別為2 760、295和16,則菌落總數(shù)為(所用稀釋液體積為0.1 ml)()a2.76104個(gè)/ml b2.95105個(gè)/mlc4.6104個(gè)/ml d3.755104個(gè)/ml解析:選b菌落計(jì)數(shù)法是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首先選擇平均菌落數(shù)在30300之間的平板,以該平均菌落數(shù)與體積之比乘以稀釋倍數(shù)即為該樣品的細(xì)菌總數(shù)。若所有稀釋倍數(shù)的菌落數(shù)均不在30300之間,則應(yīng)以最接近300或30的平均菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)算。7下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn),完成下列問(wèn)題: 實(shí)驗(yàn)原理:農(nóng)田的表層土壤中,自生固氮菌的含量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿,接種到無(wú)氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下,只有自生固氮菌才能生長(zhǎng)繁殖。用這種方法,可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離。 材料用具:農(nóng)田的表層土壤、無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有9 ml無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂布 器、無(wú)菌培養(yǎng)皿、盛有90 ml無(wú)菌水的錐形瓶、恒溫箱。(1)方法步驟:倒平板:分別將無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板,應(yīng)在_操作。制備土壤稀釋液:取土樣10 g加入盛有90 ml無(wú)菌水的錐形瓶中,充分搖勻。用無(wú)菌吸管吸取上清液1 ml,轉(zhuǎn)至盛有9 ml的無(wú)菌水的試管中,依次稀釋到107稀釋度。涂布:按照由107103稀釋度的順序分別吸取0.1 ml進(jìn)行平板涂布,每個(gè)稀釋度下,無(wú)氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布_個(gè)平板,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布_個(gè)平板。培養(yǎng):放入恒溫箱內(nèi),在2830 下培養(yǎng)34 d。細(xì)菌的計(jì)數(shù):當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),選取菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。如果測(cè)定的平均值為50,則每克樣品中的菌株數(shù)是_。(稀釋度是105)(2)預(yù)期結(jié)果:相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)_(填“多于”或“少于”)無(wú)氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。原因是_。解析:(1)在酒精燈火焰旁倒平板,可以避免雜菌的污染。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,一般設(shè)置35個(gè)平板,選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并取平均值,則每克樣品中的菌株數(shù)為(500.1)1055107個(gè)。(2)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照,以消除無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,該培養(yǎng)基適合土壤中幾乎所有細(xì)菌生存
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