人教版選修1土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì) 數(shù)作業(yè).docx

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)一、單選題1在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，a同學(xué)從對(duì)應(yīng)106培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。產(chǎn)生a同學(xué)結(jié)果的原因可能有（ ） 土樣不同 培養(yǎng)基污染 操作失誤 沒(méi)有設(shè)置對(duì)照a. b. c. d. 【答案】d【解析】同一稀釋濃度下菌落數(shù)不同，產(chǎn)生a同學(xué)結(jié)果的可能的原因可能是土樣不同、培養(yǎng)基污染，或者操作失誤，未達(dá)到相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。2農(nóng)田土壤的表層，自生固氮菌的含量比較多，將用表層土制成的稀泥漿，接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其它細(xì)菌分開，對(duì)培養(yǎng)的要求是（ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒溫箱培養(yǎng) 28 -30溫度下培養(yǎng)a. b. c. d. 【答案】c【解析】試題分析：自生固氮菌是異養(yǎng)菌，生長(zhǎng)繁殖需要有機(jī)碳源；自生固氮菌能利用空氣中的氮?dú)?，培養(yǎng)基中不加氮源，固氮菌能生長(zhǎng)繁殖，不能固氮的菌不能生長(zhǎng)繁殖；自生固氮菌的生長(zhǎng)繁殖的最適宜溫度是2830；自生固氮菌對(duì)抗生素敏感，培養(yǎng)基中不能加抗生素。所以如果從土壤浸出液中分離出自生固氮菌對(duì)培養(yǎng)基的要求是不加抗生素、不加氮素、加葡萄糖、2830恒溫箱中培養(yǎng)。考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)3在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，a同學(xué)從對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。a同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有由于土樣不同 由于培養(yǎng)基污染 由于操作失誤 沒(méi)有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)a b c d【答案】a【解析】試題分析：a同學(xué)獲得的菌落遠(yuǎn)大于其他同學(xué)，可能的原因是采用的土樣不同，導(dǎo)致計(jì)數(shù)偏差，正確；也可能是因?yàn)榕囵B(yǎng)基污染，正確；還可能是由于操作失誤，正確；沒(méi)有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)不會(huì)增加菌落數(shù)目，錯(cuò)誤。因此，a項(xiàng)正確，b、c、d項(xiàng)錯(cuò)誤。考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)4有關(guān)生物技術(shù)的操作過(guò)程或應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是 (雙選)a. 測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量時(shí)需要標(biāo)準(zhǔn)顯色液b. 利用凝膠色譜柱分離蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)早一些從層析柱中洗脫出來(lái)c. 胚胎分割技術(shù)可看做是動(dòng)物無(wú)性繁殖的方法d. 以尿素作為唯一碳源的培養(yǎng)基用于鑒別細(xì)菌【答案】bd【解析】試題分析：測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量時(shí)需要標(biāo)準(zhǔn)顯色液，觀察亞硝酸鹽溶液顏色的梯度變化，故a正確。利用凝膠色譜柱分離蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢，分離較慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快，較快分離，故b錯(cuò)。胚胎分割技術(shù)是將動(dòng)物早期胚胎分割為幾等份，利用細(xì)胞全能性，移植獲得同卵多胎，為無(wú)性繁殖，故c正確。以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基用于篩選分解尿素的細(xì)菌，故d錯(cuò)。考點(diǎn)：本題考查生物技術(shù)相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用能力。5在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)能分解尿素的細(xì)菌后，指示劑的顏色是()a. 藍(lán)色 b. 紅色 c. 黑色 d. 棕色【答案】b【解析】試題分析：分解尿素的細(xì)菌能合成脲酶，將尿素分解形成堿性物質(zhì)氨，在堿性環(huán)境下，酚紅指示劑變紅故選：b6從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌,下列實(shí)驗(yàn)操作不正確的是( )a.將土壤用無(wú)菌水稀釋,制備103105稀釋倍數(shù)的土壤稀釋液b.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上c.用加入剛果紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細(xì)菌d.從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株【答案】c【解析】從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌時(shí),將土壤用無(wú)菌水稀釋,制備土壤稀釋液,將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上,用加入酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基可以鑒別分解尿素的細(xì)菌。從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株。7在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，a同學(xué)從對(duì)應(yīng)106培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落產(chǎn)生a同學(xué)結(jié)果的原因可能有（ ）土樣不同 培養(yǎng)基污染 操作失誤 沒(méi)有設(shè)置對(duì)照a. b. c. d. 【答案】a【解析】試題分析：土樣不同可能導(dǎo)致計(jì)數(shù)偏差，正確；培養(yǎng)基污染，正確；操作失誤可能增加微生物的數(shù)量和種類，菌落會(huì)增多，正確；沒(méi)有設(shè)置對(duì)照不會(huì)增加菌落數(shù)目，錯(cuò)誤a、正確故選：a8培養(yǎng)基是微生物生長(zhǎng)、分離、鑒別的營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)，下列有關(guān)微生物培養(yǎng)及培養(yǎng)基的描述錯(cuò)誤的是a. 微生物培養(yǎng)基的配方中必須包含的成分有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子及瓊脂b. 不論何種培養(yǎng)基，在各成分溶化后都要進(jìn)行滅菌操作，滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌c. 接種微生物常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法d. 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可以鑒定分解尿素的細(xì)菌【答案】a【解析】微生物培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，有的還需要生長(zhǎng)因子等特殊的營(yíng)養(yǎng)，固體和半固體培養(yǎng)基需要瓊脂，液體培養(yǎng)基不需要瓊脂，a錯(cuò)誤；不論何種培養(yǎng)基，在各成分溶化后都要進(jìn)行滅菌操作，滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌，b正確；篩選和分離微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，c正確；以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可以出現(xiàn)紅色的環(huán)帶的菌落，說(shuō)明其為分解尿素的細(xì)菌，d正確。9在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是a. 篩選出能分解尿素的細(xì)菌b. 對(duì)分離的菌種做進(jìn)一步的鑒定c. 培養(yǎng)基中還缺乏酚紅指示劑作細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)d. 若指示劑變藍(lán)我們就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素【答案】b【解析】試題分析：尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使ph升高，培養(yǎng)基中進(jìn)入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌，b正確。點(diǎn)睛：熟記篩選土壤中能分解尿素的細(xì)菌的分離的步驟：土壤取樣樣品的稀釋將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上挑選能生長(zhǎng)的菌落鑒定。10在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酣紅指示劑，培養(yǎng)能分解尿素的細(xì)菌后，指示劑將變成 a紅色 b藍(lán)色 c黑色 d棕色【答案】a【解析】試題分析：以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌，若指示劑變紅，則ph升高，說(shuō)明該種細(xì)菌能分解尿素；選a?？键c(diǎn)：鑒定分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)11在實(shí)驗(yàn)室里，從土壤里分離出自生固氮菌所需的培養(yǎng)基屬于a天然培養(yǎng)基 b鑒別培養(yǎng)基c液體培養(yǎng)基 d選擇培養(yǎng)基【答案】d【解析】試題分析：天然培養(yǎng)基也稱復(fù)合培養(yǎng)基，是含有化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物，a錯(cuò)誤；鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使培養(yǎng)后會(huì)發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物鑒別培養(yǎng)基是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基，b錯(cuò)誤；液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基是按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分類的，液體培養(yǎng)基不一定都具有選擇作用，c錯(cuò)誤； 選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的，d正確?？键c(diǎn)：微生物培養(yǎng)基的分類及作用。12下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法的敘述，不正確的是（ ）a采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往多于實(shí)際的活菌數(shù)b當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落c平板劃線法和稀釋涂布平板法均可分離和提純細(xì)菌，但前者不能用來(lái)計(jì)數(shù)d在某一濃度下涂布三個(gè)平板，若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大，則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果【答案】a【解析】試題分析：a、采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落有可能是由多個(gè)細(xì)菌形成的,所以往往少于實(shí)際的活菌數(shù),a不正確;b、當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落,b正確;c、平板劃線法和稀釋涂布平板法均可分離和提純細(xì)菌，但前者不能用來(lái)計(jì)數(shù),c正確;d、在某一濃度下涂布三個(gè)平板,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大,則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果以減小實(shí)驗(yàn)誤差,d正確考點(diǎn)：菌落數(shù)目的統(tǒng)計(jì)13下列關(guān)于微生物的分離和培養(yǎng)的敘述中，正確的是()a. 進(jìn)行微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)瓶進(jìn)行消毒處理b. 對(duì)細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)可用平板劃線法和稀釋涂布平板法c. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染d. 用含剛果紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出能分解尿素的菌株【答案】c【解析】進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，a錯(cuò)誤；對(duì)細(xì)菌的分離可用劃線法和稀釋涂布平板法，但對(duì)細(xì)菌的計(jì)數(shù)只能用稀釋涂布平板法，b錯(cuò)誤；獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌感染，c正確；尿素分解菌可以將尿素分解成氨使酚紅指示劑呈紅色，因此用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選出能分解尿素的菌株，d錯(cuò)誤。14下列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，能夠順利達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖莂. 將果泥和果膠酶分裝在不同試管中恒溫處理后再混合，以探究果膠酶的最適溫度b. 洗滌紅細(xì)胞時(shí)，需要加入五倍體積的蒸餾水c. 土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上以篩選出能分解尿素的細(xì)菌d. 根據(jù)sds凝膠電泳的結(jié)果可判斷蛋白質(zhì)的分子量大小【答案】a【解析】試題分析：紅細(xì)胞在五倍體積的蒸餾水水中可能吸水脹破；要在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上以篩選出能分解尿素的細(xì)菌，必須加入特定的篩選試劑；sds凝膠電泳原理是根據(jù)蛋白的極性不同，遷移的位置也不同，所以不能根據(jù)結(jié)果判斷蛋白質(zhì)的分子量大?。痪C上所述，選a?？键c(diǎn)：本題考查生物實(shí)踐技術(shù)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。15下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法的敘述，不正確的是a采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的活菌數(shù)b當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落c為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般采用密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)d在某一濃度下涂布三個(gè)平板，若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大，則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果【答案】c【解析】試題分析：計(jì)數(shù)時(shí)一般選取菌落在30300之間的平板，c錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題意在考查土壤中微生物的分離與計(jì)數(shù)的問(wèn)題，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力。二、非選擇題16回答下列(一)(二)小題：(一)請(qǐng)回答從土壤中分離產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問(wèn)題：(1)lb固體培養(yǎng)基：取適量的蛋白胨、酵母提取物、nacl，加入一定量的蒸餾水溶解，再加_，滅菌備用。(2)尿素固體培養(yǎng)基：先將適宜濃度的尿素溶液用_滅菌過(guò)的g6玻璃砂漏斗過(guò)濾，因?yàn)間6玻璃砂漏斗_，故用于過(guò)濾細(xì)菌。然后將尿素溶液加入到已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培養(yǎng)基中，備用。(3)取適量含產(chǎn)脲酶細(xì)菌的104、105兩種土壤稀釋液，分別涂布接種到lb固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48 h，推測(cè)固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)最少的是_(a.105稀釋液尿素固體培養(yǎng)基b105稀釋液lb固體培養(yǎng)基c104稀釋液尿素固體培養(yǎng)基d104稀釋液lb固體培養(yǎng)基)。在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn)_，其原因是細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生_所致。(4)制備固定化脲酶時(shí)，用石英砂吸附脲酶，裝柱。再用蒸餾水洗滌固定化酶柱，其作用是_。(二)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請(qǐng)回答：(1)原生質(zhì)體的分離：在無(wú)菌條件下，取煙草無(wú)菌苗的葉片，放入含有0.5 mol/l甘露醇(維持較高滲透壓)的_混合液處理，經(jīng)過(guò)離心純化后獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該_培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、_和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過(guò)生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是_，胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是：_(a.液泡小、細(xì)胞核小b液泡大，細(xì)胞核大c液泡大，細(xì)胞核小d液泡小、細(xì)胞核大)。(3)為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離得到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過(guò)_方法將它們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的dna，采用_擴(kuò)增相關(guān)基因，來(lái)鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組?！敬鸢浮?瓊脂(糖) 高壓蒸汽 孔徑小，細(xì)菌不能濾過(guò) a 紅色環(huán) 氨(或nh3) 除去游離的脲酶 果膠酶、纖維素酶 降低 心形胚 細(xì)胞分裂素 d 原生質(zhì)體融合 pcr方法【解析】試題分析：本題考查微生物的分離、酶的固定化、原生質(zhì)體的分離與培養(yǎng)，考查對(duì)產(chǎn)脲酶細(xì)菌分離、酶固定化、原生質(zhì)體制備與培養(yǎng)原理與操作流程的理解與識(shí)記。(一) (1)制備固體培養(yǎng)基需入加瓊脂(糖)。 (2)玻璃容器可采用高壓蒸汽法滅菌。g6玻璃砂漏斗孔徑小，細(xì)菌不能濾過(guò)，故用于過(guò)濾細(xì)菌。(3)土壤稀釋液的稀釋倍數(shù)越大，培養(yǎng)基中菌落數(shù)越少；尿素固體培養(yǎng)基上僅產(chǎn)脲酶細(xì)菌可大量繁殖，其他細(xì)菌不能繁殖，故105稀釋液尿素固體培養(yǎng)基上菌落數(shù)最少。在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生氨(或nh3)，使ph升高，酚紅試劑變紅，使菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)。(4)用蒸餾水洗滌固定化酶柱，目的是除去游離的脲酶。(二) (1)細(xì)胞壁的成分為纖維素和果膠，利用酶的專一性，用果膠酶、纖維素酶混合液處理，可除去細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。(2)將原生質(zhì)體培養(yǎng)形成胚性細(xì)胞后，應(yīng)該降低培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)。細(xì)胞團(tuán)可以經(jīng)球形胚、心形胚和胚狀體，最后發(fā)育成植株。發(fā)芽培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素含量相對(duì)較高；胚性細(xì)胞液泡小、細(xì)胞核大。 (3)得到兩種煙草的原生質(zhì)體后，可通過(guò)原生質(zhì)體融合方法將它們的遺傳物質(zhì)組合在一起。擴(kuò)增相關(guān)基因可采用pcr方法。 37【答案】（1）氮源 碳源（2）恒溫培養(yǎng)箱 無(wú)菌水（3）多 高（4）鹽（或nacl）選擇培養(yǎng)基【解析】（1）不同的培養(yǎng)基都含有基本成分，水、無(wú)機(jī)鹽，碳源、氮源。所以培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源、碳源。（2）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種無(wú)菌水 作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（3）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，如果其總數(shù)越多，則說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌，污染程度越高。（4）如果提高培養(yǎng)基中nacl的濃度，可以用于篩選耐鹽細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為選擇培養(yǎng)基。