人教版選修1血紅蛋白的提取與分離 作業(yè).docx

血紅蛋白的提取與分離一、單選題1下列關(guān)于dna和血紅蛋白的提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯誤的是（ ）a. 可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬的紅細(xì)胞中提取到dna和蛋白質(zhì)b. 用不同濃度的nacl溶液反復(fù)溶解與析出dna可除去部分雜質(zhì)c. 透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜d. 凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法【答案】a【解析】豬是哺乳動物，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體，不能從其紅細(xì)胞中提取出dna。2在裝填凝膠色譜柱時(shí)，不得有氣泡存在的原因是a. 氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果b. 氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運(yùn)動c. 氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)d. 氣泡會在裝填凝膠的時(shí)候使凝膠不緊密【答案】a【解析】裝填凝膠色譜柱時(shí)，若產(chǎn)生氣泡，則其會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，從而影響分離效果，a正確，b、c、d均錯誤。3利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是( )a蛋白質(zhì)分子與凝膠的親和力的大小b蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小c蛋白質(zhì)所帶電荷的多少d蛋白質(zhì)溶解度的大小【答案】b【解析】試題分析：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。考點(diǎn)：本題主要考查凝膠色譜法的相關(guān)知識，意在考查考生對相關(guān)知識的理解，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。4以下關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過程及原理敘述正確的是a. 紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的蒸餾水，重復(fù)洗滌三次b. 將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9的nacl溶液透析12小時(shí)c. 凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在d. 蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對分子質(zhì)量較大的移動速度慢【答案】c【解析】紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的生理鹽水，緩慢攪拌，低速短時(shí)離心，如此并重復(fù)洗滌3次，目的是除去雜蛋白，a錯誤；透析時(shí)使用物質(zhì)的量濃度為20mmol/l的磷酸緩沖液，而不是用0.9%的nacl溶液，b錯誤；在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在，氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，c正確；蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對分子質(zhì)量較大的在凝膠外部移動，移動速度快，d錯誤。5紅細(xì)胞中含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來提取和分離血紅蛋白。下列對血紅蛋白提取和分離的敘述，錯誤的是a.血紅蛋白提取和分離一般按照“樣品處理粗分離純化純度鑒定”的順序進(jìn)行b.純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液c.粗分離時(shí)透析的目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)d.可經(jīng)sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定【答案】b【解析】試題分析：凝膠應(yīng)用蒸餾水充分溶脹來配制凝膠懸浮液，b錯誤?？键c(diǎn)：本題考查蛋白質(zhì)的提取和分離。6將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，其中第3層是（ ）a.無色透明的甲苯層 b.脂溶性物質(zhì)的沉淀層c.血紅蛋白的水溶液 d.其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物【答案】c【解析】試題分析：第1層是無色透明的甲苯層，第2層是白色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層是紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液，第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物，故c正確。考點(diǎn)：本題考查血紅蛋白的提取和分離相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的識記掌握程度。77下面說法不正確的是（ ）a. 在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液ph的影響，維持ph基本不變b. 緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成c. 電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程d. 透析袋能使大分子自由進(jìn)出，而將小分子保留在袋內(nèi)【答案】d【解析】試題分析：緩沖溶液通常有一種弱酸和一種相應(yīng)的強(qiáng)堿鹽組成，能對酸性物質(zhì)和堿性物質(zhì)起到一定的中和作用，但其調(diào)節(jié)能力有一定的限度，a項(xiàng)正確；緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成，b項(xiàng)正確；電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程，c項(xiàng)正確；透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)，d項(xiàng)錯誤。考點(diǎn)：本題考查緩沖溶液、電泳和透析的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。8血紅蛋白提取分離實(shí)驗(yàn)中，將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，長時(shí)高速離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，其中從上向下數(shù)第3層是a血紅蛋白的水溶液 b無色透明的甲苯層c脂溶性物質(zhì)的沉淀層 d其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物【答案】a【解析】試題分析：血紅蛋白的分離結(jié)果是：從上向下依次是有機(jī)溶劑、脂溶性物質(zhì)、血紅蛋白的水溶液和其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物，故a正確?？键c(diǎn)：本題主要考查蛋白質(zhì)的分離實(shí)驗(yàn)，意在考查考生能理解所學(xué)知識要點(diǎn)的能力。9下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的措施中，不正確的是( )。a酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液提取b水溶性蛋白質(zhì)可用透析液(中性緩沖液)提取c脂溶性蛋白質(zhì)可用有機(jī)溶劑提取d堿性蛋白質(zhì)可用強(qiáng)酸性溶液提取【答案】d【解析】提取蛋白質(zhì)的基本原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)，加入不同的試劑后，使蛋白質(zhì)溶于試劑中而提取蛋白質(zhì)。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都會使蛋白質(zhì)變性而沉淀。10可以利用哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)有a分離各種細(xì)胞器 bdna的粗提取c分離并純化血紅蛋白 d進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)【答案】c【解析】試題分析：哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器，不能用來分離各種細(xì)胞器，a項(xiàng)錯誤；哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有dna，不能用于dna的粗提取，b項(xiàng)錯誤；哺乳動物成熟的紅細(xì)胞含有血紅蛋白，可以用來分離并純化血紅蛋白，c項(xiàng)正確；哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有分裂能力，不能制成細(xì)胞懸浮液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，d項(xiàng)錯誤?？键c(diǎn)：本題考查哺乳動物成熟的紅細(xì)胞的組成成分和結(jié)構(gòu)、細(xì)胞增殖的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，運(yùn)用所學(xué)知識做出準(zhǔn)確判斷的能力。11下面說法不正確的是 ()a在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液ph的影響，維持ph基本不變b緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成c蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對分子量小的容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程較長，移動速度較慢d透析袋能使大分子自由進(jìn)出，而將小分子保留在袋內(nèi)【答案】d【解析】試題分析：當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液ph變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液，a正確；緩沖溶液是一種能在加入少量酸或堿和水時(shí)大大減低ph變動的溶液， b正確；蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對分子量小的容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程較長，移動速度較慢，c正確；透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)，d錯誤。考點(diǎn)：本題考查有關(guān)實(shí)驗(yàn)的知識，意在考查考生對課本知識的掌握情況。12相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過程可表示為下圖中的哪一個(gè)( )?！敬鸢浮縝【解析】試題分析：凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大小來分離蛋白質(zhì)的。相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，移動較慢；而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部，只能在凝膠外移動，路程短，移動較快。圖b表示正確?？键c(diǎn)：本題考查蛋白質(zhì)分離技術(shù)凝膠色譜法的原理，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。13下列操作正確的是a. 分離紅細(xì)胞時(shí)采用低速長時(shí)間離心b. 紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水就可c. 分離血紅蛋白溶液是低速短時(shí)間離心d. 透析時(shí)要用20 mmol/l的磷酸緩沖液，透析12 h【答案】d【解析】試題分析：分離紅細(xì)胞時(shí)采用低速短時(shí)間離心，a錯誤；紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水和甲苯，b錯誤；分離血紅蛋白溶液是快速短時(shí)間離心，c錯誤；透析時(shí)要用20mmol/l的磷酸緩沖液，透析12h，d正確?？键c(diǎn)：本題考查蛋白質(zhì)分離的相關(guān)操作。14有關(guān)凝膠色譜法和電泳法的說法正確的是a. 它們都是分離蛋白質(zhì)的重要方法b. 它們的原理相同c. 使用凝膠色譜法需要用緩沖溶液而電泳不需要d. 以上說法都正確【答案】a【解析】試題分析：凝膠色譜法和電泳法都是分離蛋白質(zhì)的重要方法，a正確；凝膠色譜法和電泳法的原理不同，凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的，而電泳法的原理：待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、性狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離，b錯誤；凝膠色譜法和電泳法都要用緩沖溶液來調(diào)節(jié)溶液的酸堿度，c錯誤；由a、b和c選項(xiàng)可知，b和c都錯誤，d錯誤?？键c(diǎn)：本題考查蛋白質(zhì)的提取和分離，解答本題的關(guān)鍵是理解和掌握凝膠色譜法和電泳法的原理，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識記和理解層次的考查。15下列敘述正確的是a果醋制作時(shí)需要經(jīng)過先通氣發(fā)酵后密封發(fā)酵兩個(gè)主要階段b對細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)時(shí)，劃線法、稀釋涂布平板法都可以c凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)，首先收集到的物質(zhì)的分子量較血紅蛋白小d稀釋涂布平板法測定土壤浸出液中活菌數(shù)目時(shí)，測定值可能比實(shí)際值小【答案】d【解析】試題分析：制作果醋的菌種是醋酸桿菌，是好氧菌，需要一直通氣，a錯誤；平板劃線法是用于分離菌落的，稀釋涂布平板法是用于計(jì)數(shù)的，b錯誤；凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)，首先收集到的物質(zhì)的分子量較血紅蛋白大，c錯誤；稀釋涂布平板法測定土壤浸出液中活菌數(shù)目時(shí)，測定值可能比實(shí)際值小，d正確?？键c(diǎn)：本題主要考查生物技術(shù)的相關(guān)知識，意在考查考生對相關(guān)知識的理解，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。二、非選擇題16回答有關(guān)蛋白質(zhì)分離和純化的問題（1） 要獲得血清蛋白的粗制品，必須將含有檸檬酸鈉的血液進(jìn)行_處理，然后將_裝入透析袋中除去_。（2） 要獲得血紅蛋白，應(yīng)如何破碎紅細(xì)胞？_。（3）下圖為血清蛋白通過醋酸纖維薄膜的電泳圖譜，你認(rèn)為含量最多的蛋白質(zhì)是_，含負(fù)電荷最多的球蛋白是_，相對分子質(zhì)量最大的球蛋白是_。（4）電泳是目前應(yīng)用最為普遍的_蛋白質(zhì)的方法?！敬鸢浮?離心 上清液 小分子物質(zhì) 加蒸餾水使其脹破 清蛋白 a1-球蛋白 -球蛋白 （分離）純化【解析】試題分析：血紅蛋白的提取和分離一般的一般步驟是樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定，凝膠色譜法純化蛋白質(zhì)的原理是相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠柱時(shí)移動的速度不同，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外移動，路程短，移動速度快，先被洗脫出來，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，通過凝膠柱的路程長，移動速度慢，洗脫的次序靠后。（1）要獲得血清蛋白的粗制品，必須將含有檸檬酸鈉的血液進(jìn)行離心處理，然后將上清液裝入透析袋中除去小分子物質(zhì)。（2）要獲得血紅蛋白，應(yīng)加蒸餾水使紅細(xì)胞脹破。（3）含量最多的蛋白質(zhì)，即最寬的，是血清蛋白；a1-球蛋白離點(diǎn)樣處最遠(yuǎn)，故含負(fù)電荷最多的球蛋白是a1-球蛋白；-球蛋白的條帶最寬，故相對分子質(zhì)量最大的球蛋白是-球蛋白。（4）電泳是目前應(yīng)用最為普遍的（分離）純化蛋白質(zhì)的方法。【點(diǎn)睛】本題考查的內(nèi)容比較抽象，根據(jù)圖中電泳圖譜中條帶的寬度和距離判斷不同蛋白質(zhì)的含量和帶電荷情況，是解答本題的關(guān)鍵。17材料 飼料原料中的磷元素有相當(dāng)一部分存在于植酸中，豬禽等動物由于缺乏有關(guān)酶，無法有效利用植酸，造成磷源浪費(fèi)，而且植酸隨糞便排出后易造成環(huán)境有機(jī)磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成為目前重要的飼料添加劑之一。(1)商品化植酸酶主要來自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生_，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測定植酸酶活性?；钚詼y定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時(shí)間內(nèi)_表示。(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如圖：中的主要成分為_；中包含植酸酶等多種蛋白質(zhì)。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。_。(3)為制備基因工程菌，可用pcr等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。pcr反應(yīng)包含多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步：_。反應(yīng)過程中打開模板dna雙鏈的方法是_?！敬鸢浮?1)透明圈 植酸鈉的消耗量(醇和磷酸的生成量)(2)小分子雜質(zhì) 電泳法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷、分子大小等差異進(jìn)行純化(3)高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸 加熱【解析】(1)選擇目的菌株，可采用選擇培養(yǎng)基來操作。通過在培養(yǎng)基中添加特定成分，使其他微生物死亡或不能呈現(xiàn)特定現(xiàn)象來篩選。含有植酸酶基因的菌株可產(chǎn)生植酸酶分解培養(yǎng)基中的植酸鈣，產(chǎn)生透明圈。(2)題干中的生產(chǎn)流程為酶純化的過程。含酶的發(fā)酵液通過透析，即以半透膜過濾發(fā)酵液，使一些小分子物質(zhì)被過濾掉，再通過電泳法或凝膠色譜法分離純化混合的酶液，獲取純的植酸酶。18圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置，請回答下列問題：(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分，其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有_功能。我們通常選用豬、牛、羊等動物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。(2)甲裝置中，b是血紅蛋白溶液，則a是_；乙裝置中，c溶液的作用是_。(3)甲裝置用于_，目的是_。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫_，是根據(jù)_分離蛋白質(zhì)的有效方法。在操作中加樣(下圖)的正確順序是_。(4)最后經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行_?！敬鸢浮?1)運(yùn)輸 防止血液凝