初始污染菌回收率方法驗(yàn)證.doc

公司代碼文件編號第 4 頁 共 4 頁類 別： 編 號： 部 門： 頁 碼： 初始污染菌回收驗(yàn)證方案版 次： 新訂 替代: 制 定 人: 年 月 日審批會簽: 批 準(zhǔn) 人： 年 月 日生效日期： 年 月 日1驗(yàn)證目的初始污染菌是產(chǎn)品屏障系統(tǒng)表面或內(nèi)的活微生物數(shù)量。初始污染菌回收率用于補(bǔ)償無法從產(chǎn)品和/或培養(yǎng)基中完全取出的微生物的數(shù)值。也是對某一特定的技術(shù)從產(chǎn)品上移除和/或培養(yǎng)微生物的能力的測定值。2適用范圍 適用于我公司一次性使用活檢鉗的初始污染菌的檢測3檢驗(yàn)依據(jù)中國藥典2010版 附錄 微生物限度檢查法ISO11737-1:2006 醫(yī)療器械的滅菌 微生物學(xué)方法 第一部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的測定GB/T19973-1 2005 醫(yī)療器械的滅菌 微生物學(xué)方法 第一部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的估計(jì)GB15980-1995 一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)4實(shí)驗(yàn)設(shè)備與材料4.1 設(shè)備百級超凈工作臺、無菌檢查膜過濾器、電動吸引器、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、電子天平、pH計(jì)、 冰箱。4.2 培養(yǎng)基及稀釋液營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液、0.1%蛋白胨溶液。4.3 其他實(shí)驗(yàn)材料微孔濾膜（孔徑0.45um，直徑約50mm）、量筒、剪刀、鑷子、吸管、酒精燈、三角燒瓶、試管、培養(yǎng)皿。5實(shí)驗(yàn)程序5.1 抽樣。從每個清洗批次的產(chǎn)品中隨機(jī)抽樣，抽取3件。5.2 洗脫在陰性實(shí)驗(yàn)室里以無菌操作方式將實(shí)驗(yàn)樣品分別浸入裝有已知容量的300ml的0.1%蛋白胨溶液的適當(dāng)容器中，運(yùn)用手工振動法洗脫產(chǎn)品上的微生物，用于洗脫產(chǎn)品外表面初始污染菌。5.3 接種5.3.1 采用薄膜過濾法，將供試液平均倒入兩個濾杯中進(jìn)行抽濾，用100ml(每張濾膜每次沖洗量) pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜，每張濾膜沖洗三次，將濾膜（菌面朝上）分別置于營養(yǎng)瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂平板上培養(yǎng)。將沖洗過的供試品以上述方法再沖洗兩次，共三次。再將剩余供試品加入滅菌好融化的50ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中作為瓊脂覆蓋。其余每條供試品逐一操作，方法同上。5.3.2 陰性對照實(shí)驗(yàn)：僅使用同一批次滅菌0.1%蛋白胨溶液、pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液過濾，將濾膜（菌面朝上）分別置于營養(yǎng)瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂平板上培養(yǎng)作為陰性對照。5.4 培養(yǎng)溫度依據(jù)2010版中國藥典中的培養(yǎng)條件要求：細(xì)菌3035 3天 ，霉菌、酵母菌2328 5天。（必要時可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間至7天）5.5 結(jié)果分析回收率=第一次沖洗得到的微生物數(shù)量/沖洗N次得到的微生物總數(shù)量*100%，回收率應(yīng)大于70%。件數(shù)菌數(shù)第一件第二件第三件第一次沖洗A1B1C1第二次沖洗A2B2C2第三次沖洗A3B3C3瓊脂覆蓋A4B4C4空白對照000總共菌落數(shù)A總B總C總第一次沖洗的回收率A1/A總B1/B總C1/C總根據(jù)上述數(shù)據(jù)，計(jì)算出第一次沖洗的回收率的平均數(shù)，以后每一季度監(jiān)測一次，初始污染菌的菌落報(bào)告，以得到菌落數(shù)/回收率的數(shù)值報(bào)告。6相關(guān)記錄產(chǎn)品名稱生產(chǎn)批號型號規(guī)格抽樣數(shù)量檢驗(yàn)依據(jù)檢驗(yàn)方法培養(yǎng)基名稱供應(yīng)商結(jié)論件