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. 臨床標(biāo)本采集運(yùn)送規(guī)程 臨床微生物標(biāo)本采集與送檢是目前臨床實(shí)驗(yàn)室診斷質(zhì)量保證中較為薄弱的環(huán)節(jié),嚴(yán)重影響臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室對(duì)感染樣本中致病菌的分離培養(yǎng)的陽(yáng)性率和醫(yī)院感染病原體監(jiān)控,也影響臨床診斷,合理選用抗菌藥物,降低耐藥菌的產(chǎn)生和提高感染的治愈率,而且對(duì)預(yù)測(cè)或及時(shí)發(fā)現(xiàn)醫(yī)院感染的暴發(fā)流行、杜絕感染蔓延、研究醫(yī)院感染的發(fā)病機(jī)制和環(huán)節(jié)、制定有效的醫(yī)院感染控制措施等,均具有十分重要的意義。嚴(yán)格實(shí)施正確的微生物標(biāo)本送檢和檢驗(yàn)方法,是做好醫(yī)院感染病原體監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵。鑒此,希望臨床各科能按照本操作規(guī)范采樣送檢。一、醫(yī)院感染標(biāo)本的采集和運(yùn)送基本原則1發(fā)現(xiàn)醫(yī)院感染應(yīng)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查,我院總的醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率應(yīng)不低于70。2盡量在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本。3標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作,減少或避免機(jī)體正常菌群及其他雜菌污染。4標(biāo)本采集后立即送至實(shí)驗(yàn)室,床旁接種可提高病原菌檢出率。5以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、肛拭子或傷口拭子,應(yīng)立即送檢。6盛標(biāo)本容器須經(jīng)滅菌處理,但不得使用消毒劑。7送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康?,使?shí)驗(yàn)室能正確選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境,必要時(shí)應(yīng)注明選用何種抗菌藥物。二、常見(jiàn)醫(yī)院感染標(biāo)本送檢方法1血液與骨髓通常采血部位為肘靜脈。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí),以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜。切忌在靜脈點(diǎn)滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。采血部位的局部皮膚應(yīng)嚴(yán)格消毒。將采集的血液注入血培養(yǎng)基前,應(yīng)更換針頭或過(guò)火消毒針頭。血培養(yǎng)瓶應(yīng)在避光室溫中保存,不必置冰箱保存。每次采血量成人5一10ml,嬰幼兒l一5ml,培養(yǎng)基與血液之比以lO:1為宜,以稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。懷疑菌血癥應(yīng)盡早采血,體溫上升階段采血可提高陽(yáng)性率,但要防止因等待而延誤時(shí)機(jī)。對(duì)已用抗菌藥物而又不能停藥者,可在下次用藥前采血。每例病人至少采血兩次,間隔05一lh,以利于提高陽(yáng)性率和區(qū)分感染菌與皮膚污染菌。對(duì)疑為細(xì)菌性骨髓炎或傷寒病人,在病灶部位或髂前(后)上棘處嚴(yán)格消毒后抽取骨髓lml作增菌培養(yǎng)。2尿液中段尿:女性采樣前應(yīng)先用肥皂水或01高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口;男性須翻轉(zhuǎn)包皮沖洗,用O1新潔爾滅消毒尿道口滅菌紗布擦干后收集標(biāo)本。導(dǎo)尿管導(dǎo)尿采樣可減少污染。對(duì)留置導(dǎo)尿者,可用碘酒消毒尿道口處的導(dǎo)尿管壁,用空針細(xì)針頭斜穿管壁抽吸尿液。或消毒后解開(kāi)接口,棄去導(dǎo)尿管前段尿液、留無(wú)污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本。尿厭氧菌培養(yǎng),或嬰幼兒中段尿采集困難,或培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時(shí),可經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集無(wú)污染的膀胱內(nèi)尿液。送檢標(biāo)本以早晨第一次尿液為佳。室溫下尿標(biāo)本耽擱稍久,可致尿內(nèi)細(xì)菌濃度明顯增加而影響病原菌與污染菌的區(qū)分。不能立即送檢者,可暫存4冰箱。3痰液咳痰:清水反復(fù)漱口后用力咳嗽,從呼吸道深部咳出新鮮痰液于無(wú)菌容器送檢。痰量極少者可用45的lO氯化鈉溶液霧化吸入導(dǎo)痰。對(duì)咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔抵達(dá)氣管腔內(nèi)吸引痰液。用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌,但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開(kāi)或氣管插管患者,可用吸痰管經(jīng)人工氣道插至肺支氣管水平吸引痰液。對(duì)重癥、難治、或伴免疫抑制、或疑似厭氧菌引起的醫(yī)院內(nèi)肺部感染,可采用環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引(TTA)、經(jīng)胸壁穿刺肺吸引(LA)、經(jīng)纖維支氣管鏡或人工氣道作防污染雙套管毛刷(PSB)或防污染支氣管肺泡灌洗(PBAL)采集無(wú)口咽部菌群污染的痰液,進(jìn)行感染病原學(xué)診斷。痰標(biāo)本不能及時(shí)送檢者,可暫存4冰箱。如果室溫下延擱數(shù)小時(shí),定植于口咽部的非致病菌可呈過(guò)度生長(zhǎng),而肺炎球菌、葡萄球菌和流感桿菌檢出率則明顯下降。4傷口、燒傷創(chuàng)面與膿液用無(wú)菌生理鹽水擦洗病灶表面后,用棉拭于取病灶深部的膿液和分泌物,置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。對(duì)未漬破的膿腫宜用碘酒、酒精消毒皮膚后,以無(wú)菌注射器抽取膿液送檢:也可于切開(kāi)排膿時(shí)用無(wú)菌棉拭子采樣。5糞便排便后,挑取有膿血、粘液部分的糞便約23g(液狀糞便則取絮狀物),盛于滅菌廣口瓶或蠟紙盒送檢。用棉拭子挑取糞便插入CnryBLair運(yùn)送培養(yǎng)基或PH70的磷酸鹽甘油中送檢,可提高病原菌檢出率對(duì)不易獲取糞便者或嬰幼兒,可用直腸拭于(又稱肛拭)采集。將拭子前端用無(wú)菌甘油水濕潤(rùn),然后插入肛門約45cm(幼兒約23cm)處,輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面粘液后退出置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。6咽拭、口腔拭子病人清水嗽口后由檢查者將其舌外拉使懸雍垂盡可能向外牽引,棉拭子越過(guò)舌根到咽后壁或懸雍垂的后側(cè),反復(fù)擦拭數(shù)次,插入運(yùn)送培養(yǎng)基。棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔粘膜和唾液。對(duì)化膿性扁桃體炎或口腔念珠菌病,用棉拭子在病灶部位擦拭數(shù)次即可。7漿膜腔積液、腦脊液漿膜腔積液包括胸水、腹水如心包液、關(guān)節(jié)液和鞘膜液等以嚴(yán)格無(wú)菌操作抽取數(shù)毫升液體置無(wú)菌試管或小瓶送檢。對(duì)易自凝的標(biāo)本可添加抗凝劑。嚴(yán)格無(wú)菌操作下采取腦脊液數(shù)毫升置于無(wú)菌試管。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,以防細(xì)菌死亡。疑似有腦膜炎奈瑟菌時(shí),應(yīng)注意保暖,不可置冰箱保存。8生殖道標(biāo)本根據(jù)不同感染種類和病變特征采集不同的標(biāo)本。采集尿道標(biāo)本時(shí),應(yīng)先用生理鹽水局部清洗,以無(wú)菌棉拭子插入尿道口 l一2cm停留十余秒鐘。輕輕旋轉(zhuǎn)拭子后退出對(duì)外陰部糜爛、潰瘍者,經(jīng)生理鹽水清洗后用棉拭子擦取病灶邊緣的分泌物。陰道和官頸口分泌物須在窺陰器下用長(zhǎng)棉拭子采集。子宮內(nèi)分泌物需用無(wú)菌導(dǎo)管抽取導(dǎo)管外套一層保護(hù)膜,插入子宮后再刺穿該膜予負(fù)壓吸引,可減少陰道菌群污染。女性盆腔膿腫,應(yīng)在陰道局部消毒后,由直腸子宮凹陷處進(jìn)針抽取。前列腺液需進(jìn)行前列腺按摩獲取。9組織標(biāo)本表淺的感染組織和各種竇道標(biāo)本可用棉簽擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手術(shù)切除。對(duì)竇道和痰管應(yīng)深部刮取管壁組織。深部組織標(biāo)本可經(jīng)皮膚穿刺采集或手術(shù)切取。標(biāo)本置無(wú)菌容器并加少量生理鹽水以保濕度,或置肉湯增菌液,或置血平皿送檢。尸檢標(biāo)本應(yīng)于死后20h內(nèi)采取,以防腸道等菌群侵入引起污染。作病原體分離的組織標(biāo)本,不可用福爾馬林固定。疑有污染的較大組織塊,可用燒紅的烙鐵燒灼其表面或置沸水中510秒鐘使表面變白消除污染后,再用無(wú)菌器械切開(kāi)組織,取中央部位
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