植物組織培養(yǎng)復習題.doc

植物組織培養(yǎng)復習題（習題）一、名詞解釋愈傷組織：在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序生長且沒有一定結構的薄壁細胞團。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進行離體培養(yǎng)的那部分組織或器官.脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細胞經(jīng)過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織的過程。半連續(xù)培養(yǎng)：利用培養(yǎng)罐進行大量細胞培養(yǎng)的一種方式。無性系變異：由任何形式的細胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株所表現(xiàn)出來的差異。胚狀體：在離體植物細胞、組織或器官培養(yǎng)過程中，由一個或一些體細胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，形成的與合子胚相類似的結構?？醋o培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看護組織培養(yǎng)細胞的一種方法。無融合生殖：由配囊中卵細胞以外的其他細胞發(fā)育成的單倍體植株。種質(zhì)：親代通過生殖細胞活體細胞直接傳遞給子代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。懸浮培養(yǎng)：將游離的植物單細胞或小細胞團，按一定的細胞密度在受到不斷拉動或搖動的液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的一種方式。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。選擇壓：在2個相對性狀之間，一個性狀被選擇而生存下來的優(yōu)勢。細胞全能性：任何有完整細胞核的植物細胞具有全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化，發(fā)育成完整植株的潛在能力。條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)集中加入高密度的細胞進行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時間后，這些細胞向培養(yǎng)基中分泌一些促進細胞生長的活性物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件化，使原來在合成培養(yǎng)基上不能分裂的細胞發(fā)生分裂。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體上分離下來，進行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式授給 無菌花粉，使其在試管內(nèi)實現(xiàn)受精的技術。同步化培養(yǎng)：培養(yǎng)基中大多數(shù)細胞都能同時通過細胞周期的各個階段。植板率：(每個平板上形成的細胞團數(shù) / 每個平板上接種的細胞總數(shù)) * 100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進行的連續(xù)多代的培養(yǎng)。無性系：由任何形式的細胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株。細胞融合：在自發(fā)或人工誘導下，兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。二、填空題1、根據(jù)外植體的的種類不同，組織培養(yǎng)可以分為組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、原生質(zhì)培養(yǎng)和胚胎培養(yǎng)五種類型。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀，組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種類型。2、對高溫高壓條件下易降解變質(zhì)的物質(zhì)，在滅菌時應采用過濾滅菌方法。3、植物組織培養(yǎng)過程中，細胞分裂素與生長素比值（CTK/IAA）高低決定了器官的分化類型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相等時則促進愈傷組織形成。4、在細胞懸浮培養(yǎng)過程中，細胞的生長周期呈“S”型曲線，可分為五個階段，分別是延滯期、對數(shù)生長期、直線生長期、緩慢期和靜止期。5、酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑，它們的使用濃度分別為70-75%和 0.1-1%；消毒時間的范圍分別為 0.2-2min和 2-15min。6、單細胞培養(yǎng)的方法有平板培養(yǎng)法、看護培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法和條件培養(yǎng)基培養(yǎng)法等四種方法。7、在細胞懸浮培養(yǎng)時，實現(xiàn)培養(yǎng)細胞同步化的方法有饑餓法和抑制法。8、實現(xiàn)細胞全能性的條件是組織或器官解離和給予所需的營養(yǎng)物質(zhì)。9、常用于誘導愈傷組織的植物激素是2，4-D。10、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為0.10.25mm。11、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護劑一般是二甲基亞砜（DMSO)。12、支撐植物組織培養(yǎng)作為一門技術的兩個重要模式是培養(yǎng)基模式和激素調(diào)控模式。13、無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡顯微檢測法等14、用于細胞活力的測定方法有 TTC、FDA和 伊凡藍染色法。15、通過離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株的材料有花粉和未受精胚珠。16、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為小于0.3mm。17、植物離體快速繁殖的方式中，遺傳性狀穩(wěn)定的有器官型、短枝發(fā)生型。18、典型的人工種子由體細胞胚、人工胚乳和人工種皮構成。19、原生質(zhì)體的分離純化過程中要添加滲透壓穩(wěn)定劑和原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑提高原生質(zhì)產(chǎn)量和活力，屬于質(zhì)膜穩(wěn)定劑的有葡聚糖硫酸鉀 、CaCl2。20、根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點，快速繁殖的途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和原球莖發(fā)生型。21、組織培養(yǎng)中碳源的主要作用是合成有機物和維持合適的滲透壓。22、目前用于細胞融合的方法主要有自發(fā)融合和誘導融合兩種。23、原生質(zhì)體的純化方法有沉降法、懸浮法和界面法。24、懸浮培養(yǎng)中細胞生長的測定方法：細胞計數(shù)、細胞密實體積（PCV）及細胞總體積、細胞鮮重和干重、細胞有絲分裂的指數(shù)。25、振蕩培養(yǎng)的目的：改善液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)材料的通氣狀況。26、單倍體育種的主要有優(yōu)點是：縮短育種年限、后代不出現(xiàn)性狀分離。27、常用于誘導胡蘿卜胚性愈傷組織的植物激素是生長素，胚狀體的形成則是在細胞分裂素的促進下。28、在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward報道了胡蘿卜細胞懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers報道了馬鈴薯和番茄的融合培養(yǎng)；1960年Cooking報道了誘導雞紅細胞與酵母細胞融合培養(yǎng)。29、在胚乳培養(yǎng)中，由裸子植物胚乳發(fā)育成的植株為單倍體；被子植物胚乳發(fā)育成的植株為三倍體。30、組織培養(yǎng)中的突變可分為體細胞無性系變異和加選擇壓（化學物質(zhì)）誘導產(chǎn)生的變異。三、單選題1、常用于誘導愈傷組織的植物激素是（ B ）。A 6-BA B 2，4-D C IBA D ZT2、在用物理方法誘導原生質(zhì)體融合時，下列哪種方法不在此列（ C ）。A 電刺激 B 顯微操作 C 多聚化合物 D 振蕩3、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為（ A ）A 0.20.3mm B 0.5mm C 0.51mm D 10mm4、用酶解法分離原生質(zhì)的離析液中，下列哪種物質(zhì)具有抑制核糖核酸酶的作用（ D ）。A 葡聚糖硫酸鉀 B CaCl2 C 甘露醇 D MgSO45、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護劑一般是（ A ）。A 二甲基亞砜 B 氯化鈣 C 甘露醇 D 脯氨酸四、簡答題 （論述題）1、植物離體快速繁殖的途徑有哪些？答：1.無菌母株的制備 2.繼代芽的增殖 3.芽苗生根培養(yǎng) 4.再生根的鍛煉和移栽2、脫除植物病毒的方法有哪些？為什么莖尖分生組織培養(yǎng)能夠除去植物病毒？答：1.莖尖培養(yǎng)脫毒 2.熱處理脫毒 3.愈傷組織脫毒 4.微體嫁接脫毒 5.珠心培養(yǎng)脫毒 6.化學療法3、 糖在幼胚培養(yǎng)中的生理作用？答：（1）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓 （2）作為碳源和能源 （3）防止幼胚早期發(fā)育4、單細胞分離的方法有哪些？各有什么優(yōu)缺點？答：機械法； 酶解法； 由培養(yǎng)的愈傷組織中分離單細胞機械法：優(yōu)點：1.細胞不受酶的傷害 2.不發(fā)生質(zhì)器分離；缺點：1.材料要求是薄壁細胞，組織排列松散 2.產(chǎn)量低酶解法：優(yōu)點：能得到比較均勻一致的海綿組織或柵欄組織細胞缺點：在分離細胞時，必須對酶液給予滲透壓保護，防止細胞的賬裂。5、通過機械法和酶解法比較原生質(zhì)體分離優(yōu)缺點。機械法：優(yōu)點：可避免酶制劑對原生質(zhì)的某些破壞作用。缺點：獲得的原生質(zhì)少，產(chǎn)生的原生質(zhì)的細胞類型限制，一般取材局限于具有液泡化程度較大的細胞或長形 的細胞組織。酶解法：優(yōu)點：可以獲得大量的原生質(zhì)體，適用于幾乎所有植物和器官，雙子葉植物葉肉細胞比單子葉更易分離。 缺點：酶制劑含有核酸酶，蛋白酶，過氧化物酶及酚類物質(zhì)，會影響原生質(zhì)體的活力。6、簡述細胞培養(yǎng)的應用。一、天然化合物的生產(chǎn)與特化：(1)植物次生代謝物的產(chǎn)生、(2)進行特化的生物轉(zhuǎn)化反應、(3)細胞的工廠化生產(chǎn) 二：突變體選擇：（1）直接選擇法、（2）間接選擇法、（3）誘導多倍體7、簡述實現(xiàn)懸浮培養(yǎng)細胞同步化的兩種主要方法：（1）饑餓法 （2）抑制法8、單倍體育種優(yōu)點是什么？（1）良好的遺傳研究材料（2）加速育苗進程（3）提高選育效率（4）突變體選育，單倍體植株基因表達不受遮蔽，可以充分展示基因型所決定的表現(xiàn)型（5）遺傳轉(zhuǎn)化受體，確保外源基因的穩(wěn)定遺傳，大大提高遺傳轉(zhuǎn)化率（6）利用單倍體育種時，栽培品種進行純化對基因型混雜品種進行純化。9、原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義。（1）比較容易攝取外來的遺傳物質(zhì)，研究植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和再生植株技術，有可能采取細胞遺傳工程的方法培育出新品種。（2）便于進行細胞融合，形成雜交細胞，可廣泛的重組植物界優(yōu)良遺傳性狀，創(chuàng)造新品種。（3）原生質(zhì)體可以作為遺傳理論研究的材料。10、細胞培養(yǎng)的工業(yè)應用有哪些方面：（1）高產(chǎn)細胞株的選擇 （2）種子的培養(yǎng) （3）大規(guī)模培養(yǎng)11、在原生質(zhì)體分離與純化過程中，影響原生質(zhì)體活力和數(shù)量的因素有哪些？(1)光：一般在黑暗靜止條件下進行。(2)溫度：酶解溫度25-30，兼顧原生質(zhì)穩(wěn)定性及酶活性(3)時間：幾小時或幾十小時，太長時間影響原生質(zhì)活力，一般少于24小時(4)細胞壁降解酶的種類和組合(5)滲透壓的穩(wěn)定性種類(6)原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑(7)PH影響12、簡述離體授粉的主要方式？（1）離體柱頭授粉 （2）離體子房授粉 （3）離體胚珠授粉13、簡述試管苗移栽不易成活的原因？（1）根系結構不完善，不生根，根與芽的輸導不相通（愈傷組織），再生根的吸收功能差；（2）葉部結構不完善，缺少角質(zhì)層和蠟質(zhì)層，保水性差，缺少葉表皮毛，保濕，反光性差，氣孔開度大，關閉能力差，葉片中的柵欄組織發(fā)育不完善，結合能力低。14、種質(zhì)保存的意義有哪些？所占空間少，節(jié)省人力、物力和土地；有利于國際間的種質(zhì)交流及瀕危物種搶救和快繁；需要時，可以用離體培養(yǎng)方法很快大量繁殖；避免自然災害引起的種質(zhì)丟失。15、概述花粉培養(yǎng)在育種上的應用？（1）單倍體育種;（2）對于二倍體植物加倍變成四倍體或倍數(shù)更高的多倍體，可以改善原來植物的某些經(jīng)濟性狀;（3）對異花授粉作物（如玉米）的單倍體植株進行加倍，可迅速獲得自交系，免去了煩瑣的人工自交過程，節(jié)省大量的時間和人力；（4）排除顯隱性基因干擾，有利于進行突變體選擇16、植物子房內(nèi)授粉的意義是什么？在離體條件下，將無菌花粉直接引入子房中，使花粉粒在子房中萌發(fā)，完成受精，并獲得具有生活力的種子的發(fā)育，可以克服柱頭或花柱授粉不親和性障礙。17、莖尖脫毒的理論依據(jù)是什么？（1）莖尖由分生組織構成，無維管束胞間連絲也不發(fā)達，病毒很難進入；（2）分生組織不斷進行活躍的分裂增殖，需要消耗大量能量。代謝旺盛，能抑制病毒復制；（3）莖尖和根尖中內(nèi)源激素濃度在很高的水平，抑制病毒復制18、概述胚乳培養(yǎng)的意義？（1）三倍體幼苗和植株的獲得: 對于以種子生產(chǎn)為目的的植物是無益的；但有時無籽果實及以營養(yǎng)體生產(chǎn)為目的的植物則具有重要經(jīng)濟價值。如蘋果、香蕉、桑樹、西瓜、甜菜、茶及某些花卉的三倍體經(jīng)濟性狀更優(yōu)越。（2）胚乳植株染色體的不穩(wěn)定性，為染色體工程的研究提供有效的途徑。（染色體不穩(wěn)定的原因和變化規(guī)律）（3）為研究淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪等產(chǎn)物的生物合成及其代謝，提供了良好的實驗系統(tǒng)。19、植物細胞規(guī)?；囵B(yǎng)與次生產(chǎn)物生產(chǎn)前景如何？為什么？利用植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)代謝產(chǎn)物具有十分廣闊的前景。目前植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)的化合物很多，包括糖類、酚類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸以及帖類和生物堿等初生和次生代謝產(chǎn)物，植物細胞培養(yǎng)的應用主要包括以下3個方面：（1）有用物質(zhì)（次生代謝產(chǎn)物）的生產(chǎn)；（2）植物無性系的快速繁殖和遺傳突變體的篩選；（3）植物細胞遺傳、生理、生化和病毒方面的深入研究。通過植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥用成分取得了很大的進展，目前已經(jīng)研究過的植物有400多種，能夠生產(chǎn)超過600多種的成分，其中有相當大部分具有藥用價值，如紫草細胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫草寧、人參細胞培養(yǎng)生產(chǎn)人參皂苷以及黃連細胞培養(yǎng)生產(chǎn)黃連素等。20、試述離體受精的類型及其意義。類型：胚珠授粉，子房授粉，柱頭授粉。意義：克服遠緣雜交過程中的受精前障礙，獲得可育性種子。21、論述植物快速繁殖的過程。（1）無菌母株的制備：初代培養(yǎng)，選取性狀優(yōu)良，穩(wěn)定，生長健壯，無病蟲害植株上的外植體，經(jīng)適當存放滅菌處理后，接種在培養(yǎng)基上，誘導其產(chǎn)生芽和愈傷組織。（2）繼代芽的增殖：無菌母株再次切割進行繼代培養(yǎng)，芽分化增殖成叢芽，加快繁殖速度（3）芽苗生根培養(yǎng)：誘導無根苗生根的方法：a.試管內(nèi)生根：將無菌小枝條轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進行培養(yǎng);b.試管外生根：有些植物可以將離體條件下形成的枝條，在基部切口處，用生根粉和滑石粉混合的IBA涂抹，然后種植到溫室或田間，這樣可大大降低成本。（4）再生根的鍛煉與移栽A.將小苗根系周圍的培養(yǎng)基沖洗干凈，以避免有害生物的污染B篩選適宜的移栽基質(zhì)，選較好保水性和通氣性的C選擇使用營養(yǎng)缽，苗床及遮陽網(wǎng)，以調(diào)控光，溫度，濕度等D移栽前后培養(yǎng)條件發(fā)生改變22、論述脫除植物病毒的方法及其原理。（1）熱處理脫毒；原理：1.某些病毒受熱后不穩(wěn)定，高溫使這些病毒失去活性，可以部分地或完全的被鈍化2.病毒進入植物細胞后，隨植物細胞的DNA一起復制，熱處理鈍化病毒的活性后，病毒在植物體內(nèi)增殖減緩或增殖停止，而失去侵染的能力3.高溫下，一方面不能生成或生成病毒很少，另一方面對病毒的破壞作用加重，病毒顆粒生成和破壞的平衡程度受到破壞，使感染植株的病毒含量不斷降低，經(jīng)過一段時間，病毒自行消失，而達到脫毒的目的。（2）愈傷組織脫毒；原理：1.細胞的增殖速度快于病毒復制的速度2.細胞產(chǎn)生變異，獲得對病毒感染的抗性，最終表現(xiàn)出脫毒現(xiàn)象。（3）微體嫁接脫毒；（4）珠心胚培養(yǎng)脫毒；原理：珠心組織與維管束沒有聯(lián)系，所以可以培養(yǎng)珠心組織，得到無病毒植株。（5）化學療法；原理：化學藥劑對病毒的殺傷力。（6）莖尖培養(yǎng)脫毒；原理：莖尖幾乎不含病毒，采用旺盛分裂的莖尖組織培養(yǎng)，就有可能去除病毒。注：具體答案參照各自教材植物組織培養(yǎng)練習題1. 植物組織培養(yǎng)：指要人工控制的條件下，將植物體的任何部分，或器官、或組織、或細胞，進行離體培養(yǎng)，使之發(fā)育形成完整植物體。所謂人工控制的條件，即營養(yǎng)條件和環(huán)境條件；植物體的任何一部分是指根、莖、葉、花、果、實以及它們的組織切片和細胞。2. 愈傷組織培養(yǎng)：將外植體接種在人工培養(yǎng)基上，由于植物生長調(diào)節(jié)劑的存在，而使其細胞脫分化形成愈傷組織，然后通過再分化形成再生植株。3. 外植體：植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料，包括植物體的各種器官、組織、細胞和原生質(zhì)體等。4. 脫分化：一個已停止分裂的成熟細胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。5、接種：把經(jīng)過表面滅菌后的外植體切碎或分離出器官、組織、細胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的全部操作過程。6、褐變：外植體在培養(yǎng)過程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì)，這種致死性的褐化物不但向外擴散使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，而且還會抑制其他酶的活性，嚴重影響外植體的脫分化和器官分化，最后變褐而死亡的現(xiàn)象。二 填空植物組織培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)方式分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。2、植物組織培養(yǎng)類型分為愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚培養(yǎng)、細胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)。3、組織培養(yǎng)的主要應用領域有快速繁殖、脫毒、體細胞無性系變異和新品種培育、單倍體育種、種質(zhì)保存、遺傳轉(zhuǎn)化、次生代謝物的生產(chǎn)等幾個方面。4、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為快速繁殖和脫毒培養(yǎng)兩種類型。5的表面滅菌和接種，培養(yǎng)；試管苗的馴化、移栽與初期管理。6實驗室、攝影室等分室，另加馴化室、溫室和大棚。7、培養(yǎng)基的成分主要包括無機營養(yǎng)、氨基酸、有機附加物、維生素、糖、瓊脂、激素、活性炭、PH。8、植物器官培養(yǎng)主要是指植物的根、莖、葉、花器和幼小果實的無菌培養(yǎng)。9、細胞全能性是指植物的每一個細胞都攜帶有一完整的基因組，并具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。10、玻璃化現(xiàn)象是指試管苗的一種生長失調(diào)癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。11、液體培養(yǎng)是將培養(yǎng)物方在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，又稱為液體震蕩培養(yǎng)。三、1、簡述培養(yǎng)基的配制、分裝、包扎和滅菌。答：（1）確定培養(yǎng)基的配方。（2）貯備液（或母液）的配制與保存配一些濃溶液，用時稀釋，這種濃溶液叫貯備液或母液。按藥品種類和性質(zhì)分別配制，單項、單獨保存或幾種混合保存。一般應按配方順序依次稱量，分別溶解在少量蒸餾水中，最后再依次加到一起，并定容到規(guī)定體積。貯備液配好后貼上標簽，保存在冰箱中。（3）配制培養(yǎng)基先在潔凈的不銹鋼鍋理放入約750ml蒸餾水，加入所需要的瓊脂和糖，最好能在水浴鍋理將瓊脂溶化，如直接加熱應不停地攪拌，防止在鍋底燒焦或沸騰溢出。按需要加入相應量的母液。按需要加入相應量的植物激素和其它物質(zhì)。加蒸餾水定容， 充分混合好后，用1NKOH（或NaOH）調(diào)整PH值到所需值。（4）分裝：按容器的大小和培養(yǎng)要求，趁熱將適量培養(yǎng)基分注到三角瓶或試管中，并即刻用封口膜封住瓶口。（5）滅菌：壓力108kPa，溫度121度，時間1530分鐘。2、什么叫接種？簡述無菌操作注意事項。 答：把經(jīng)過表面滅菌后的外植體切碎或分離出器官、組織、細胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的全部操作過程叫接種。無菌操作注意事項好下：（1）進無菌室之前，操作人員需著經(jīng)滅菌的白色工作服，戴口罩。操作人員雙手必順進行滅菌。 植物組織培養(yǎng)室的核心是無菌室（又叫接種室），怎樣進行無菌室的滅菌 ？答：（1）常規(guī)滅菌法用70%酒精（或0.1%新潔爾滅）朝天花板、四周墻壁方向噴灑；待整個室噴灑完畢后依次用70%酒精將臺子揩一遍；用濕拖把（70%酒精打濕），把地板拖一次；然后將無菌室的門關閉，開紫外燈，照射530分鐘；0.52小時后進入室內(nèi)操作，待工作完畢后，將室門打開換氣。以后每用一次滅菌一次。（2）無菌室發(fā)現(xiàn)霉斑（墻上）時的滅菌用70%酒精擦一遍（里里外外）；用新配70%酒精重復再擦一遍；甲醛蒸：方法是每立方米空間用2ml甲醛（福爾馬林）加0.2克高錳酸鉀的比例，蒸房間24小時（門窗密閉），然后開啟房門，放走甲醛氣體。常規(guī)滅菌法再滅菌一次。待用。4、什么叫污染？污染的原因有哪些？簡述預防污染的措施？污染是指在組培過程中，由于真菌、細菌等微生物的浸染，在培養(yǎng)器內(nèi)滋生大量的菌斑，使培養(yǎng)材料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。污染原因有以下幾種：培養(yǎng)基及各種使用器具消毒不徹底；外植體滅菌時不徹底，在菌殘存在細胞組織中；操作時人為因素帶入； 環(huán)境不清潔；超凈工作區(qū)域污染。預防污染的措施：做好器具滅菌、外植體滅菌，做好無菌操作技術，搞好組培室環(huán)境條件，正確使用和維護好超凈工作臺。5、簡述培養(yǎng)物的玻璃化現(xiàn)象及其預防措施。答：玻璃化是試管苗的一種生量失調(diào)癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。結果是瓶內(nèi)的小苗過渡生長，但有用的苗很少。各種不同植物，玻璃化的發(fā)生頻率各不相同。大量的試驗表明：玻璃幕化苗是在芽分化啟動后的生長過程中，由碳水化合物、氮代謝和水分狀態(tài)等發(fā)生生理性異常所引起，它由多種因素影響和控制，產(chǎn)生玻璃化的主要原因有：激素濃度、溫度、濕度、培養(yǎng)基的硬度、光照時間和培養(yǎng)成分。針對以上原因，可以通過降低培養(yǎng)基的水位；減少培養(yǎng)基中含氮化合物的用量；增加光照強度；調(diào)整培養(yǎng)溫度；降低培養(yǎng)基中細胞分例素的用量；提高培養(yǎng)基的硬度等措施，來減少玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生。6、簡述外植體的褐變及其預防措施。褐變是指在組培過程中，由培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。它的發(fā)生是由外植體中的酚類化合物與多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌類化合物，醌類化合物在酪氨酸酶的作用下，與外植體組織中的蛋白質(zhì)發(fā)生聚合，進一步引起其他酶系數(shù)失活，導致組織代謝紊亂，生長受阻，最終逐漸死亡。引起褐變的原因包括外植體本身、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件等方面的影響。減輕褐化現(xiàn)象的途徑有以下：外植體和培養(yǎng)材料進行2040天的遮光培養(yǎng)或暗培養(yǎng)；選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)整激素用量；控制溫度和光照，在不影響正常生長和分化的前提下，盡量降低溫度，減少光照；冬春季節(jié)選擇年齡適宜的外植體材料進行組培，并加大接種數(shù)量；在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑和其他抑制劑，如抗壞血酸、硫代硫酸鈉、有機酸、半光氨酸及其鹽酸鹽、亞硫酸氫鈉、氨基酸等，可以有效地抑制褐化；加快繼代傳瓶的速度，添加活性炭等吸附劑（0.5%2.5%），是生產(chǎn)上常用的有效方法。四、請設計一個組織培養(yǎng)室，說明規(guī)模、面積、作用、目的、各室作用，并繪出平面圖。專題3 植物的組織培養(yǎng)技術測試題一單選題1植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（ ）A.給予適宜的營養(yǎng)和外部條件 B.導入其它細胞的基因C.脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和外部條件D.將成熟篩管細胞核移植到去核的卵細胞內(nèi)2以下成為組織培養(yǎng)條件的是 ( ) C02 有機物 生長素 細胞分裂素 水 礦質(zhì)元素A. B. C. D. 3無菌技術是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關鍵 , 以下說法正確的是 ( )由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差 , 對無菌操作的要求非常嚴格對培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌 對培養(yǎng)材料進行表面滅菌時一方面要考慮藥劑的消毒效果 , 另一方面還要考慮植物材料的耐受能力 不同藥劑、不同植物材料甚至不同器官要區(qū)別對待 對培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌 如果不小心導致污染 , 將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄A. B. C. D. 4愈傷組織分化過程中 , 當培養(yǎng)基中細胞分裂素 / 生長素的比值較低時 , 誘導分化的器官是 ( )A. 根 B. 芽 C. 葉 D. 胚性細胞團5 當先使用細胞分裂素 , 后使用生長素時 , 實驗結果是 ( ) 。A. 有利于細胞分裂 , 但細胞不分化 B. 細胞既分裂又分化C. 分化頻率提高 D. 有利于細胞分化 , 但不分裂6.在植物組織培養(yǎng)中，切取胡蘿卜的外植體時一般選擇（ ）A具有木質(zhì)部的部分 B具有韌皮部的部分C具有形成層的部分 D具有髓的部分7菊花的組織培養(yǎng)一般選擇（ ）A開過花的老枝 B正在開花的枝條C未開花植株的莖上部新萌生的側枝D任何枝條均可8動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別是（ ）A培養(yǎng)基不同 B動物細胞不需要在無菌條件下進行C動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能D動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株9細胞具有全能性的原因是（ ）生物體細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能生物體的每一個細胞都具有全能性生物體的每一個細胞都含有個體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個細胞都是由受精卵發(fā)育來的10.在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過程中，應選擇哪個時期最易成活（ ）A單核期前的花藥 B單核期后的花藥 C單核期花藥 D雙核期 11.影響花藥培養(yǎng)的主要因素是A材料的選擇與培養(yǎng)基的組成 B親本植株的生理狀況C選擇合適的花粉發(fā)育時期 D材料的低溫處理與接種密度12粗糙脈孢菌的單倍體細胞中具有7條染色體。兩 個不同類型的粗糙脈孢菌A和a融合后成為二倍體，隨即發(fā)生典型的減數(shù)分裂，緊接著又進行一次有絲分裂。此過程最終形成的子細胞數(shù)及每個子細胞中的染色體數(shù)分別為（ ）A8個、7條 B8個、14條 C4個、7條 D4個、14條13某高等植物體細胞內(nèi)假設有6條染色體，它們是AaBbDd，那么，一個花粉管中的兩個精子中的染色體是（ ）AABD和abd BAbD和abd CAaB和Bbd DAbd和Abd14如果某種植物的基因型為AABb，這兩對基因分別位于兩對同源染色體上，去雄后授以aabb植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（ ）AAAaBBb、AAabbb、AAaBbb BAABB、AABbCAAaBBb、AAabbb DAaaBbb、Aaabbb15一個豆莢中種子的數(shù)目，從理論上講取決于（ ）A花中雌蕊的數(shù)目 B雌蕊中柱頭的數(shù)目C子房中受精胚珠的數(shù)目 D胚囊中胚的數(shù)二.多選題16(2003年高考江蘇卷)要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完整植株，需要( )A具有完整細胞核的細胞 B離體狀態(tài)C導入外源基因 D一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素17.（2004年高考廣東、廣西卷）下面關于植物細胞工程的敘述，正確的是（）A葉肉細胞脫分化后可形成無定形狀態(tài)的薄壁細胞B葉肉細胞經(jīng)再分化過程可形成愈傷組織C融合植物葉肉細胞時，應先去掉細胞膜D葉肉細胞離體培養(yǎng)時，可以表現(xiàn)出全能性18MS培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基相比有哪些不同 ? ( )A.MS培養(yǎng)基不含有機物 B. 微生物培養(yǎng)基以有機物為主C.MS培養(yǎng)基不含微量元素 D.MS培養(yǎng)基需提供大量無機營養(yǎng)三.非選擇題19下圖是被子植物的受精過程寫出圖中數(shù)字所代表的結構的名稱： （2）草履蟲進行 生殖；蘑菇進行生殖，酵母菌和水螅常常進行 生殖。（3）下列圖解表示水稻（2n=24）胚珠中胚囊的發(fā)育過程，試根據(jù)圖回答：薄壁細胞 直接發(fā)育 減數(shù)分裂珠心 孢原細胞（2n）三次有絲分裂水稻種子的種皮遺傳物質(zhì)應為 n，其中遺傳物質(zhì)應與 相同。水稻胚珠中的胚囊應共有染色體 條，其中卵細胞中含染色體 條；若水稻授粉受精后發(fā)育成胚和胚乳，則胚細胞中含有染色體 條，胚乳細胞中含染色體 條。7細胞或8核中的7細胞其中就包括了一個卵細胞和兩個極核，若水稻的基因型為AaBb，則胚囊母細胞基因型為 。如果水稻卵細胞基因型應為Ab，則極核的基因型為 ，其原因是。（4）番茄的染色體數(shù)目是24，一個番茄細胞發(fā)生減數(shù)分裂，形成的細胞中有三個退化消失。剩下一個細胞迅速發(fā)生了三次有絲分裂，你會找到多少個細胞核？這些核含有多少個染色體（ ）2A4個核，各有12個染色體 B4個核，各有24個染色體C8個核，各有24個染色體 D8個核，各有12個染色體（5）玉米的體細胞含有20條染色體。在正常情況下，它的卵細胞、一個極核、胚細胞、胚乳細胞、珠被細胞和子房壁細胞所含染色體數(shù)目依次應為（ ）2A10、10、20、20、20、20 B10、10、30、30、20、20C10、10、20、30、20、20 D10、20、20、30、20、2020閱讀下列材料，分析后簡要回答問題：寫出以下過程或結構的名稱：A ；B ；C ；D 。材料2中在獲得雜種細胞的容器中還有其他什么細胞？（3）A過程是否需要光照？ ；再分化是否需要光照？ 。（4）名貴花卉進行離體培養(yǎng)時不應采用該株的（ ）A莖尖 B.子房壁 C.花粉粒 D.葉片21.（1）植物的胚狀體是 繁殖的產(chǎn)物。培育胚狀體利用了 這一項生物技術。（2）包埋胚狀體的膠質(zhì)可看作種子的哪部分？（3）由人工種子萌發(fā)出的植株是否可育？說明理由。 。22參考答案：1-15：CCCAB CCACC AADCC16-18：ABD AD BD19. （1）花粉管 子房壁 珠被 受精極核 受精卵 珠孔（2）分裂 孢子 出芽（3）2 母方 96 12 24 36 AaBb Ab 卵細胞和極核是由單核胚囊經(jīng)三次有絲分裂而來（4）D（5）C20.(1)脫分化;愈傷組織;原生質(zhì)體a;原生質(zhì)體b(2)細胞a、一、選擇題3植物體細胞雜交的結果是（C）A.產(chǎn)生雜種植株B產(chǎn)生雜種細胞C原生質(zhì)體融合D形成愈傷組織4科學家把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進行誘導融合，培育出的驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的達到驅(qū)蚊且對人體無害的效果。下列關于驅(qū)蚊草培育的敘述中，錯誤的是（C）A驅(qū)蚊草的培育屬于細胞工程育種，其優(yōu)點是能克服遠源雜交不親和的障礙B驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶果膠酶、PEG等試劑或離心、振動、電刺激等方法C驅(qū)蚊草培育過程是植物體細胞雜交，不同于植物組織培養(yǎng)無愈傷組織和試管苗形成D驅(qū)蚊草不能通過天竺葵和香茅草雜交而獲得是因為不同物種間存在生殖隔離5（2005，上海）將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成幼苗時，下列條件中不需要的是（D）A、具有完整細胞核的細胞B、一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C、離體狀態(tài)D、導入指定基因6植物體細胞雜交的目的中錯誤的是（A）A.把兩個植物體的優(yōu)良性狀集中在雜種植株上B.獲得雜種植株C.克服遠源雜交不親和的障礙D.實現(xiàn)原生質(zhì)體的融合7植物組織培養(yǎng)的用途中不正確的是（D）A.快速繁殖B.生產(chǎn)新品種C生產(chǎn)生物堿D生產(chǎn)白細胞介素28A種植物的細胞和B種植物細胞的結構如右圖所示（僅顯示細胞核），將A、B兩種植物細胞去掉細胞壁后，誘導二者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細胞，若經(jīng)過組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是（）A二倍體；基因型是DdYyRrB三倍體；基因型是DdYyRrC四倍體；基因型是DdYyRrD四倍體；基因型是DDddYYyyRRrr9以下關于原生質(zhì)的敘述，正確的是（C）A、原生質(zhì)泛指細胞內(nèi)的基質(zhì)B、原生質(zhì)就是細胞質(zhì)C、一個動物細胞就是一團原生質(zhì)D、細胞膜、細胞核和細胞壁是原生質(zhì)10不能人工誘導原生質(zhì)體融合的方法是（D）A.振動B.電刺激C.PEG試劑D重壓11植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（C）A.給予適宜的營養(yǎng)和外界條件B.導入其他植物細胞的基因C.脫離母體后給予適宜營養(yǎng)和外界條件D.將成熟篩管細胞核移植到去核的卵細胞內(nèi)12細胞具有全能性的原因是（C）A.生物體細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能B.生物體的每一個細胞都具有全能性C.生物體的每一個細胞都含有個體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個細胞都是由受精卵發(fā)育來的13植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是指（C）A.植物體的分生組織通過細胞分裂產(chǎn)生新細胞B未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程C植物的器官、組織或細胞，通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程14.下列植物細胞全能性最高的是（B）A.形成層細胞B.韌皮部細胞C.木質(zhì)部細胞D.葉肉細胞15植物組織培養(yǎng)過程的順序是（A）離體的植物器官、組織或細胞根、芽愈傷組織脫分化再分化植物體ABCD16下列有關細胞工程的敘述不正確的是（C）A.在細胞整體水平上定向改變遺傳物質(zhì)B在細胞器水平上定向改變遺傳物質(zhì)C在細胞器水平上定向改變細胞核的遺傳物質(zhì)D在細胞整體水平上獲得細胞產(chǎn)品17下列細胞全能性最高的是（C）A植物的卵細胞B植物的精子細胞C被子植物的受精卵D被子植物的的葉肉細胞18植物體細胞融合完成的標志是（A）A、產(chǎn)生新的細胞壁B、細胞膜發(fā)生融合C、細胞膜發(fā)生融合D、細胞膜發(fā)生融合19.植物體細胞雜交的目的是（D）A.用酶解法去掉細胞壁分離出有活力的原生質(zhì)體B.以人工誘導法使兩個不同植物的原生質(zhì)體融合C.用植物組織培養(yǎng)法培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體得到雜種植株D.通過以上三者來完成20.下列提法正確的是：（D）A、原生質(zhì)專指細胞質(zhì)B、人體內(nèi)的水都屬于原生質(zhì)C、細胞核不是原生質(zhì)D、一個動物細胞就是一團原生質(zhì)21（多選）有關原生質(zhì)體的下列敘述中，正確的是(AB)A組成原生質(zhì)體的主要生命物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸B原生質(zhì)體包括細胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質(zhì)C被脫掉細胞壁的植物裸露細胞是原生質(zhì)體D原生質(zhì)體只能用于植物細胞工程緒論復習題及參考答案一、填空：1、根據(jù)培養(yǎng)的材料，植物組織培養(yǎng)分：愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)等類型。2、植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個階段：萌芽階段、奠基階段和快速發(fā)展和應用階段。3、1902年，Haberlandt提出了植物細胞“全能性”學說，1934年，White出版了植物組織培養(yǎng)手冊從而使植物組織培養(yǎng)為一門新興學科。二、名詞解釋：1、植物組織培養(yǎng)(planttissueculture)：是指通過無菌和人工控制的環(huán)境條件下，利用適當?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器官、組織、細胞及原生質(zhì)體進行培養(yǎng)，使其再生細胞或完整植株的技術。由于培養(yǎng)材料已脫離了母體，又稱為植物離體培養(yǎng)（Plantcultureinvitro）。2、脫分化（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化。3、再分化（redifferentiation）：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)又可以重新分化成根或芽等器官，這一過程稱為植物細胞的再分化。4、外植體(explant)：由活體（invivo)植物體上切取下來的，用于組織培養(yǎng)的各種接種材料。包括各種器官、組織、細胞或原生質(zhì)體等5、愈傷組織(callus)：原指植物在受傷之后于傷口表面形成的一團薄壁細胞，在組培中則指在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團不規(guī)則的薄壁細胞，多在植物體切面上產(chǎn)生。三、問答題：1、簡述植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)？植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是細胞全能性學說，即植物體的每一個細胞都攜帶有一套完整的基因組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。2、植物組織培養(yǎng)有哪些特點？（1）培養(yǎng)條件可以人為控制（2）生長周期短，繁殖率高：（3）管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制：3、植物組織培養(yǎng)的分類？（1）根據(jù)培養(yǎng)對象不同：組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等；（2）根據(jù)培養(yǎng)物培養(yǎng)過程：初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)；（3）根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)：固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)。4、植物組織培養(yǎng)主要應用于哪些方面？（1）快速繁殖運用組織培養(yǎng)的途徑，一個單株一年可以繁殖幾萬到幾百萬個植株；（2）種苗脫毒針對病毒對農(nóng)作物造成的嚴重危害，通過組織培養(yǎng)可以有效地培育出大量的無病毒種苗；（3）培育和創(chuàng)制新品種利用組織培養(yǎng)可以使難度很大的遠緣雜交取得成功，從而育成一些罕見的新物種；（4）大量生產(chǎn)次生代謝物質(zhì)通過植物細胞培養(yǎng)獲得的生物堿、維生素、色素、抗生素以及抗腫瘤藥物不下50多個大類，其中已有30多種次生物質(zhì)的含量在人工培養(yǎng)時已達到或超過親本植物的水平。植物細胞次生物質(zhì)的研制與生產(chǎn)碩果累累，后來居上。（5）植物種質(zhì)資源的離體保存植物組織培養(yǎng)結合超低溫保存技術，可以給植物種質(zhì)保存帶來一次大的飛躍。因為保存一個細胞就相當于保存一粒種子，但所占的空間僅為原來的幾萬分之一，而且在-193度的液氮中可以長時間保存，不像種子那樣需要年年更新或經(jīng)常更新。（6）人工種子人工種子便于貯藏和運輸，適合機械化播種；繁殖速度快，不受季節(jié)和環(huán)境限制，利于工廠化生產(chǎn)；體細胞胚由無性繁殖體系產(chǎn)生，可以固定雜種優(yōu)勢。植物組織培養(yǎng)復習題（習題）一、名詞解釋愈傷組織：在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序生長且沒有一定結構的薄壁細胞團。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進行離體培養(yǎng)的那部分組織或器官.脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細胞經(jīng)過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織的過程。半連續(xù)培養(yǎng)：利用培養(yǎng)罐進行大量細胞培養(yǎng)的一種方式。無性系變異：由任何形式的細胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株所表現(xiàn)出來的差異。胚狀體：在離體植物細胞、組織或器官培養(yǎng)過程中，由一個或一些體細胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，形成的與合子胚相類似的結構?？醋o培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看護組織培養(yǎng)細胞的一種方法。無融合生殖：由配囊中卵細胞以外的其他細胞發(fā)育成的單倍體植株。種質(zhì)：親代通過生殖細胞活體細胞直接傳遞給子代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。懸浮培養(yǎng)：將游離的植物單細胞或小細胞團，按一定的細胞密度在受到不斷拉動或搖動的液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的一種方式。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。選擇壓：在2個相對性狀之間，一個性狀被選擇而生存下來的優(yōu)勢。細胞全能性：任何有完整細胞核的植物細胞具有全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化，發(fā)育成完整植株的潛在能力。條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)集中加入高密度的細胞進行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時間后，這些細胞向培養(yǎng)基中分泌一些促進細胞生長的活性物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件化，使原來在合成培養(yǎng)基上不能分裂的細胞發(fā)生分裂。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體上分離下來，進行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式授給 無菌花粉，使其在試管內(nèi)實現(xiàn)受精的技術。同步化培養(yǎng)：培養(yǎng)基中大多數(shù)細胞都能同時通過細胞周期的各個階段。植板率：(每個平板上形成的細胞團數(shù) / 每個平板上接種的細胞總數(shù)) * 100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進行的連續(xù)多代的培養(yǎng)。無性系：由任何形式的細胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株。細胞融合：在自發(fā)或人工誘導下，兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。二、填空題1、根據(jù)外植體的的種類不同，組織培養(yǎng)可以分為組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、原生質(zhì)培養(yǎng)和胚胎培養(yǎng)五種類型。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀，組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種類型。2、對高溫高壓條件下易降解變質(zhì)的物質(zhì)，在滅菌時應采用過濾滅菌方法。3、植物組織培養(yǎng)過程中，細胞分裂素與生長素比值（CTK/IAA）高低決定了器官的分化類型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相等時則促進愈傷組織形成。4、在細胞懸浮培養(yǎng)過程中，細胞的生長周期呈“S”型曲線，可分為五個階段，分別是延滯期、對數(shù)生長期、直線生長期、緩慢期和靜止期。5、酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑，它們的使用濃度分別為70-75%和 0.1-1%；消毒時間的范圍分別為 0.2-2min和 2-15min。6、單細胞培養(yǎng)的方法有平板培養(yǎng)法、看護培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法和條件培養(yǎng)基培養(yǎng)法等四種方法。7、在細胞懸浮培養(yǎng)時，實現(xiàn)培養(yǎng)細胞同步化的方法有饑餓法和抑制法。8、實現(xiàn)細胞全能性的條件是組織或器官解離和給予所需的營養(yǎng)物質(zhì)。9、常用于誘導愈傷組織的植物激素是2，4-D。10、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為0.10.25mm。11、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護劑一般是二甲基亞砜（DMSO)。12、支撐植物組織培養(yǎng)作為一門技術的兩個重要模式是培養(yǎng)基模式和激素調(diào)控模式。13、無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡顯微檢測法等14、用于細胞活力的測定方法有 TTC、FDA和 伊凡藍染色法。15、通過離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株的材料有花粉和未受精胚珠。16、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為小于0.3mm。17、植物離體快速繁殖的方式中，遺傳性狀穩(wěn)定的有器官型、短枝發(fā)生型。18、典型的人工種子由體細胞胚、人工胚乳和人工種皮構成。19、原生質(zhì)體的分離純化過程中要添加滲透壓穩(wěn)定劑和原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑提高原生質(zhì)產(chǎn)量和活力，屬于質(zhì)膜穩(wěn)定劑的有葡聚糖硫酸鉀 、CaCl2。20、根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點，快速繁殖的途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和原球莖發(fā)生型。21、組織培養(yǎng)中碳源的主要作用是合成有機物和維持合適的滲透壓。22、目前用于細胞融合的方法主要有自發(fā)融合和誘導融合兩種。23、原生質(zhì)體的純化方法有沉降法、懸浮法和界面法。24、懸浮培養(yǎng)中細胞生長的測定方法：細胞計數(shù)、細胞密實體積（PCV）及細胞總體積、細胞鮮重和干重、細胞有絲分裂的指數(shù)。25、振蕩培養(yǎng)的目的：改善液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)材料的通氣狀況。26、單倍體育種的主要有優(yōu)點是：縮短育種年限、后代不出現(xiàn)性狀分離。27、常用于誘導胡蘿卜胚性愈傷組織的植物激素是生長素，胚狀體的形成則是在細胞分裂素的促進下。28、在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward報道了胡蘿卜細胞懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers報道了馬鈴薯和番茄的融合培養(yǎng)；1960年Cooking報道了誘導雞紅細胞與酵母細胞融合培養(yǎng)。29、在胚乳培養(yǎng)中，由裸子植物胚乳發(fā)育成的植株為單倍體；被子植物胚乳發(fā)育成的植株為三倍體。30、組織培養(yǎng)中的突變可分為體細胞無性系變異和加選擇壓（化學物質(zhì)）誘導產(chǎn)生的變異。三、單選題1、常用于誘導愈傷組織的植物激素是（ B ）。A 6-BA B 2，4-D C IBA D ZT2、在用物理方法誘導原生質(zhì)體融合時，下列哪種方法不在此列（ C ）。A 電刺激 B 顯微操作 C 多聚化