毛細管氣相色譜法測定托拉塞米有機溶劑殘留量.doc

毛細管氣相色譜法測定托拉塞米有機溶劑殘留量摘要：目的 建立氣相色譜(GC)測定托拉塞米中甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯5種有機殘留量的測定方法。方法 采用直接進樣毛細管氣相色譜法，色譜柱為：DB-624色譜柱（30m530mm3.0mm），載氣為氮氣，F(xiàn)ID檢測器，DMSO為溶劑。結果 此色譜條件下被測物均能得到很好的分離，峰面積與質量濃度呈良好的線性關系，回收率良好。結論：方法簡便、靈敏，結果準確、可靠，適用于托拉塞米中有機殘留量的檢測。關鍵詞：托拉塞米；有機殘留量；毛細管氣相色譜法Detection of residual solvents in Torasemide by GCAbstract：Objective To develop a GC method for the residual solvents ( methanol，ethanol，dichlormethane，acetic ether，toluene， pyridine in TorasemideMethod The chromatographic systems included a DB-624 column, and a FID detector, nitrogen was used as carrier gas, and DMSO as solvent. Results The calibration curves of four solvents were linear and their recoveries were satisfactoryConclusion The method is accurate and reliable.It can be applied in detection of residual solvents in Torasemide.Key words: Torasemide；residual；GC托拉塞米是新一代高效髓袢利尿劑，于1993年在德國上市，次年在美國上市。20多年臨床應用證實，托拉塞米適應證廣，利尿作用迅速強大且持久，不良反應發(fā)生率低，更符合藥物經濟學要求，是臨床上值得推廣的一類高效利尿劑。托拉塞米有利尿、排Na+和排C1-作用，但不顯著改變腎小球濾過率、腎血漿流量和酸堿平衡。作用于髓袢升支粗段，干擾管腔細胞膜的Na+、K+、2C1-同向轉運體系，抑制C1-和Na+的重吸收，使管腔液NaCl的濃度增高，滲透壓增大，腎髓質間液的NaCl減少，滲透壓梯度降低，從而干擾尿的濃縮過程，使尿Na+，Cl-和水的排泄增加。人體研究也證實該品作用于該部位，對腎單元其他部位的影響尚不明確。該品的抗高血壓機制與其他利尿劑一樣尚未完全了解，可能是由于其降低了總外周阻力。由于在原藥合成過程中使用了有機溶劑甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯，在成品中可能會有一定量的殘留。按中國藥典2010年版(附錄)規(guī)定，該5種有機溶劑均有殘留限量。筆者參考了有關文獻采用直接進樣毛細管氣相色譜法，測定了托拉塞米原料藥中甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯的殘留量。方法簡便、靈敏，結果準確可靠。 1.儀器與試藥1.1 儀器 Agilent 7890A1.2 試藥 托拉塞米原料藥3批2 方法與結果2.1 色譜條件DB-624（30m530mm3.0m）毛細管柱; 程序升溫，起始40，保持10min，以每分鐘10升至100，保持2min,再以每分鐘40升至220，保持3min; FID檢測器, 檢測器溫度250;進樣口溫度：200; 分流比：5：1 ; 以DMSO為溶劑，直接進樣1l。2.2 供試品溶液與對照品溶液的制備對照品溶液：精密稱取甲醇0.3g，乙醇0.5g二氯甲烷0.06g，乙酸乙酯0.5g和甲苯0.089g，置50ml容量瓶中,加DMSO稀釋并定容到刻度，搖勻;精密量取5ml，置100ml容量瓶中，加DMSO稀釋并定容到刻度，搖勻。供試品溶液：取供試品0.1g，精密稱定，加1mlDMSO溶解，搖勻。 2.3 系統(tǒng)適用性溶液 取DMSO空白溶劑1l進行測定，結果表明溶劑無干擾。取對照品 溶液1l進行測定，記錄色譜圖，甲醇tR5.9min，乙醇tR8.0min，二氯甲烷tR10.8min，乙酸乙酯tR14.4min，甲苯tR19.3min。結果表明，各被測溶劑之間分離良好。2.4 線性范圍及標準曲線取甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯適量，精密稱定，用DMSO稀釋制成一系列溶液，照上述色譜條件分別進行測定，以被測物峰面積為縱坐標，以被測物的質量濃度為橫坐標進行線性回歸。上述5種被測物的線性范圍（g/ml)依次是：30.0360， 50.0600，6.072.0，50.0600，8.9106.8?；貧w方程及相關系數(shù)依次是: Y1 = 1206.31 - 3.8843，r1=0.9998;Y2 =1502.92 - 13.1780，r2=0.9999;Y3= 1577.43 - 0.9426，r3=0.9999;Y4= 5350.24 - 12.9950，r4=0.9997;Y5 =7191.75 - 2.2386， r5=0.9999。2.5精密度實驗在上述色譜條件下,取對照品溶液，連續(xù)進樣6次，計算對照品溶液中被測溶劑的RSD依次為甲醇3.56% ，乙醇3.72%，二氯甲烷2.96%，乙酸乙酯2.82%，甲苯3.76%。2.6最低檢測限取對照品溶液用DMSO逐步稀釋,依據(jù)S/N3，確定甲醇，乙醇，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲苯的最低檢測限依次是1.2，9.6，3.8，1.2，0.5。2.7 回收率實驗取甲醇0.30g，乙醇0.5g，二氯甲烷0.06g，乙酸乙酯0.5g，甲苯 0.89，精密稱定，置已加少許DMSO的10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻。移取儲備液 1.0ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻，即得每1ml中含甲醇3000g，乙醇5000g，二氯甲烷600g，乙酸乙酯5000g，甲苯890g的混合溶液。 溶液1: 精密移取混合溶液0.8ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻，即得對照品溶液的80%溶液。溶液2: 精密移取混合溶液1.0ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻，即得對照品溶液的100%溶液。溶液3: 精密移取混合溶液1.2ml，置10ml容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻，即得對照品溶液的120%溶液。取相同批次的托拉塞米0.1g，精密稱定,平行9份，分別移取溶液1、溶液2和溶液3各1.0ml溶解，每3份加一種溶液，分別搖勻，即得9份供試品溶液。按外標法以峰面積計算回收率?；厥章室来畏謩e為: 103.7%，105.1%，104.4%，102.2%，101.4%，RSD在2.42%4.19%之間。2.8供試品的測定照2.2 項下的方法制備供試