高中生物 專題2 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)同步輔導(dǎo)與檢測(cè)課件 新人教版選修1.ppt

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 手提式滅菌鍋結(jié)構(gòu)示意圖 高壓蒸汽滅菌法是微生物學(xué)研究和教學(xué)中應(yīng)用最廣 效果最好的濕熱滅菌方法 多數(shù)細(xì)菌和真菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在60 左右處理15min后即可被殺死 酵母菌和真菌的孢子更加耐熱 需在80 以上處理才能被殺死 而細(xì)菌的芽孢更耐熱 一般要121 處理15min以上才能被殺死 高壓蒸汽滅菌是在密閉的高壓蒸汽滅菌器 鍋 中進(jìn)行的 知識(shí)清單 培養(yǎng)基 1 概念 人們按照微生物對(duì) 的不同需求 配制出供其 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì) 2 種類 按照培養(yǎng)基的 劃分為 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基 3 營(yíng)養(yǎng)要素 各種培養(yǎng)基一般都含有水 此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) 以及 的要求 1 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖2 物理狀態(tài)液體固體3 碳源氮源無(wú)機(jī)鹽ph特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氧氣 嘗試應(yīng)用 1 自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別在于 a 碳源b 氮源c 無(wú)機(jī)鹽d 生長(zhǎng)因子 解析 自養(yǎng)型微生物主要包括進(jìn)行光合作用或進(jìn)行化能合成作用的微生物 他們能夠利用co2來(lái)合成自身所需的有機(jī)物 而異養(yǎng)型微生物主要是直接利用外界的有機(jī)物來(lái)合成自生所需的有機(jī)物 所以他們培養(yǎng)基的主要差別就在于自養(yǎng)型微生物主要是利用無(wú)機(jī)物中的碳 而異養(yǎng)型微生物主要是利用有機(jī)物中的碳 答案 a 2 關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng) 說(shuō)法正確的是 a 同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源b 凡是碳源都能提供能量c 除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽d 無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量解析 此題考查我們對(duì)微生物的營(yíng)養(yǎng)和能源的理解 對(duì)一些微生物來(lái)說(shuō) 含c h o n的化合物既是碳源 又是氮源 co2是光能自養(yǎng)細(xì)菌的碳源 但不能提供能量 co2和n2是無(wú)機(jī)物 也是微生物的碳源和氮源 硝化細(xì)菌所利用的氮源是無(wú)機(jī)氮源氨 同時(shí)氨也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能源 答案 d 知識(shí)清單 無(wú)菌技術(shù) 1 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止 的入侵 具體操作如下 1 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的 操作者的衣著和手進(jìn)行 和 2 將用于微生物培養(yǎng)的 和 等器具進(jìn)行滅菌 3 為避免周圍環(huán)境中 的污染 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 進(jìn)行 4 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸 1 外來(lái)雜菌 1 空間清潔消毒 2 器皿接種用具培養(yǎng)基 3 微生物酒精燈火焰附近 4 周圍的物品 2 消毒和滅菌 1 消毒是指使用較為 的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或 對(duì)人體有害的微生物 不包括芽孢和孢子 常用的方法有 消毒法和 消毒法 2 滅菌是指使用 的理化因素殺死物體內(nèi)外 的微生物 包括芽孢和孢子 常見(jiàn)的方法有 滅菌 滅菌 滅菌 2 1 溫和內(nèi)部一部分煮沸化學(xué)藥劑 2 強(qiáng)烈所有灼燒干熱高壓蒸汽 嘗試應(yīng)用 1 微生物的培養(yǎng)中 要嚴(yán)格消毒 滅菌 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作者采取的措施一般為 a 紫外線消毒b 化學(xué)消毒c 化學(xué)滅菌d 干熱滅菌 b 2 無(wú)菌技術(shù)包括以下幾個(gè)方面的敘述 其中錯(cuò)誤的是 a 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間 操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌b 將用于微生物培養(yǎng)的器皿 接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌c 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行d 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸 解析 在實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作中 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間 操作者的衣著和手 進(jìn)行清潔和消毒 將用于微生物培養(yǎng)的器皿 接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌 答案 a 知識(shí)清單 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 步驟 計(jì)算 稱量 溶化 倒平板 滅菌 嘗試應(yīng)用 1 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是 a 計(jì)算 稱量 倒平板 溶化 滅菌b 計(jì)算 稱量 溶化 倒平板 滅菌c 計(jì)算 稱量 溶化 滅菌 倒平板d 計(jì)算 稱量 滅菌 溶化 倒平板 c 2 1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基含牛肉膏 蛋白胨 nacl 瓊脂的量分別為 a 5 0g10 0g5 0g30 0gb 10 0g5 0g5 0g20 0gc 5 0g10 0g10 0g20 0gd 5 0g10 0g5 0g20 0g d 知識(shí)清單 純化大腸桿菌 方法 微生物接種最常用的是 和 法 1 平板劃線法 通過(guò) 在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù) 的操作 將聚集的菌種逐步 分散到培養(yǎng)基的表面 2 稀釋涂布平板法 將菌液進(jìn)行一系列的梯度 然后將不同稀釋度的菌液分別 到瓊脂固體培養(yǎng)基表面 進(jìn)行培養(yǎng) 平板劃線法稀釋涂布平板1 接種環(huán)劃線稀釋2 稀釋涂布 嘗試應(yīng)用 1 下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯(cuò)誤的是 a 將接種環(huán)放在火焰上灼燒b 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液c 蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行d 劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連 d 2 涂布平板操作需要用到 a 接種環(huán) 滴管 酒精燈b 接種環(huán) 移液管 酒精燈c 涂布器 移液管 酒精燈d 涂布器 接種環(huán) 酒精燈 c 菌種的保藏 知識(shí)清單1 臨時(shí)保藏法 適用于 使用的菌種 2 甘油管藏法 適用于需要 保存的菌種 1 頻繁2 長(zhǎng)期 1 菌種保藏應(yīng)該控制的條件是 濕度 低溫 干燥 有光 隔絕空氣 適當(dāng)有氧 a b c d 嘗試應(yīng)用 解析 考慮不同類型微生物的保藏條件時(shí) 一定要從該微生物的代謝入手考慮 其保藏條件應(yīng)該是不利于代謝且不影響生存的 微生物具有相對(duì)易變異性 在保藏菌種的過(guò)程中 必須使微生物的代謝處于最不活躍狀態(tài) 這樣才能在一定時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活力 答案 d 2 下列有關(guān)菌種保藏的敘述錯(cuò)誤的是 a 對(duì)于頻繁使用的菌種可采用臨時(shí)保藏法b 對(duì)于長(zhǎng)期保存的菌種可采用甘油管藏的方法c 臨時(shí)保藏的菌種易被污染或產(chǎn)生變異d 甘油管藏時(shí)要將甘油瓶放入4 的冰箱中保藏 解析 對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種 可采用甘油管藏法 即在3ml甘油瓶中加入1ml甘油后滅菌 將1ml培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中 與甘油充分混勻后 放在 20 的冷凍箱中保存 答案 d 一 常見(jiàn)的消毒滅菌方法歸納 二 微生物培養(yǎng)中要注意的幾個(gè)問(wèn)題1 配制培養(yǎng)基根據(jù)所培養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)及功能特點(diǎn) 選擇合適的培養(yǎng)基配方進(jìn)行配制 2 無(wú)菌技術(shù) 1 實(shí)驗(yàn)者 實(shí)驗(yàn)室 操作空間 實(shí)驗(yàn)器材 培養(yǎng)基等必須嚴(yán)格消毒滅菌 2 整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程要嚴(yán)格無(wú)菌操作 在酒精燈火焰附近進(jìn)行 3 操作過(guò)程實(shí)驗(yàn)者不要講話 不要吃東西 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后接觸微生物的實(shí)驗(yàn)器材及培養(yǎng)基要滅菌后處理 3 設(shè)置對(duì)照為排除實(shí)驗(yàn)中各種因素的干擾 保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性 要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn) 對(duì)照實(shí)驗(yàn)要遵循單一變量原則 4 做好標(biāo)記若實(shí)驗(yàn)中使用的平板較多 為避免混淆 最好在使用前做好標(biāo)記 注明培養(yǎng)基種類 培養(yǎng)日期 培養(yǎng)人及樣品稀釋度等 三 大腸桿菌的純化培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析大腸桿菌的純化培養(yǎng)分為制備培養(yǎng)基和純化大腸桿菌兩個(gè)階段 實(shí)驗(yàn)分為實(shí)驗(yàn)組 接種大腸桿菌的培養(yǎng)基 和對(duì)照組 未接種大腸桿菌的培養(yǎng)基 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程一定要嚴(yán)格消毒滅菌 否則就無(wú)法得到純化的大腸桿菌 導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗 下面是可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相應(yīng)的原因分析 1 對(duì)照組未長(zhǎng)出菌落 實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)出顏色 形狀 大小基本一致的菌落 說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌徹底 接種操作及培養(yǎng)時(shí)符合要求 2 對(duì)照組未長(zhǎng)出菌落 實(shí)驗(yàn)組上出現(xiàn)了其他菌落 說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌徹底 培養(yǎng)時(shí)符合要求 但接種操作未達(dá)到要求 3 對(duì)照組長(zhǎng)出菌落 說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底 培養(yǎng)基及牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備 下列關(guān)于配制培養(yǎng)基的有關(guān)敘述中 正確的是 a 制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂b 發(fā)酵工程中一般用液體培養(yǎng)基c 氮源主要是為微生物提供能量d 牛肉膏主要為微生物提供氮元素 解析 本題考查微生物營(yíng)養(yǎng)的有關(guān)知識(shí) 制作固體培養(yǎng)時(shí)必須加入凝固劑 瓊脂是常用的凝固劑 但不是唯一的凝固劑 例如明膠也可作為凝固劑 發(fā)酵工程一般都是用液體培養(yǎng)基 原因是液體培養(yǎng)基便于調(diào)節(jié)ph 溫度 溶氧等 而且液體培養(yǎng)基還能有利于微生物充分利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 氮源主要是作為微生物合成蛋白質(zhì)和核酸的原料 牛肉膏主要為微生物提供碳源 磷酸鹽和維生素 答案 b名師點(diǎn)睛 由于不同的微生物生長(zhǎng)對(duì)ph的需求不同 如培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至酸性 培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或微堿性 所以在培養(yǎng)基各組分溶化后需要先用酸或堿將ph調(diào)至微生物生長(zhǎng)的最適宜條件 再進(jìn)行滅菌處理 變式訓(xùn)練 1 下列制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述 錯(cuò)誤的是 a 操作順序?yàn)橛?jì)算 稱量 溶化 倒平板 滅菌b 將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯c 將培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)進(jìn)行倒平板d 將平板冷卻凝固約5 10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置解析 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算 稱量 溶化 滅菌 倒平板 順序不能顛倒 牛肉膏容易吸潮 所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后 用玻棒取出稱量紙 將培養(yǎng)基冷卻至50 用手觸摸錐形瓶感覺(jué)剛剛不燙手時(shí)倒平板 平板冷卻后還需倒置 答案 a 微生物培養(yǎng)中的無(wú)菌操作技術(shù) 細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采用了高壓蒸汽 酒精 火焰灼燒等幾種不同的處理 這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌 a 接種針 手 培養(yǎng)基b 高壓鍋 手 接種針c 培養(yǎng)基 手 接種針d 接種針 手 高壓鍋 解析 此題考查學(xué)生對(duì)無(wú)菌技術(shù)的掌握 高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個(gè)設(shè)備 通常用于培養(yǎng)基的滅菌 用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法 火焰灼燒 可以迅速?gòu)氐椎販缇?適用于微生物的接種工具 如接種環(huán) 答案 c名師點(diǎn)睛 微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌操作包括消毒和滅菌兩大類 分別又有各種不同的方法 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間 操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒 將用于微生物培養(yǎng)的器皿 接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌 變式訓(xùn)練 2 下列操作與消毒和滅菌無(wú)關(guān)的是 a 接種前用火焰灼燒接種環(huán)b 接種前用酒精擦拭雙手c 將平板倒置 放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)d 接種在酒精燈的火焰旁完成解析 要建立 有菌觀念 接種用具 器皿 空氣中都充滿了微生物 都有污染的可能 必須嚴(yán)格地消毒 滅菌 a b d都是實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中常用的消毒和滅菌方法 將平板倒置 放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)與消毒 滅菌無(wú)關(guān) 答案 c 水平測(cè)試1 產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是 a 一個(gè)細(xì)菌 液體培養(yǎng)基b 許多細(xì)菌 液體培養(yǎng)基c 一個(gè)細(xì)菌 固體培養(yǎng)基d 許多細(xì)菌 固體培養(yǎng)基 c 解析 在液體培養(yǎng)基中生活的細(xì)菌 無(wú)論是一個(gè)還是許多 肉眼都是不可見(jiàn)的 在固體培養(yǎng)基上的細(xì)菌 當(dāng)數(shù)目較少時(shí)也是不可見(jiàn)的 當(dāng)固體培養(yǎng)基上有許多細(xì)菌并且集中在較小范圍時(shí) 肉眼才可見(jiàn) 菌落就是這樣的情況 菌落是一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體 形成于固體培養(yǎng)基上 有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu) 肉眼可見(jiàn) 菌落的形態(tài)結(jié)構(gòu)與細(xì)菌的種類有關(guān) 因而菌落常常作為菌種鑒別的重要依據(jù) 依據(jù)教材敘述 菌落可由一個(gè)細(xì)菌形成 也可由少數(shù)幾個(gè)細(xì)菌形成 形成的菌落 有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)